• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    細(xì)胞外基質(zhì)在皮膚組織創(chuàng)面修復(fù)中的研究進(jìn)展

    2019-02-25 15:37:58劉青武何秀娟張金超
    醫(yī)學(xué)研究雜志 2019年9期
    關(guān)鍵詞:膠原生長因子干細(xì)胞

    劉青武 何秀娟 張金超 林 燕 李 萍

    人類皮膚細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix, ECM)是由細(xì)胞合成并分泌到細(xì)胞外,分布在細(xì)胞表面或細(xì)胞之間的大分子物質(zhì),主要是水、蛋白質(zhì)、蛋白聚糖和多糖。ECM支持并連接組織結(jié)構(gòu),調(diào)節(jié)組織的生長和細(xì)胞的生理活動(dòng),其在機(jī)體發(fā)育、組織動(dòng)態(tài)平衡及創(chuàng)面修復(fù)中起著重要作用。為便于了解ECM用于皮膚創(chuàng)面修復(fù)治療的研究現(xiàn)狀,現(xiàn)將近年研究進(jìn)展綜述如下。

    一、ECM的結(jié)構(gòu)和作用

    1.ECM的結(jié)構(gòu):ECM是由纖維蛋白和基質(zhì)所構(gòu)成的復(fù)雜三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),纖維蛋白主要有膠原蛋白、彈性蛋白和纖維粘連蛋白,膠原蛋白是細(xì)胞外基質(zhì)中主要的蛋白質(zhì),Ⅰ~Ⅲ型膠原蛋白含量最豐富,Ⅰ型膠原具有很強(qiáng)的抗張強(qiáng)度,Ⅱ型膠原主要分布于軟骨中,Ⅲ型膠原形成細(xì)微的膠原纖維網(wǎng),廣泛分布于疏松結(jié)締組織。纖維蛋白將細(xì)胞粘連在一起構(gòu)成組織,并提供細(xì)胞外網(wǎng)架,維持細(xì)胞形態(tài)。而基質(zhì)成分主要包括蛋白聚糖和糖胺聚糖,在纖維蛋白的周圍形成凝膠狀物質(zhì),參與細(xì)胞間及細(xì)胞與ECM的相互作用,對(duì)細(xì)胞活性有一定影響[1]。

    2.ECM的作用:皮膚作為機(jī)體屏障的能力,主要由維持皮膚連續(xù)性和完整性并在受傷后修復(fù)皮膚的細(xì)胞決定。皮膚修復(fù)依賴于多種細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及細(xì)胞的功能活動(dòng),涉及多種調(diào)節(jié),包括生長因子、細(xì)胞因子、基質(zhì)金屬蛋白酶、細(xì)胞受體和ECM成分等。ECM作為皮膚細(xì)胞生存的微環(huán)境,不僅對(duì)組織細(xì)胞起支持保護(hù)和營養(yǎng)作用,還與細(xì)胞的增殖、分化、代謝、識(shí)別、黏著及遷移等基本生命活動(dòng)密切相關(guān)。ECM影響著干細(xì)胞/祖細(xì)胞的細(xì)胞極性、屏障功能及其微環(huán)境,以適應(yīng)細(xì)胞間通訊、細(xì)胞遷移等不同需求。ECM組分中的蛋白質(zhì)家族可以相互作用,比如,纖維粘連蛋白具有與其他蛋白質(zhì)結(jié)合的位點(diǎn),而誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路及細(xì)胞功能的改變。在急性皮膚創(chuàng)傷時(shí),膠原蛋白、蛋白聚糖和糖胺聚糖取代臨時(shí)ECM,參與肉芽組織的形成,大量ECM的聚集,刺激表皮細(xì)胞遷移,促進(jìn)傷口再表皮化[2]。ECM的組分可調(diào)節(jié)生長因子的釋放、血管再生、組織病理改變和炎性應(yīng)答等,對(duì)于機(jī)體修復(fù)和再生有非常重要的作用,是決定修復(fù)質(zhì)量的關(guān)鍵因素之一。

    在廣泛的燒傷及其他全層皮膚傷口中,如糖尿病潰瘍、嚴(yán)重?zé)齻湍鲜中g(shù)治療惡性腫瘤等,往往涉及皮膚移植,比如自體、同種異體、異種皮膚移植物等。但由于自體皮膚有限,移植后產(chǎn)生繼發(fā)缺損、瘢痕,異體移植物免疫反應(yīng)以及各種疾病風(fēng)險(xiǎn)等缺陷,引起了臨床對(duì)更先進(jìn)皮膚替代品的需求。ECM可來源于人體、動(dòng)物(牛、豬等)、植物等,這些材料被稱為生物支架[3]。隨著基因工程、組織工程的迅速發(fā)展,利用基因技術(shù)、組織工程皮膚技術(shù)將ECM用于修復(fù)全層皮膚創(chuàng)口,已經(jīng)成為創(chuàng)傷領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。

