丹參酮ⅡA抗腎間質(zhì)纖維化作用機(jī)制的研究進(jìn)展

陳莎莎，李均

(遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)，廣東珠海519000)

慢性腎臟病(CKD)患病率逐年增高,已成為全球關(guān)注的重要公共衛(wèi)生問(wèn)題之一。腎間質(zhì)纖維化(RIF)是所有CKD發(fā)展的最終結(jié)果,也是導(dǎo)致終末期腎臟疾病(ESRD)的主要原因之一。RIF的發(fā)生發(fā)展過(guò)程復(fù)雜，是一種多致病因素、多機(jī)制參與的疾病，只干預(yù)孤立靶點(diǎn)的效果并不理想，需著眼于多靶點(diǎn)的綜合治療。近年來(lái)，中醫(yī)藥對(duì)防治CKD具有良好的臨床療效。中醫(yī)藥提倡的“整體觀念”“辨證施治”為防治RIF提供了多環(huán)節(jié)、多途徑的綜合治療手段。丹參酮ⅡA是從丹參的根中提取的主要親脂性成分，具有抗炎、清除自由基與抗氧化、降低血液黏度、促纖溶、保護(hù)腎小管的正常結(jié)構(gòu)和延緩RIF、改善血管微循環(huán)、保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞等作用。越來(lái)越多的研究顯示，丹參酮ⅡA有抗RIF方面的作用?，F(xiàn)就丹參酮ⅡA的抗RIF作用機(jī)制的研究進(jìn)展綜述如下。

1 抗炎

急性腎損傷(AKI)是臨床常見(jiàn)危重疾病，可導(dǎo)致腎臟不全修復(fù)、持續(xù)慢性炎癥和進(jìn)展性纖維化，有發(fā)展為CKD和ESRD的風(fēng)險(xiǎn)。研究表明，丹參酮ⅡA可減弱腎損傷的炎癥反應(yīng)，保護(hù)腎功能，緩解AKI向CKD的轉(zhuǎn)變。Jiang等[1]在葉酸誘導(dǎo)的AKI小鼠模型中發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA可下調(diào)腎組織中中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)的表達(dá)，增加增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá)，減少炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)以及趨化因子表達(dá)，從而抑制腎小管間質(zhì)中纖連蛋白和膠原蛋白Ⅰ的積累，促進(jìn)受損腎臟的修復(fù)，延緩RIF的發(fā)展。Jiang等[2]在葉酸誘導(dǎo)小鼠AKI模型的進(jìn)一步研究中發(fā)現(xiàn),丹參酮ⅡA能夠有效減輕受損腎臟中糖原合成酶激酶3β(GSK3β)的過(guò)度活躍和隨后絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的過(guò)度活化，同時(shí)伴隨著丹參酮ⅡA的抗炎和抗纖維化作用。因此，推斷丹參酮ⅡA可能是通過(guò)調(diào)節(jié)GSK3β/MAPK信號(hào)通路發(fā)揮抗炎、抗纖維化作用。Gao等[3]發(fā)現(xiàn)，丹參酮可通過(guò)抑制Toll樣受體4(TLR4)二聚化阻斷MyD88-TAK1-NF-κB/MAPK信號(hào)級(jí)聯(lián)的激活，從而在體外和體內(nèi)發(fā)揮抗炎作用，減輕腎損傷，緩解RIF的發(fā)展。

2 抗細(xì)胞凋亡

細(xì)胞凋亡是RIF發(fā)生發(fā)展的又一促進(jìn)因素。腎小管上皮細(xì)胞(RTC)具有較強(qiáng)的再生能力，并能通過(guò)凋亡機(jī)制清除衰老、變異的細(xì)胞[4]；然而，持久的疾病狀態(tài)可以導(dǎo)致RTC的不可逆凋亡，這也是引起腎小管萎縮及RIF的機(jī)制之一。Xu等[5]在缺血/再灌注誘導(dǎo)的腎損傷(I/RIRI)模型大鼠中，丹參酮ⅡA預(yù)處理可通過(guò)降低I/RIRI大鼠中的髓過(guò)氧化物酶(MPO)、巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)和白細(xì)胞介素6(IL-6)活性，下調(diào)MPO、MIF、Caspase-3和p38MAPK蛋白表達(dá)水平，上調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)，從而減弱腎臟炎性反應(yīng)，抑制RTC凋亡，保護(hù)腎功能，延緩RIF發(fā)生。楊紫依等[6]通過(guò)體外培養(yǎng)人近曲腎小管上皮細(xì)胞HK-2，建立缺氧/復(fù)氧(H/R)模型模擬腎臟缺血再灌注(IR)損傷實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)：丹參酮ⅡA可通過(guò)線粒體凋亡途徑，上調(diào)Bcl-2表達(dá)，下調(diào)Bax、Cleaved Caspase-3表達(dá)，減少Bax/Bcl-2值來(lái)保護(hù)H/R的HK-2細(xì)胞增殖活性并抑制細(xì)胞凋亡，減輕腎臟IR損傷，延緩RIF的發(fā)生發(fā)展，保護(hù)腎功能。Li等[7]發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA可通過(guò)抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)，減少細(xì)胞凋亡，保護(hù)H/R的HK-2細(xì)胞，減輕腎臟IR損傷，保護(hù)腎功能。

