遵義地區(qū)犬弓形蟲感染的血清學(xué)調(diào)查

馬曉春，代 軍，張仕斌，秦廷洋，徐 磊，高麗麗

(1.遵義醫(yī)學(xué)院 實驗動物中心，貴州 遵義 563000；2.遵義醫(yī)學(xué)院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，貴州 遵義 563000)

弓形蟲病是一種嚴重危害人類健康，呈世界性分布的人獸共患寄生蟲病，可以感染人和幾乎所有的恒溫脊椎動物(感染超過30 種鳥類和300 種哺乳動物)[1]。其病原為龔地弓形蟲(Toxoplasmagondii)，屬于球蟲亞綱，真球蟲目，肉孢子蟲科、弓形體屬，能引起人畜共患，為寄生在細胞內(nèi)的一種原蟲[2]。貓及貓科動物是其終末宿主，人、犬和豬等是中間宿主。食物、水源等能被含弓形蟲卵囊的糞便污染，從而引起人和動物感染[3]。弓形蟲病對人畜的危害很大，孕婦感染后會導(dǎo)致早產(chǎn)、流產(chǎn)、胎兒發(fā)育畸形。此外，弓形蟲感染還與艾滋病(AIDS)有密切的關(guān)系。隨著我國社會經(jīng)濟發(fā)展和人民生活水平的提高，犬類已成為人類的重要“伙伴”，因此人類感染動物源性弓形蟲的風(fēng)險日益增加。為了解遵義地區(qū)犬弓形蟲病的感染情況，2017年3—12月采用酶聯(lián)免疫吸附試驗對部分寵物犬及農(nóng)村田園犬進行血清學(xué)調(diào)查，以期對該病的防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 犬血液樣品 從遵義市區(qū)3家寵物門診，以及遵義周邊農(nóng)村地區(qū)收集外表健康犬血液樣品共計320份，1 000 g離心10 min，取上清液于1.5 mL滅菌離心管中，統(tǒng)一編號。處理好的血清均置于-20℃冰箱保存，備用待檢。

1.1.2 試劑與儀器 犬弓形蟲抗體(Tox Ab)酶聯(lián)免疫分析試劑盒(上海酶聯(lián)生物科技有限公司)，352型酶標儀(芬蘭Labsystems Multiskan MS公司)，5165040型洗板機(Thermo ScientificTMWellwashTM)，GNP-9080型隔水式恒溫培養(yǎng)箱(上海精宏)，WH-2漩渦混合儀(金壇新航)，MM-1低頻振蕩器(金壇國旺)，100～500 μL加液器(排槍，德國Eppendorf公司)。

1.2 方法

犬弓形蟲抗體檢測按照試劑盒說明書進行。對測定結(jié)果進行判定，試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00，陰性對照平均值≤0.10；臨界值(CUT OFF)計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15；陰性判定：樣品OD值<臨界值(CUT OFF)者為弓形蟲抗體(Tox Ab)陰性；陽性判定：樣品OD值≥臨界值(CUT OFF)者為弓形蟲抗體(Tox Ab)陽性。

1.3 數(shù)據(jù)處理

檢測結(jié)果采用軟件SPSS 21.0進行分析，通過χ2檢驗分析差異顯著性，P<0.05差異顯著，P<0.01差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 試驗有效性

對測定結(jié)果進行判定，其中陽性對照孔平均值為1.685(≥1.00)；陰性對照平均值為0.064(≤0.10)，表明試劑盒有效。

2.2 犬弓形蟲感染情況

經(jīng)檢測，在320份血液樣品中有40份檢測出弓形蟲抗體，總體陽性率為12.5%。從表1可看出不同來源、性別和年齡犬的弓形蟲抗體陽性率變化。

2.2.1 不同來源犬 不同來源犬弓形蟲抗體陽性率有差異，其中，農(nóng)村田園犬的陽性率為13.4%，市區(qū)寵物犬為12.0%。經(jīng)顯著性檢驗，不同來源犬弓形蟲抗體的陽性率差異不顯著(P>0.05)。

2.2.2 不同性別犬 雌性犬弓形蟲抗體陽性率為13.0%，略高于雄性的12.1%。經(jīng)顯著性檢驗，不同性別犬弓形蟲抗體的陽性率差異不顯著(P>0.05)。

2.2.3 不同年齡犬 隨犬年齡增長，弓形蟲抗體的陽性率升高，1歲以內(nèi)最低，為10.7%；1～3歲次之，為12.7%；3歲以上最高，達15.6%。經(jīng)顯著性檢驗，不同年齡段犬弓形蟲抗體的陽性率差異不顯著(P>0.05)。

表1 遵義地區(qū)犬弓形蟲抗體檢測結(jié)果Table 1 Detection results of antibody against Toxoplasmosis in dogs in Zunyi

3 結(jié)論與討論

弓形蟲是一類普遍存在的細胞內(nèi)寄生原蟲，在人群中感染較普遍。犬是人類感染弓形蟲的主要中間宿主，傳播弓形蟲的風(fēng)險較大。因此，充分了解犬弓形蟲病的感染情況，具有重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義。近年來，經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查顯示，各地區(qū)犬弓形蟲抗體陽性率存在較大差異，如鄭州[4]、烏魯木齊[5]、北京[6]、長沙[7]等城市犬的弓形蟲抗體陽性率分別為34.9%、31.8%、24.9%和23.8%，明顯高于遵義地區(qū)犬弓形蟲的抗體陽性率(12.5%)；遼西地區(qū)[8]、武漢[9]、溫州[10]、信陽[11]等城市犬的弓形蟲抗體陽性率分別為14.2%、13.4%、13.4%和11.3%，與遵義市犬弓形蟲的抗體陽性率相近；山東部分地區(qū)[12]、桂林[13]、黔南州[14]、天水[15]等城市犬的弓形蟲抗體陽性率分別為3.50%、2.68%、2.62%和1.98%，明顯低于遵義地區(qū)犬弓形蟲的抗體陽性率。

遵義市區(qū)寵物犬、農(nóng)村田園犬弓形蟲的抗體陽性率分別為12.0%和13.4%，兩者差異無統(tǒng)計學(xué)意義，與汪萍等[5]對烏魯木齊市犬的調(diào)查結(jié)果一致。寵物犬一般都有外出遛玩的習(xí)慣，且會與人親密接觸，會大大增加感染或傳播該病的機會。不同性別犬的弓形蟲抗體陽性率差異不顯著，與其他地方報道的結(jié)果一致。隨著犬的年齡增長，弓形蟲抗體陽性率升高，但差異不顯著，與汪萍等[5]的調(diào)查結(jié)果一致。這是因為隨著犬年齡增長，接觸外界環(huán)境的時間越長，感染的概率越大，并且弓形蟲抗體一旦形成，能終生存在。

弓形蟲病是一種主要的人獸共患病，對人類健康危害較大。調(diào)查結(jié)果顯示，遵義地區(qū)犬弓形蟲的抗體陽性率相對較高，在全國處于中等水平。建議今后應(yīng)持續(xù)監(jiān)測犬弓形蟲的抗體陽性率，同時大力開展教育宣傳，加強寵物犬、散養(yǎng)犬和流浪犬的管理，定期飼喂預(yù)防藥物，以控制弓形蟲病的發(fā)生與傳播。