    二、脫細(xì)胞組織或器官來源的ECM

    脫細(xì)胞組織或器官來源的ECM的機(jī)械結(jié)構(gòu)及生物功能,與天然組織非常相似,而脫細(xì)胞的目的就是去除潛在的免疫應(yīng)答的細(xì)胞組分,為宿主細(xì)胞和血管的生長,提供良好生物相容性的生物支架[4]。因此,脫細(xì)胞生物材料可更好的刺激局部環(huán)境修復(fù)組織,無需基于細(xì)胞療法的監(jiān)管和科學(xué)挑戰(zhàn)。目前組織或器官脫細(xì)胞的方法包括化學(xué)法、酶法和機(jī)械法,化學(xué)法是用表面活性劑或酸堿破壞細(xì)胞形態(tài)而去細(xì)胞,機(jī)械法通過凍融、超臨界二氧化碳或提供高靜水壓的方式使組織細(xì)胞膨脹破裂,留下基本上由ECM成分組成的材料[5]。不同的脫細(xì)胞方法決定了ECM保留成分及數(shù)量的不同,影響ECM的生物學(xué)活性。但普通化學(xué)法、酶法和機(jī)械法脫細(xì)胞的方法存在著遺傳物質(zhì)(DNA)去除不完全或ECM成分損失或生物活性受損等缺點(diǎn)[6]。郭寶林等[7]使用磷脂酶A2-脫氧膽酸鈉(phospholipase A2-sodium deoxycholate,PLA2-SDC)復(fù)合脫氧核糖核酸酶(deoxyribonuclease,DNase)、核糖核酸酶(ribonuclease,RNase)的去細(xì)胞方法,制備的ECM無遺傳物質(zhì)保留,而且膠原、膠原層連蛋白和纖連蛋白等保存良好,該方法的優(yōu)點(diǎn)是操作時(shí)間短,ECM成分暴露時(shí)間短,對(duì)ECM的生物活性影響小,這種改良的酶脫細(xì)胞法為ECM支架的提取提供了新的思路。

    1.人胎盤來源的ECM:人胎盤含有豐富的ECM成分和保存完好的多種內(nèi)源性生長因子,如胰島素樣生長因子-1、表皮生長因子、血小板衍生生長因子、成纖維細(xì)胞生長因子-2、血管內(nèi)皮生長因子和轉(zhuǎn)化生長因子-β等,這些細(xì)胞因子通過胎盤傳遞給胎兒,在促進(jìn)胎兒發(fā)育中起重要作用。此外,胎盤的抗炎、抗菌、低免疫原性、抗痙攣和傷口保護(hù)等生物學(xué)特性,使其成為治療燒傷皮膚、腿部潰瘍和眼科疾病的理想材料。

    Choi等[8]利用人胎盤制造多孔的脫細(xì)胞ECM片,其中含有來自胎盤的各種保存完好的蛋白質(zhì)和生物活性分子,并將其用于治療兔全層皮膚傷口。在早期階段,ECM片有效地吸收傷口滲出物,并緊密附著在傷口表面。植入后數(shù)周,傷口完全閉合,表皮細(xì)胞排列整齊,表皮和真皮的雙層結(jié)構(gòu)恢復(fù),并形成新的毛囊和微血管??傮w而言,ECM片是具有與正常皮膚組織相似的真皮替代物,人胎盤衍生的ECM片提供有利于細(xì)胞生長和分化的微環(huán)境,從而促進(jìn)全層傷口的愈合。Rameshbabu等[9]在胎盤ECM中加入絲素蛋白,改進(jìn)其機(jī)械性能,制成的多孔復(fù)合ECM海綿。在體外實(shí)驗(yàn)中,多孔復(fù)合ECM海綿能促進(jìn)人包皮成纖維細(xì)胞、人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞和人羊膜來源的干細(xì)胞的黏附、滲透、增殖和遷移。此外,在大鼠全層傷口模型中植入多孔復(fù)合ECM海綿,明顯的促進(jìn)血管生成,增強(qiáng)肉芽組織形成和早期再上皮化,改善表皮-真皮連接的愈合。另外,皮下植入的多孔復(fù)合ECM海綿,對(duì)宿主沒有嚴(yán)重的免疫應(yīng)答。說明具有優(yōu)異物理機(jī)械性質(zhì)和細(xì)胞因子裝飾的多孔復(fù)合ECM海綿,可以是全厚度皮膚傷口的合適皮膚替代物。

    2.膽囊來源ECM:膽囊細(xì)胞來源的ECM是一種新型的無細(xì)胞蛋白質(zhì)可降解生物材料,該基質(zhì)富含膠原蛋白。膽囊源性ECM被證明可用于胃腸切除術(shù)和吻合術(shù),還具有類似于心臟瓣膜的微結(jié)構(gòu),支持瓣膜內(nèi)皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞的增殖。

