探討高壓氧治療阿爾茨海默病模型大鼠后其認知和記憶功能的改變

魏成群，高展，祝鴻雁

（黑龍江省醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150001）

本文通過實驗分析的方法，探討高壓氧治療阿爾茨海默病模型大鼠后其認知和記憶功能的改變[1]，旨在為臨床AD患者治療研究提供依據(jù)，相關(guān)內(nèi)容分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取40只健康雄性大鼠進行研究，大鼠體質(zhì)量210 g-248 g，平均體質(zhì)量（224.12±6.94）g；所有大鼠在實驗前期正常喂養(yǎng)且持續(xù)1 w，不同大鼠在體質(zhì)量、年齡等方面差異性較??；同時準備好實驗中需要使用的相關(guān)儀器設(shè)備以及試劑。

1.2 方法 遵循隨機性原則將40只大鼠分組，包括正常對照組（不造模）、假手術(shù)組（海馬注射5 μL生理鹽水）、模型組（海馬注射5 mL Aβ25-35）、高壓氧治療組（海馬注射5 μL Aβ25-35，然后實施高壓氧治療），研究期間不同大鼠正常飲食。按照分組不同對大鼠做出相應的處理。HBO治療組大鼠在注射Aβ25-35后2 w開始高壓氧治療。使用醫(yī)用高壓氧氣艙度大鼠進行高壓氧治療，每天1次，每次60 min，高壓氧壓力為2 ATA，其中加壓15 min、穩(wěn)壓30 min、減壓15 min，10 d為1個療程，每個療程治療完成后中間3 d停止治療，共治療2個療程。其余大鼠則不予以相關(guān)治療。

高壓氧治療組完成2個療程治療后，對不同組大鼠通過Morris水迷宮法評估其空間記憶功能，整個水迷宮劃分為4個象限，圓形直徑160 cm，深度40 cm；于較暗環(huán)境下進行試驗，減少環(huán)境因素對其影響。完成水迷宮實驗后，對大鼠腹腔注射10.0%水合氯醛，劑量為4 mL/kg，然后快速開胸，左心室主動脈插管，生理鹽水快速沖洗，獲取大鼠大腦組織，經(jīng)相關(guān)處理后在鏡下觀察海馬神經(jīng)元形態(tài)改變；大鼠海馬組織中的Bcl-2 mRNA以及蛋白表達通過RT-PCR以及Western Blot完成檢測，嚴格按照相關(guān)試劑盒操作說明完成。

1.3 觀察指標 （1）不同時間不同組逃避潛伏期、原平臺所在象限時間、穿過原平臺次數(shù)；（2）Bcl-2 mRNA以及蛋白表達。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用統(tǒng)計學軟件SPSS 20.0實施數(shù)據(jù)分析，計量資料（Mean±SD）采用t檢驗；計數(shù)資料［n（%）］采用χ2檢驗。P＜0.05：差異存在統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 逃避潛伏期、原平臺所在象限時間、穿過原平臺次數(shù)分析 從實驗研究開始，不同大鼠逃避潛伏期逐漸縮小，其中HBO治療組在不同時間段與對照組、假手術(shù)組無顯著統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；治療組第5 d逃避潛伏期時間（33.29±4.08）s、第6 d逃避潛伏期時間（20.82±1.62）s；模型組第5 d逃避潛伏期時間（48.17±2.84）s、第6 d逃避潛伏期時間（40.64±1.98）s；HBO治療組潛伏期時間小于模型組（t=9.465/24.499，P均＜0.05），其他時間無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。原平臺所在象限時間方面，HBO治療組與對照組、假手術(shù)組無顯著統(tǒng)計學意義（P＞0.05），而HBO治療組原平臺象限所占時間比為（35.79±4.98）%，模型組原平臺象限所占時間比為（20.83±3.61）%，HBO治療組高于模型組（t=7.691,P＜0.05）。

2.2 Bcl-2 mRNA以及蛋白表達 HBO治療組Bcl-2 mRNA相對表達為（0.73±0.15），模型組Bcl-2 mRNA相對表達為（0.39±0.07），HBO治療組大于模型組（t=6.495,P＜0.05），HBO治療組相對蛋白表達（0.82±0.16），模型組相對蛋白表達為（1.09±0.17），HBO治療組蛋白表達小于模型組（t=3.657,P＜0.05），數(shù)據(jù)分析存在統(tǒng)計學意義。

3 討論

本研究顯示，不同大鼠逃避潛伏期呈現(xiàn)出下降趨勢，但是HBO治療后大鼠在第5 d、第6 d逃避潛伏期明顯縮小，而且原平臺象限所占時間比、穿過原平臺次數(shù)超過模型組，綜合分析提示HBO治療后的大鼠其記憶功能明有所提高。從基因水平分析，HBO治療后大鼠對應的Bcl-2 mRNA以及蛋白表達發(fā)生明顯改變，其中Bcl-2 mRNA與大鼠海馬組織凋亡密切相關(guān)，該基因通過調(diào)控相關(guān)蛋白表達，避免對海馬組織的進一步損傷，從而幫助大鼠改善認知和記憶功能。

綜上所述，高壓氧治療可能會對Aβ25-35誘導海馬神經(jīng)元凋亡產(chǎn)生抑制，從而促進阿爾茨海默病模型大鼠后其認知和記憶功能的改變[2]。