某規(guī)?；i場豬偽狂犬病綜合診斷研究

陳俊嶺

（郟縣畜牧局，河南 郟縣 467100）

豬偽狂犬病為重要的傳染性疾病，會(huì)給我國養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。該病可導(dǎo)致初生仔豬腹瀉、神經(jīng)癥狀（如發(fā)抖、角弓反張等），并出現(xiàn)較高的死亡率；懷孕母豬出現(xiàn)流產(chǎn)、死胎等現(xiàn)象；種公豬出現(xiàn)睪丸腫大癥狀，影響種豬的繁殖性能［1-2］。近年來，由于規(guī)模化養(yǎng)豬場對偽狂犬病的防控措施得當(dāng)，使得該病在部分養(yǎng)殖場得到徹底的凈化。但規(guī)?；i場向外引種頻繁，若將帶毒種豬引進(jìn)豬場，而豬場內(nèi)豬群未免疫接種偽狂犬病疫苗，極易導(dǎo)致偽狂犬病在豬場短時(shí)間大發(fā)生，給該豬場造成難以挽回的經(jīng)濟(jì)損失。2019年3月初，某規(guī)?；i場發(fā)生疑似豬偽狂犬病，通過臨床診斷結(jié)合實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果，最終判定為豬偽狂犬病野毒感染所致。

1 發(fā)病情況及臨床癥狀

某規(guī)?；B(yǎng)豬場自2017年判定為豬偽狂犬病毒陰性豬場，其后未對豬群免疫接種豬偽狂犬病疫苗。自2018年9月引種以來，豬場陸續(xù)發(fā)生母豬流產(chǎn)、死胎等案例，且發(fā)生率逐漸上升。此外，部分仔豬出現(xiàn)較嚴(yán)重的腹瀉和神經(jīng)癥狀，最終以死亡告終。2019年5月初，豬場內(nèi)很多懷孕母豬出現(xiàn)流產(chǎn)、產(chǎn)弱仔等臨床癥狀，引進(jìn)的種公豬表觀出睪丸腫大、精神萎靡等癥狀。此外，大批仔豬體溫升高、共濟(jì)失調(diào)、呼吸困難等，部分仔豬腹瀉等。直至5月中旬，已經(jīng)有大批仔豬死亡，給養(yǎng)殖場造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

2 病理變化

分別對死亡不久和瀕臨死亡的仔豬進(jìn)行解剖，觀察病理變化。病豬淋巴結(jié)腫大，扁桃體可見明顯的化膿壞死現(xiàn)象；肺部表面有片狀出血，腎臟表面有出血點(diǎn)，胃腸道黏膜有出血，為卡他性出血癥狀；此外，其腦膜充血、明顯水腫。

根據(jù)其發(fā)病特點(diǎn)、臨床癥狀和病理變化，筆者初步判斷該豬群感染豬偽狂犬病毒，但不能排除其他病原感，如細(xì)菌或其他病毒等。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 細(xì)菌分離與鑒定

無菌采集病豬的腦部、肺部、肝臟和腎臟及淋巴結(jié)病理變化明顯的部分，采取平板劃線法分別將病料接種與兔鮮血瓊脂培養(yǎng)基和普通瓊脂培養(yǎng)基上，并在37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，分別在24 h和48 h觀察培養(yǎng)基表面是否生長菌落及菌落形態(tài)。結(jié)果顯示，分別接種以上病料的2種瓊脂培養(yǎng)基表面均未出現(xiàn)菌落，因此可初步確定病豬未感染細(xì)菌性疾病。

3.2 血清學(xué)診斷

頸靜脈采集病豬血液10份，每份3 mL，將血液樣品于室溫靜置4 h，吸取上清置于無菌離心管內(nèi)，將離心管低速離心（3 000 r/min）離心5 min，應(yīng)用豬偽狂犬病毒gE蛋白ELISA檢測試劑盒分別對以上血清樣品進(jìn)行抗體檢測。結(jié)果顯示，10份血清樣品中有8份檢測為偽狂犬病毒gE蛋白抗體陽性，提示該豬群感染偽狂犬病毒野毒。