    Poonam等[10]從豬膽囊中提取了膽囊源性ECM,并比較了其與市售膠原片,在大鼠全厚皮膚創(chuàng)面的愈合潛力,發(fā)現(xiàn)膽囊源性ECM通過增加切除傷口中的細(xì)胞增殖、新血管形成、膠原合成及上皮形成,增強(qiáng)傷口愈合活性,對(duì)大鼠全層皮膚創(chuàng)傷的修復(fù)效果優(yōu)于市售膠原片。Shakya等[11]使用陰離子生物洗滌劑制備源自牛脫細(xì)胞膽囊ECM,并發(fā)現(xiàn)牛脫細(xì)胞膽囊ECM比空白組創(chuàng)面更顯著的促進(jìn)傷口收縮、促進(jìn)表皮及新血管、纖維組織的增生,再次證明膽囊源性ECM具有修復(fù)全層皮膚傷口的潛力。

    3.豬皮來源ECM:郭寶林等[7]將脫細(xì)胞豬皮ECM用于小鼠全層皮膚損傷模型,經(jīng)組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)生理鹽水組小鼠第28天時(shí),創(chuàng)口愈合,而豬皮ECM創(chuàng)口在14天時(shí)愈合,豬皮ECM組創(chuàng)傷愈合速度有顯著提高。證實(shí)了ECM在創(chuàng)傷愈合中的促進(jìn)作用,脫細(xì)胞豬皮ECM也可以作為一種良好的皮膚支架材料。

    4.綿羊膀胱來源ECM:Zihayat等[12]從綿羊膀胱中提取ECM,觀察了綿羊膀胱ECM在鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病大鼠創(chuàng)面愈合中的作用,并與外用凡士林及對(duì)照組比較,ECM處理的動(dòng)物創(chuàng)面面積和創(chuàng)面愈合率均有顯著改善(P<0.01),ECM處理的傷口上皮化得更快。這與綿羊膀胱ECM所含的透明質(zhì)酸(HA)、膠原蛋白、彈性蛋白和生長因子,增加了角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖和遷移而促進(jìn)再上皮化有關(guān),但需要進(jìn)一步的研究來闡明ECM傷口愈合的確切機(jī)制。

    5.胎牛來源ECM:Neill等[3]用胎牛膠原(bovine fetal collagen,BFC)治療9例難愈性全層皮膚傷口的患者,并觀察了植入BFC后取得的活檢標(biāo)本中BFC的生物反應(yīng)。結(jié)果在植入2周后,BFC中見成纖維維細(xì)胞增生、新血管形成及疏松的嗜酸、淋巴細(xì)胞浸潤,未見中性粒細(xì)胞。隨著植入時(shí)間的增長,在27天時(shí),BFC中的成纖維細(xì)胞數(shù)量明顯增多?;颊咭浦睟FC治療時(shí)間最長的是9個(gè)月,BFC的膠原結(jié)構(gòu)已經(jīng)與正常膠原類似,移植區(qū)域未見明顯瘢痕。但與其他患者不同的是,來自1例患有凝血功能障礙的肝衰竭患者的移植物,由于受患者機(jī)體環(huán)境的影響,在20天時(shí)可見急性炎性反應(yīng)。說明BFC在大多數(shù)情況下,對(duì)宿主的組織耐受性較好,允許炎性細(xì)胞的遷移,支持肉芽組織的形成,有助于慢性傷口的愈合,但宿主和傷口因素也可能通過尚不清楚的機(jī)制導(dǎo)致BFC的功能障礙。所以,Neill等[3]建議在臨床使用BFC時(shí),BFC組織學(xué)的特征應(yīng)當(dāng)由參與患者創(chuàng)面治療的病理學(xué)專家評(píng)定。

    三、ECM作為干細(xì)胞載體

    干細(xì)胞療法提供了一種有希望的新技術(shù)來促進(jìn)傷口愈合,但干細(xì)胞移植后,常常出現(xiàn)死亡或從傷口部位遷移,大大降低了治療效果。而局部應(yīng)用具有抗氧化作用的化合物,可顯著改善傷口愈合過程并保護(hù)組織免受氧化損傷。脫細(xì)胞ECM可能是一種抗氧化治療方法,可以預(yù)防移植的間充質(zhì)干細(xì)胞的氧化損傷,對(duì)傷口愈合具有良好的效果[13]。

    豬小腸黏膜下層細(xì)胞外基質(zhì)作為一種運(yùn)載工具,具有天然的ECM成分,包括其膠原纖維網(wǎng)絡(luò),可為干細(xì)胞提供了合適的生存環(huán)境。Lam等[14]使用源自豬小腸黏膜下層的ECM貼片材料將脂肪來源的干細(xì)胞引入小鼠皮膚切口。并使用生物發(fā)光體內(nèi)成像所證實(shí),單獨(dú)移植至皮膚傷口的干細(xì)胞在移植后不能存活,相反,使用貼片進(jìn)行遞送,則使干細(xì)胞增殖和存活顯著增加,并且與未治療的傷口比較,在貼片上用干細(xì)胞處理的傷口中纖維化的區(qū)域(表明瘢痕形成)顯著減少。由于貼片是一種非侵入性地提供干細(xì)胞治療的方法,可以進(jìn)一步嘗試與各種干細(xì)胞聯(lián)合治療其他類型的傷口。