3 抗氧化應(yīng)激作用

在多種腎臟疾病中，如CKD、糖尿病腎病(DN)等，組織中過(guò)量的活性氧簇(ROS)會(huì)導(dǎo)致機(jī)體氧化應(yīng)激的發(fā)生，進(jìn)而誘導(dǎo)炎癥及RIF的發(fā)生。研究已表明，丹參酮ⅡA有抗氧化應(yīng)激、保護(hù)腎功能的作用。Chen等[8]研究發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA可通過(guò)降低DN大鼠丙二醛(MDA)含量，升高超氧化物歧化酶(SOD)活性，減少炎性細(xì)胞因子人單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、P選擇素和促纖維化因子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)發(fā)揮抗氧化、抗炎作用，從而減輕DN大鼠白蛋白尿及腎組織病理?yè)p傷，保護(hù)腎功能，延緩ESRD進(jìn)程。Liang等[9]在大鼠造影劑腎病模型中發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA預(yù)處理可通過(guò)激活Nrf2/ARE途徑誘導(dǎo)血紅素氧合酶1(HO-1)上調(diào)，降低MDA和8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷水平發(fā)揮抗氧化應(yīng)激作用。王俏等[10]用丹參酮ⅡA對(duì)DN鼠模型進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果顯示運(yùn)用丹參酮ⅡA治療后，可使大鼠血清BUN、Scr水平降低和尿蛋白排泄量減少，腎組織內(nèi)血清總抗氧化能力和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶含量增加，SOD活力明顯升高，MDA含量明顯降低。

4 抑制上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)、減少細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)沉積

EMT被認(rèn)為是RIF過(guò)程中導(dǎo)致ECM大量堆積的主要病理機(jī)制。大量研究表明，丹參酮ⅡA可通過(guò)抑制EMT，減少ECM的沉積，從而延緩RIF發(fā)生[11～13]。Cao等[11]研究發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA可通過(guò)抑制高糖誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞中Snail、纖維連接蛋白、Vimentin、α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)的表達(dá)以及E-cadherin表達(dá)減少阻斷EMT的發(fā)生，從而減少ECM沉積，延緩RIF發(fā)生。呂彥潔等[12]在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中研究發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA磺酸鈉可通過(guò)下調(diào)血小板源性生長(zhǎng)因子DD、上調(diào)HO-1的表達(dá)，抑制間質(zhì)細(xì)胞增生、EMT、ECM沉積延緩RIF的發(fā)展。張志慧[13]在單側(cè)輸尿管梗阻模型(UUO)大鼠模型中發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA磺酸鈉注射液聯(lián)合黃芪注射液可通過(guò)下調(diào)TGF-β1及其Ⅰ型受體、Smad3的表達(dá),上調(diào)E-cadherin的表達(dá),阻斷EMT，從而減少ECM沉積,延緩RIF發(fā)生，與單用黃芪注射液差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