3.3 病原診斷

為了確定該豬群是否感染其他病毒，筆者通過RT—PCR技術(shù)和PCR技術(shù)對組織中豬偽狂犬病毒、豬藍(lán)耳病毒、豬圓環(huán)病毒和豬細(xì)小病毒進(jìn)行病原檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，除了豬偽狂犬病毒gE基因檢測為陽性外，其他病原均未檢出，病原檢測結(jié)果最終確定該豬群感染豬偽狂犬病毒。

4 討論

豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病毒（或豬皰疹I(lǐng)型病毒）感染豬所引起的一類強(qiáng)感染性傳染病，各生長階段豬群對該病毒均易感，其中以懷孕母豬和仔豬感染該病后臨床癥狀最為明顯，懷孕母豬感染該病后主要臨床癥狀為流產(chǎn)、死胎等，而發(fā)病仔豬則出現(xiàn)腹瀉、嘔吐和明顯的神經(jīng)癥狀。市面上已經(jīng)有多種針對豬偽狂犬病毒開發(fā)的弱毒疫苗或滅活苗，使用有效的疫苗和生物凈化措施完全可以凈化豬偽狂犬病毒。目前，很多豬場通過以上措施成功凈化了豬偽狂犬病毒。然而，很多豬場出現(xiàn)豬偽狂犬病毒凈化后豬群又感染野毒的案例，本文所服務(wù)的規(guī)?；i場也是如此，由于引種過程中未對種豬進(jìn)行疫病監(jiān)測，導(dǎo)致野毒通過引進(jìn)種豬帶入豬場，而豬場內(nèi)豬群未注射豬偽狂犬病相應(yīng)疫苗，無法抵抗野毒的感染，最終導(dǎo)致該病在豬場內(nèi)短時(shí)間大發(fā)生。

該病診斷一般包括如下3個(gè)方面，一是初步診斷。新生仔豬及4周齡內(nèi)仔豬常突然發(fā)病，高燒在41℃以上，間有嘔吐、腹瀉及神經(jīng)癥狀，出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)失調(diào)、興奮不安、身體各部分肌肉痙攣等癥狀，隨后麻痹死亡，病程一兩天，死亡率很高。4周齡左右的豬發(fā)病后只有輕微癥狀，有輕熱、呼吸困難，時(shí)有出現(xiàn)腹瀉和嘔吐，幾天內(nèi)可完全康復(fù)，但也有部分豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀后死亡。妊娠母豬常發(fā)生流產(chǎn)、死胎或木乃伊胎，流產(chǎn)發(fā)生率約為50%。成年豬一般隱性感染，有時(shí)有輕度呼吸系統(tǒng)癥狀，不吃、嘔吐、委頓等。由于豬的病癥復(fù)雜，若出現(xiàn)以上癥狀懷疑是偽狂犬病時(shí)，應(yīng)進(jìn)一步進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。二是實(shí)驗(yàn)室診斷。采用豬扁桃體、咽喉黏膜、腦、延腦、小腦和海馬角等，檢查細(xì)胞中有無核內(nèi)包涵體。將病料接種家兔，兩三天后局部出現(xiàn)奇癢及全身癥狀，常在奇癢出現(xiàn)后一兩天病狀轉(zhuǎn)為麻痹而死亡。三是血清學(xué)診斷?？捎弥苯用庖邿晒夥z查腦、扁桃體的壓片或冰凍切片，發(fā)現(xiàn)核內(nèi)包涵體出現(xiàn)熒光，有診斷價(jià)值。檢查血清抗體可采用中和試驗(yàn)、間接血凝抑制試驗(yàn)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等，其中血清中和試驗(yàn)較為敏感、準(zhǔn)確。

本次研究通過對該豬場發(fā)病豬群發(fā)病特點(diǎn)、臨床和病理變化、實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果進(jìn)行總結(jié)，最終判定該豬場發(fā)生豬偽狂犬病，且為野毒感染所致。由于目前尚無治療該病的藥物，所以對于該病以防控為主，特別是針對某些偽狂犬病毒陰性豬場，應(yīng)定期對豬群進(jìn)行血清學(xué)或病原監(jiān)測，同時(shí)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，提高豬群的免疫力。