    四、ECM水凝膠

    人類脂肪組織來源豐富,并含有豐富的ECM蛋白和可溶性生長因子,故常用作ECM來源。

    Kim等[15]報(bào)告了基于人脂肪來源的可溶性ECM(soluble ECM, sECM)和甲基纖維素(methylcellulose, MC)形成的熱敏水凝膠,可通過注射以遞送干細(xì)胞。將提取的sECM與MC混合,可以改善熱敏水凝膠的機(jī)械性能。sECM-MC水凝膠的特征在于sECM含量、流變性質(zhì)和嵌入干細(xì)胞的能力。在小鼠全厚皮膚傷口中單次注射干細(xì)胞水凝膠后,傷口通過重新上皮化和新生血管化而迅速愈合,瘢痕形成最小。表明sECM-MC水凝膠是一種很有前途的干細(xì)胞遞送和組織再生的可注射載體,代表了水凝膠可以作為一種新型的生物支架方法。Zhu等[16]通過將透明質(zhì)酸和羧化殼聚糖加入到人類膠原中制成水凝膠制劑,發(fā)現(xiàn)水凝膠促進(jìn)了小鼠成纖維細(xì)胞的黏附、增殖和遷移,有利于促進(jìn)傷口愈合。其表現(xiàn)出良好的皮膚修復(fù)、藥物遞送的潛力。但關(guān)于水凝膠刺激傷口愈合的機(jī)制,仍需要進(jìn)一步研究。

    五、大豆蛋白/纖維素納米纖維支架仿制的皮膚ECM

    模擬ECM的生物支架,具有能夠支持參與再生的細(xì)胞生長的生物活性分子。大豆蛋白是從大豆中提取的一種膳食蛋白,具有類似于人體組織ECM蛋白的生物活性肽,這些ECM模擬肽可以促進(jìn)細(xì)胞黏附、增殖和遷移,支持組織再生。大豆蛋白含有植物雌激素,可作為雌性激素的結(jié)構(gòu)和功能類似物。大豆蛋白中的生物活性肽可增加皮膚ECM合成,促進(jìn)創(chuàng)面再上皮化[17]。大豆植物雌激素通過雌激素受體介導(dǎo)的信號(hào)通路,加速愈合過程,它還具有抗細(xì)菌、抗炎和抗氧化特性。大豆蛋白質(zhì)和植物雌激素的口服攝入,可加速老年女性和燒傷患者的皮膚再生[18]。

    Ahn等[19]利用旋轉(zhuǎn)噴射紡絲技術(shù),開發(fā)一種由醋酸纖維素(cellulose acetate, CA)和大豆蛋白水解物(soy protein hydrolysate, SPH)組成的完全植物納米纖維敷料。紡絲納米纖維成功地模擬了天然皮膚ECM的理化性質(zhì),并表現(xiàn)出高保水性能。由于其非動(dòng)物來源,可避免動(dòng)物源性蛋白的免疫原性、疾病傳播和病原體污染等缺點(diǎn)。體外實(shí)驗(yàn)表明,與聚己內(nèi)酯和CA納米纖維比較,CA/SPH納米纖維可促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖、生長、遷移、浸潤和整合素β1的表達(dá),并表現(xiàn)出低細(xì)胞毒性。在體內(nèi),CA/SPH納米纖維比CA納米纖維或未處理的對(duì)照組比較,能加速傷口愈合和組織再生,并以類似于其他纖維支架的方式減少瘢痕形成。這些結(jié)果證實(shí)了CA/SPH納米纖維作為一種新型傷口敷料的愈合潛力,來源于植物基質(zhì)的可再生支架可能成為下一代可再生敷料的研究方向。

    六、其 他

    1.胎盤生長因子(PIGF-2)序列:生長因子是一類通過與細(xì)胞膜受體結(jié)合,調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和功能的多肽類物質(zhì)。通過增強(qiáng)生長因子與細(xì)胞外基質(zhì)的結(jié)合,可促進(jìn)創(chuàng)傷愈合。

    Martino等[20]發(fā)現(xiàn)了位于胎盤生長因子(placental growth factor, PIGF-2)上的一個(gè)包含22個(gè)氨基酸的區(qū)域,能增強(qiáng)PIGF-2與ECM蛋白質(zhì)的結(jié)合力。Martino將該結(jié)構(gòu)域與血管內(nèi)皮生長因子-A、血小板衍生生長因子-BB和骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2融合而成的工程化生長因子對(duì)比未經(jīng)修飾的生長因子顯示出了更強(qiáng)的ECM親和力,更快的促進(jìn)了新血管形成和肉芽組織的生長,促進(jìn)傷口愈合,從而大大提高了生長因子對(duì)組織損傷修復(fù)的能力。

