啶氧菌酯原藥中有機(jī)雜質(zhì)的鑒定分析

項(xiàng) 軍，胡 禮，孫 炯，張 萍，黃 路

(1.湖南加法檢測(cè)有限公司，湖南 長(zhǎng)沙 410017；2.湖南化工研究院有限公司，國(guó)家農(nóng)藥創(chuàng)制工程技術(shù)研究中心，湖南 長(zhǎng)沙 410017)

農(nóng)藥全組分分析是農(nóng)藥原藥登記資料的重要組成部分，隨著農(nóng)藥毒理學(xué)研究的進(jìn)一步發(fā)展，人們逐漸認(rèn)識(shí)到農(nóng)藥雜質(zhì)對(duì)環(huán)境的潛在危害，因此對(duì)農(nóng)藥雜質(zhì)的研究顯得尤為重要。

啶氧菌酯(picoxystrobin)化學(xué)名稱為(E)-3-甲氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸甲酯，是一種具有廣譜和內(nèi)吸特性的甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑。張繼偉等[1]對(duì)啶氧菌酯的一個(gè)主要雜質(zhì)進(jìn)行了液質(zhì)研究，但對(duì)該農(nóng)藥其它雜質(zhì)的分析研究還未見報(bào)道。

本文使用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對(duì)啶氧菌酯原藥中的不同有機(jī)雜質(zhì)進(jìn)行了分離分析和鑒定。

2 試驗(yàn)部分

2.1 試劑和溶液 甲醇：色譜純；水：新蒸二次蒸餾水；啶氧菌酯雜質(zhì)1((Z)-3-甲氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸甲酯)標(biāo)樣：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)，99.6%(湖南化工研究院)；啶氧菌酯雜質(zhì)2((E)-3-甲氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸乙酯)標(biāo)樣：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)，99.0%(湖南化工研究院)；啶氧菌酯雜質(zhì)3((E)-3-乙氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸甲酯)標(biāo)樣：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)，99.0%(湖南化工研究院)；試樣：啶氧菌酯原藥一、啶氧菌酯原藥二。

2.2 儀器 高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀：Agilent 1260/6120 LC/MS；Millipore超純水制備系統(tǒng)。

2.3 儀器操作條件 色譜柱：Eclipse Plus C18，5μm，150mm×4.6mm(i.d.)；流動(dòng)相：甲醇∶水=60∶40(V/V)；流量：1.5mL/min；柱溫：35℃；離子源：APCI+源；質(zhì)量數(shù)范圍：50～800m/z；相對(duì)保留時(shí)間：原藥一：啶氧菌酯約13.4min，雜質(zhì)約20.5min；原藥二：啶氧菌酯約13.3min，雜質(zhì)1約11.7min、雜質(zhì)2約20.0min。

2.4 操作步驟

稱取試樣約0.3g (精確至0.000 2g)，置于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。在上述色譜條件下，將儀器連續(xù)運(yùn)行至基線穩(wěn)定，開始進(jìn)樣，記錄各峰的保留時(shí)間并進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè)。

3 結(jié)果與討論

3.1 啶氧菌酯原藥中有機(jī)雜質(zhì)結(jié)構(gòu)解析 啶氧菌酯原藥一的液相色譜圖(圖1)，啶氧菌酯原藥一的雜質(zhì)和啶氧菌酯雜質(zhì)2標(biāo)樣的APCI質(zhì)譜圖(圖2、3)。

圖1 啶氧菌酯原藥一的液相色譜圖

圖2 啶氧菌酯原藥一雜質(zhì)的APCI質(zhì)譜圖

圖3 啶氧菌酯原藥二雜質(zhì)2標(biāo)樣的APCI質(zhì)譜圖

啶氧菌酯原藥二的液相色譜圖(圖4)，啶氧菌酯原藥二的雜質(zhì)和啶氧菌酯雜質(zhì)1、3標(biāo)樣的APCI質(zhì)譜圖(圖5、6、7、8)。

圖4 啶氧菌酯原藥二的液相色譜圖

圖5 啶氧菌酯原藥二雜質(zhì)1的APCI質(zhì)譜圖

圖6 啶氧菌酯原藥二雜質(zhì)2的APCI質(zhì)譜圖

圖7 啶氧菌酯雜質(zhì)1標(biāo)樣的APCI質(zhì)譜圖

圖8 啶氧菌酯雜質(zhì)3標(biāo)樣的APCI質(zhì)譜圖

啶氧菌酯原藥一樣品中的雜質(zhì)與啶氧菌酯原藥二樣品中的雜質(zhì)2保留時(shí)間、質(zhì)譜圖極其相似，根據(jù)關(guān)鍵碎片191與205的區(qū)別，判斷為CH-OCH3與CH-OC2H5的區(qū)別。啶氧菌酯雜質(zhì)譜圖解析(表1)。

表1 啶氧菌酯雜質(zhì)和雜質(zhì)標(biāo)樣譜圖解析

續(xù)表

3.2 啶氧菌酯原藥中雜質(zhì)形成分析

3.2.1 雜質(zhì)1形成 3-羥基-2-鄰甲苯基丙烯酸甲酯的反應(yīng)過(guò)程中，產(chǎn)生Z-式和E-式，最后反應(yīng)形成Z-啶氧菌酯(雜質(zhì)1)。

3.2.2 雜質(zhì)2形成 啶氧菌酯合成后，用甲醇結(jié)晶過(guò)程中，甲醇中可能存在少量乙醇，形成了雜質(zhì)2。

3.2.3 雜質(zhì)3形成 在(Z)-3-甲氧基-2-鄰甲苯基丙烯酸甲酯的合成過(guò)程中，反應(yīng)生成過(guò)程中，原料硫酸二甲酯中含極少量的硫酸二乙酯，反應(yīng)生成(Z)-3-乙氧基-2-鄰甲苯基丙烯酸甲酯，最后反應(yīng)形成雜質(zhì)3。

4 結(jié)論

本文建立了啶氧菌酯原藥中有機(jī)雜質(zhì)的定性分析方法，鑒定了啶氧菌酯原藥中的有機(jī)雜質(zhì)(Z)-3-甲氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸甲酯、(E)-3-甲氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸乙酯、(E)-3-乙氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸甲酯，其中(E)-3-甲氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸乙酯與(E)-3-乙氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸甲酯保留時(shí)間、質(zhì)譜圖極其相似，極易混淆。該方法是一種實(shí)用、便捷的分析方法。