5 阻斷細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑

研究證實(shí)，與纖維化相關(guān)的信號(hào)通路主要為T(mén)GF-β/Smad信號(hào)通路 、JAK/STAT信號(hào)通路、Wnt/β-catenin信號(hào)通路、NF-κB信號(hào)通路、p38MAPK的激活以及基質(zhì)金屬蛋白酶與基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMP)的代謝失衡等。Tang等[14]發(fā)現(xiàn)，丹參酮能夠下調(diào)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)ERK1/2、p38和JNK的磷酸化，減少炎癥介質(zhì)TNF-α、IL-6的釋放，從而抑制炎癥反應(yīng)。因此，通過(guò)阻斷p38MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可能為丹參酮ⅡA抑制RIF的又一作用機(jī)制。同時(shí)，已有研究表明，Wnt/β-catenin信號(hào)通路參與RIF的發(fā)生發(fā)展。Zhou等[15]在腎RIF小鼠模型中發(fā)現(xiàn)，高表達(dá)β-catenin 能夠在RTC內(nèi)結(jié)合淋巴增強(qiáng)因子，促進(jìn)下游血管緊張素基因(RAS)高表達(dá)，加劇小鼠RIF損傷的程度；給予β-catenin 靶向抑制劑ICG-001后，RAS表達(dá)量降低，小鼠尿蛋白減少，RIF有所緩解，并且在細(xì)胞水平進(jìn)一步驗(yàn)證此結(jié)果。Huang等[16]發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA可通過(guò)下調(diào)Wnt/β-catenin信號(hào)途徑的活性而降低β-catenin的異位表達(dá)，上調(diào)E-cadherin表達(dá)水平，降低α-SMA表達(dá)，抑制EMT形成過(guò)程，進(jìn)而延緩RIF發(fā)生發(fā)展。Yao等[17]發(fā)現(xiàn)，p311可通過(guò)TGF-β1/Samd信號(hào)傳導(dǎo)在UUO小鼠模型中發(fā)揮促纖維化作用。因此，有效切斷TGF-β的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是終止和減輕RIF的關(guān)鍵。趙斐等[18]在TGF-β1誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA 可通過(guò)抑制TGF-β1/Smad信號(hào)通路中Smad2、Smad3蛋白及ECM中Ⅲ型膠原蛋白的表達(dá)發(fā)揮其抗RIF作用。 NF-κB信號(hào)通路在RIF發(fā)生發(fā)展過(guò)程中所起的作用已被證實(shí)。Schwarz等[19]研究發(fā)現(xiàn)，用LPS刺激腎系膜細(xì)胞會(huì)增加NF-κB、血管細(xì)胞黏附分子1表達(dá)。Wang等[20]發(fā)現(xiàn),丹參酮 ⅡA可通過(guò)抑制TGF-β/Smad和NF-κB信號(hào)通路的激活，下調(diào)5/6腎切除大鼠的纖維蛋白、膠原蛋白Ⅲ、膠原蛋白Ⅳ、TNF-α、MCP-1及CXCL-1表達(dá)，從而抑制炎癥，減少ECM的沉積，延緩RIF發(fā)生。

6 改善間質(zhì)血管微循環(huán)、保護(hù)血管內(nèi)皮作用

血管內(nèi)皮穩(wěn)定性喪失是導(dǎo)致腎小管周毛細(xì)血管(PTC)損傷的重要途徑。已有研究發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA能保護(hù)血管內(nèi)皮、改善腎臟PTC病變,延緩RIF進(jìn)展。McGinn等[21]認(rèn)為，人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)可作為PTC的替代細(xì)胞應(yīng)用于腎小管間質(zhì)損傷的疾病研究。Zhu等[22]在HUVECs體外實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA可通過(guò)孕烷X受體(PXR)依賴(lài)性機(jī)制抑制H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡、氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)，保護(hù)HUVECs免受H2O2造成的結(jié)構(gòu)功能損傷。Cheng等[23]在體外實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA可通過(guò)抑制NF-κB信號(hào)通路的激活，抑制LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，保護(hù)HUVECs免受損傷。Li等[24]研究發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA通過(guò)阻斷Rho/ROCK途徑，改善HUVECs細(xì)胞活力，抑制細(xì)胞凋亡，保護(hù)細(xì)胞免受LPS誘導(dǎo)的細(xì)胞遷移，其量級(jí)與纈沙坦相當(dāng)。在體內(nèi)動(dòng)物模型中，丹參酮ⅡA是否能保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞免受損傷，有待進(jìn)一步的研究探索。

綜上所述，丹參酮ⅡA的腎臟保護(hù)機(jī)制主要為抗炎、抗氧化應(yīng)激、抗細(xì)胞凋亡、減少ECM沉積、改善腎間質(zhì)微血管循環(huán)、保護(hù)血管內(nèi)皮、阻斷細(xì)胞信號(hào)通路、抑制促纖維化因子的釋放等作用。但是，目前對(duì)于丹參酮ⅡA具體作用機(jī)制的研究還不夠深入完善。例如：丹參酮ⅡA抗凋亡方面，僅局限于現(xiàn)象研究，對(duì)于所涉及的確切的細(xì)胞信號(hào)通路的研究還缺少探索。此外，中西藥結(jié)合的診斷思路、治療方法已應(yīng)用于科研、臨床,然而，有關(guān)丹參酮ⅡA在中西醫(yī)藥物配伍治療腎病方面的科研及臨床應(yīng)用的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道還較少，需進(jìn)一步深入擴(kuò)展丹參酮ⅡA在中西醫(yī)結(jié)合治療腎病方面的研究應(yīng)用，并深入探索其具體作用機(jī)制。這對(duì)于提升我國(guó)中草藥的國(guó)際地位以及影響力，推進(jìn)中西藥有機(jī)結(jié)合的優(yōu)勢(shì)發(fā)展具有重要意義。