    2.縫隙連接蛋白43(connexin, Cx43):縫隙連接在1967年首次在肝細(xì)胞中被描述。目前,在人和嚙齒動(dòng)物皮膚中已經(jīng)鑒定出多達(dá)10個(gè)不同的連接蛋白家族成員。用Cx43反義寡脫氧核苷酸處理的受傷和燒傷的小鼠皮膚表現(xiàn)出加速的傷口愈合,增強(qiáng)的角質(zhì)形成細(xì)胞增殖以及成纖維細(xì)胞的遷移增加和更顯著的膠原沉積,這提示抑制連接蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是能促進(jìn)創(chuàng)傷愈合的[21]。Cogliati等[22]利用雜合子Cx43敲除小鼠,發(fā)現(xiàn)Cx43缺乏可促進(jìn)真皮成纖維細(xì)胞的增殖和活化,從而促進(jìn)再上皮化和創(chuàng)面愈合,促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)重塑因子的表達(dá)。這些數(shù)據(jù)再次證實(shí)了Cx43在皮膚創(chuàng)傷愈合中可能是一個(gè)新的治療靶點(diǎn)。

    綜上所述,ECM含有多種有益于細(xì)胞增殖的成分,在皮膚創(chuàng)面修復(fù)過程中具有重要作用,目前通過基因工程,特別是組織工程皮膚技術(shù),已能夠?qū)⑼N、異種或植物成分ECM用于人或動(dòng)物的創(chuàng)面修復(fù),并顯示了較好的修復(fù)效果。但是,關(guān)于ECM修復(fù)人的皮膚創(chuàng)面的研究仍較少,需要廣大研究者深入探索。

    猜你喜歡
    膠原生長因子干細(xì)胞
    干細(xì)胞:“小細(xì)胞”造就“大健康”
    造血干細(xì)胞移植與捐獻(xiàn)
    干細(xì)胞產(chǎn)業(yè)的春天來了?
    膠原無紡布在止血方面的應(yīng)用
    鼠神經(jīng)生長因子對(duì)2型糖尿病相關(guān)阿爾茨海默病的治療探索
    胃癌組織中成纖維細(xì)胞生長因子19和成纖維細(xì)胞生長因子受體4的表達(dá)及臨床意義
    紅藍(lán)光聯(lián)合膠原貼治療面部尋常痤瘡療效觀察
    鼠神經(jīng)生長因子修復(fù)周圍神經(jīng)損傷對(duì)斷掌再植術(shù)的影響
    干細(xì)胞治療有待規(guī)范
    轉(zhuǎn)化生長因子β激活激酶-1在乳腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義
    97人妻精品一区二区三区麻豆| www.精华液| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 免费观看人在逋| 成人av在线播放网站| 国产v大片淫在线免费观看| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 亚洲av五月六月丁香网| 色在线成人网| 久久精品综合一区二区三区| 欧美日韩福利视频一区二区| 精品久久久久久久久久免费视频| 两个人的视频大全免费| 麻豆国产97在线/欧美 | 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 久久欧美精品欧美久久欧美| 成在线人永久免费视频| 亚洲人与动物交配视频| 99精品在免费线老司机午夜| 成人特级黄色片久久久久久久| 黄色女人牲交| 一边摸一边抽搐一进一小说| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 香蕉久久夜色| 亚洲美女黄片视频| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 成人av在线播放网站| 怎么达到女性高潮| 老司机靠b影院| 美女黄网站色视频| tocl精华| 国产成人精品久久二区二区免费| 女同久久另类99精品国产91| 国产高清视频在线观看网站| 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 亚洲专区中文字幕在线| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲专区字幕在线| 一a级毛片在线观看| 午夜亚洲福利在线播放| 精品久久久久久成人av| 又紧又爽又黄一区二区| 岛国视频午夜一区免费看| 国产成人影院久久av| 欧美中文综合在线视频| 精品福利观看| 美女午夜性视频免费| 国产成人精品无人区| 国产69精品久久久久777片 | 亚洲真实伦在线观看| 久久久久久久午夜电影| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲午夜理论影院| 亚洲成人中文字幕在线播放| 亚洲五月天丁香| 日本三级黄在线观看| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 日韩欧美精品v在线| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 欧美另类亚洲清纯唯美| 在线观看舔阴道视频| 国产亚洲精品av在线| 欧美黑人巨大hd| 在线观看日韩欧美| 免费在线观看亚洲国产| 久久这里只有精品19| 久久午夜综合久久蜜桃| 91在线观看av| 亚洲国产高清在线一区二区三| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 国产免费av片在线观看野外av| 露出奶头的视频| cao死你这个sao货| 久久精品成人免费网站| 亚洲免费av在线视频| 日日爽夜夜爽网站| 小说图片视频综合网站| 黄色成人免费大全| 久久香蕉精品热| 欧美日本亚洲视频在线播放| 亚洲欧美日韩无卡精品| 午夜福利在线在线| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 亚洲18禁久久av| 欧美日韩乱码在线| 欧美乱妇无乱码| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲精品av麻豆狂野| 又黄又爽又免费观看的视频| 国产高清视频在线播放一区| 亚洲成人中文字幕在线播放| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲国产精品成人综合色| 久久性视频一级片| 国产1区2区3区精品| 大型黄色视频在线免费观看| 国产高清有码在线观看视频 | 黄色成人免费大全| 亚洲18禁久久av| 操出白浆在线播放| 在线观看舔阴道视频| 亚洲国产精品999在线| av视频在线观看入口| 欧美中文综合在线视频| 欧美一区二区精品小视频在线| 视频区欧美日本亚洲| 亚洲免费av在线视频| 色老头精品视频在线观看| 两个人免费观看高清视频| 久久精品91无色码中文字幕| 一级毛片高清免费大全| 午夜福利欧美成人| 午夜精品在线福利| 国产伦在线观看视频一区| www日本黄色视频网| 夜夜爽天天搞| 一级毛片精品| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 99久久无色码亚洲精品果冻| 精品久久久久久久久久免费视频| 无遮挡黄片免费观看| 国产成人精品无人区| 叶爱在线成人免费视频播放| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 少妇熟女aⅴ在线视频| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 中国美女看黄片| 亚洲人成网站高清观看| 男人舔女人的私密视频| 国产精品久久久久久人妻精品电影| www.熟女人妻精品国产| 男人舔女人的私密视频| 久久中文字幕人妻熟女| 最新美女视频免费是黄的| 麻豆久久精品国产亚洲av| 亚洲中文av在线| 国产区一区二久久| 亚洲成人免费电影在线观看| 中文字幕熟女人妻在线| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 色哟哟哟哟哟哟| 午夜福利免费观看在线| 成年女人毛片免费观看观看9| 午夜激情av网站| www.999成人在线观看| 美女 人体艺术 gogo| 免费观看精品视频网站| 婷婷精品国产亚洲av| 久久精品国产清高在天天线| cao死你这个sao货| 日本一本二区三区精品| 色在线成人网| 亚洲欧美日韩高清专用| 久久久久免费精品人妻一区二区| 免费电影在线观看免费观看| 少妇的丰满在线观看| 久久国产精品影院| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 日韩欧美国产在线观看| 97碰自拍视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 9191精品国产免费久久| 欧美黄色片欧美黄色片| xxxwww97欧美| 中文亚洲av片在线观看爽| 欧美一区二区国产精品久久精品 | 欧美一区二区精品小视频在线| 国产亚洲精品久久久久5区| 午夜成年电影在线免费观看| 精品人妻1区二区| 免费搜索国产男女视频| 日韩欧美在线乱码| 美女黄网站色视频| 精品欧美一区二区三区在线| 成人av一区二区三区在线看| 久久精品国产亚洲av高清一级| 亚洲天堂国产精品一区在线| 少妇人妻一区二区三区视频| 久9热在线精品视频| 特级一级黄色大片| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 麻豆久久精品国产亚洲av| 日韩欧美免费精品| 日日爽夜夜爽网站| 亚洲成人国产一区在线观看| 久久久国产成人精品二区| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 长腿黑丝高跟| 国产激情久久老熟女| 免费在线观看影片大全网站| 亚洲国产精品成人综合色| 欧美最黄视频在线播放免费| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 精品熟女少妇八av免费久了| av福利片在线观看| videosex国产| 中文在线观看免费www的网站 | 校园春色视频在线观看| 亚洲一区二区三区色噜噜| 我要搜黄色片| 真人做人爱边吃奶动态| 亚洲激情在线av| 99热6这里只有精品| 免费无遮挡裸体视频| 国产精品九九99| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲一区二区三区色噜噜| 日本a在线网址| 久久久久久久久免费视频了| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 可以在线观看的亚洲视频| 日韩国内少妇激情av| 日韩欧美三级三区| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 18禁观看日本| 高清毛片免费观看视频网站| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 亚洲熟妇熟女久久| 91大片在线观看| 亚洲精品在线观看二区| 亚洲成av人片免费观看| 亚洲最大成人中文| av在线天堂中文字幕| 最新美女视频免费是黄的| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 亚洲人成电影免费在线| 国产精品免费视频内射| 黄频高清免费视频| 波多野结衣巨乳人妻| 草草在线视频免费看| 亚洲人成伊人成综合网2020| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 一级片免费观看大全| 中文字幕高清在线视频| 深夜精品福利| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 此物有八面人人有两片| 嫁个100分男人电影在线观看| 男男h啪啪无遮挡| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 99热6这里只有精品| 国产精品亚洲一级av第二区| av在线天堂中文字幕| 午夜精品一区二区三区免费看| 在线视频色国产色| 操出白浆在线播放| 全区人妻精品视频| 俄罗斯特黄特色一大片| 一级毛片高清免费大全| 丰满人妻一区二区三区视频av | 51午夜福利影视在线观看| 精品一区二区三区av网在线观看| 两个人免费观看高清视频| e午夜精品久久久久久久| 在线观看www视频免费| 男女之事视频高清在线观看| 在线国产一区二区在线| 亚洲av成人av| 久久午夜综合久久蜜桃| 99久久精品热视频| 精品欧美一区二区三区在线| 最好的美女福利视频网| 久久这里只有精品19| 久久精品91蜜桃| 亚洲国产精品成人综合色| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 韩国av一区二区三区四区| 天堂动漫精品| 久久午夜综合久久蜜桃| 一区福利在线观看| 免费看日本二区| 精品电影一区二区在线| 久久香蕉激情| 亚洲一区二区三区色噜噜| 夜夜爽天天搞| 手机成人av网站| 中文字幕熟女人妻在线| 中文字幕av在线有码专区| 免费电影在线观看免费观看| 伦理电影免费视频| 久久这里只有精品中国| 亚洲男人的天堂狠狠| e午夜精品久久久久久久| 老汉色∧v一级毛片| av超薄肉色丝袜交足视频| 无限看片的www在线观看| 国产三级黄色录像| 制服人妻中文乱码| 国产男靠女视频免费网站| tocl精华| 亚洲精品中文字幕在线视频| 日本一二三区视频观看| 麻豆成人av在线观看| 亚洲av熟女| 日韩欧美在线乱码| 日韩三级视频一区二区三区| 国内精品久久久久精免费| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 老熟妇仑乱视频hdxx| 俺也久久电影网| 午夜激情av网站| 香蕉丝袜av| 看免费av毛片| 变态另类丝袜制服| 午夜精品一区二区三区免费看| 国产精品久久久久久精品电影| 狂野欧美激情性xxxx| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 操出白浆在线播放| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 免费在线观看黄色视频的| 全区人妻精品视频| 禁无遮挡网站| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲国产欧美一区二区综合| 婷婷亚洲欧美| 母亲3免费完整高清在线观看| 国产精品亚洲美女久久久| a级毛片a级免费在线| 一级毛片女人18水好多| 日韩三级视频一区二区三区| 亚洲欧美日韩高清在线视频| av国产免费在线观看| 亚洲欧美日韩高清专用| 悠悠久久av| 精品免费久久久久久久清纯| 国产在线精品亚洲第一网站| 亚洲18禁久久av| 久久热在线av| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 国产在线精品亚洲第一网站| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 伦理电影免费视频| 美女黄网站色视频| 亚洲天堂国产精品一区在线| 亚洲,欧美精品.| svipshipincom国产片| 男女下面进入的视频免费午夜| 欧美中文日本在线观看视频| 久久国产乱子伦精品免费另类| 欧美日韩福利视频一区二区| 97碰自拍视频| 桃色一区二区三区在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 老司机福利观看| 五月伊人婷婷丁香| 久久草成人影院| 国产野战对白在线观看| 精品久久蜜臀av无| 日韩精品免费视频一区二区三区| www.精华液| 国产主播在线观看一区二区| 日韩欧美在线二视频| 亚洲片人在线观看| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 精品午夜福利视频在线观看一区| 99re在线观看精品视频| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 国产精品久久久人人做人人爽| 亚洲精品国产一区二区精华液| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 欧美另类亚洲清纯唯美| 在线永久观看黄色视频| 男女那种视频在线观看| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 日日夜夜操网爽| 国产av不卡久久| 怎么达到女性高潮| videosex国产| 无限看片的www在线观看| 国产亚洲精品久久久久5区| 一本大道久久a久久精品| 91av网站免费观看| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 国产高清视频在线播放一区| 99精品久久久久人妻精品| 人妻夜夜爽99麻豆av| 欧美乱妇无乱码| 999精品在线视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 老司机靠b影院| 国产真实乱freesex| 老汉色∧v一级毛片| 久久久国产成人免费| 老熟妇仑乱视频hdxx| 一进一出抽搐动态| 亚洲精品一区av在线观看| 99久久精品国产亚洲精品| 国产野战对白在线观看| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 一区福利在线观看| 观看免费一级毛片| 麻豆国产97在线/欧美 | 床上黄色一级片| 免费一级毛片在线播放高清视频| 听说在线观看完整版免费高清| 一本综合久久免费| 免费人成视频x8x8入口观看| 全区人妻精品视频| 操出白浆在线播放| 久久久国产欧美日韩av| 国产激情久久老熟女| 国产精品久久久人人做人人爽| 91大片在线观看| www.999成人在线观看| 亚洲 欧美一区二区三区| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 真人做人爱边吃奶动态| 免费观看人在逋| 色老头精品视频在线观看| a级毛片在线看网站| 日本成人三级电影网站| 久久香蕉激情| 男女午夜视频在线观看| 美女扒开内裤让男人捅视频| 在线免费观看的www视频| 一本精品99久久精品77| 麻豆国产97在线/欧美 | 国产亚洲欧美在线一区二区| 久久精品国产综合久久久| 国产黄色小视频在线观看| 欧美不卡视频在线免费观看 | 久久欧美精品欧美久久欧美| 精品欧美一区二区三区在线| 亚洲激情在线av| 欧美一级a爱片免费观看看 | 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 午夜免费激情av| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲人成电影免费在线| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 久久中文看片网| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 激情在线观看视频在线高清| 99riav亚洲国产免费| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 亚洲人成伊人成综合网2020| 美女午夜性视频免费| 正在播放国产对白刺激| 黄色视频不卡| 看片在线看免费视频| 久久精品影院6| 亚洲男人的天堂狠狠| 男女之事视频高清在线观看| 精品久久久久久久末码| 91在线观看av| 国产黄a三级三级三级人| 国产探花在线观看一区二区| 听说在线观看完整版免费高清| 757午夜福利合集在线观看| 这个男人来自地球电影免费观看| 亚洲成人久久性| 美女 人体艺术 gogo| 五月伊人婷婷丁香| xxx96com| 极品教师在线免费播放| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 操出白浆在线播放| 99re在线观看精品视频| 淫妇啪啪啪对白视频| 久久久精品欧美日韩精品| 国产免费男女视频| 麻豆av在线久日| 一进一出抽搐gif免费好疼| 国产亚洲欧美98| 两个人免费观看高清视频| 久久人妻av系列| 国产亚洲欧美在线一区二区| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产成人影院久久av| 18禁观看日本| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 黄片小视频在线播放| 一级毛片精品| 大型av网站在线播放| 久久久久久免费高清国产稀缺| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 亚洲国产精品sss在线观看| 日韩欧美国产在线观看| 露出奶头的视频| 白带黄色成豆腐渣| 一本久久中文字幕| 男人舔奶头视频| 欧美极品一区二区三区四区| 十八禁网站免费在线| 欧美日韩国产亚洲二区| 十八禁人妻一区二区| 91字幕亚洲| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 久久久久免费精品人妻一区二区| 在线观看午夜福利视频| 神马国产精品三级电影在线观看 | av天堂在线播放| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 天堂√8在线中文| 亚洲专区字幕在线| 日本一二三区视频观看| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 久久久久久大精品| 免费无遮挡裸体视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 美女大奶头视频| 久久人妻av系列| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲专区国产一区二区| 日本一区二区免费在线视频| 日本 av在线| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产成人精品无人区| 免费在线观看影片大全网站| 色综合欧美亚洲国产小说| 国产精品一区二区三区四区久久| 超碰成人久久| 久久九九热精品免费| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 最近最新中文字幕大全电影3| 国产精品精品国产色婷婷| 在线观看66精品国产| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 欧美黑人精品巨大| 国产成人精品久久二区二区免费| 午夜福利在线观看吧| 神马国产精品三级电影在线观看 | 久久久久久久午夜电影| av免费在线观看网站| 美女 人体艺术 gogo| 久久99热这里只有精品18| 真人做人爱边吃奶动态| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 黄色丝袜av网址大全| 嫩草影院精品99| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 桃色一区二区三区在线观看| 99热只有精品国产| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国产av又大| 99re在线观看精品视频| 国产1区2区3区精品| 中亚洲国语对白在线视频| 日韩精品青青久久久久久| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲av电影在线进入| 黄色成人免费大全| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 黄片小视频在线播放| 搞女人的毛片| 午夜精品久久久久久毛片777| 午夜a级毛片| 国产成人精品久久二区二区免费| 国产成人影院久久av| 精品久久久久久,| 久久久精品大字幕| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 法律面前人人平等表现在哪些方面| 欧美一区二区国产精品久久精品 | 最近最新中文字幕大全免费视频| 老司机靠b影院| 国产成人啪精品午夜网站| 色综合站精品国产| 久热爱精品视频在线9| 夜夜夜夜夜久久久久| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 又黄又爽又免费观看的视频| 三级毛片av免费| 免费电影在线观看免费观看| 不卡av一区二区三区| 亚洲成人久久爱视频| 日韩精品免费视频一区二区三区| 在线国产一区二区在线| 国产精华一区二区三区| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 波多野结衣巨乳人妻| 国产成人影院久久av| 亚洲国产精品sss在线观看| 国产精品电影一区二区三区| 久久精品91无色码中文字幕| 久久人人精品亚洲av| 精品久久久久久久久久免费视频| 欧美zozozo另类| 大型黄色视频在线免费观看| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 制服丝袜大香蕉在线| 国产爱豆传媒在线观看 | videosex国产| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 色av中文字幕| 舔av片在线| 麻豆久久精品国产亚洲av| 色尼玛亚洲综合影院| 91av网站免费观看| 日韩免费av在线播放| 最近最新中文字幕大全电影3| 久久精品国产亚洲av高清一级| 成人国产一区最新在线观看| xxx96com| 免费搜索国产男女视频| 国产亚洲精品第一综合不卡| 日日夜夜操网爽| a在线观看视频网站| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 午夜日韩欧美国产| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 无限看片的www在线观看| 亚洲人与动物交配视频| 岛国视频午夜一区免费看|