規(guī)模場(chǎng)豬偽狂犬病的診斷與防控措施

冉紅志 張勇俊 趙仙苗 張朝鵬

（1.陜西省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，陜西西安 710000；2.西安邦騰農(nóng)牧公司，陜西西安 710000）

1 病原學(xué)

PRV屬于皰疹病毒科（Herpesviridae）、豬皰疹病毒屬，病毒粒子為圓形，直徑150～180 nm之間，囊膜表面有長(zhǎng)約8～10 nm呈放射狀排列的纖突。

PRV只有一種血清型，但不同毒株在毒力和生物學(xué)特性等方面存在差異，基因組為線狀雙鏈DNA，平均胞嘧啶與鳥嘌呤含量高達(dá)74%，具有典型的皰疹病毒基因組結(jié)構(gòu)特征，由長(zhǎng)獨(dú)特區(qū)（Unique long region，UL）、短獨(dú)特區(qū)（Unique short region，US）以及位于US兩側(cè)的末端重復(fù)序列（Terminal repeat，TR）和內(nèi)部重復(fù)序列（Internal repeat，IR）組成[1]。

PRV基因組序列測(cè)定發(fā)現(xiàn)由72個(gè)閱讀框組成，可編碼70種蛋白，目前已發(fā)現(xiàn)和命名的有g(shù)B、gC、gD、gE、gG、gH、gI、gK、gL、gM、gN11種。這些糖蛋白都是病毒粒子的結(jié)構(gòu)成分（除gG糖蛋白外）。其中g(shù)D與細(xì)胞受體結(jié)合后，使結(jié)合狀態(tài)從可逆狀態(tài)進(jìn)入不可逆狀態(tài)，為PRV侵入細(xì)胞發(fā)生感染所必需。編碼gB、gE、gH、gI、gL和gM、gC糖蛋白促使病毒快速粘附于細(xì)胞表面，gB是主要病毒抗原，在PRV進(jìn)入中起關(guān)鍵作用。gG基因是偽狂犬病毒的非必需基因，它的缺失與插入對(duì)病毒在體內(nèi)增值無(wú)影響。糖蛋白gB、gC、gD在免疫誘導(dǎo)方面最為重要。偽狂犬病病毒的毒力是由幾種基因協(xié)同調(diào)控，其中TK是PRV最主要的毒力基因[2]。

2 診斷

2.1 臨床癥狀

豬偽狂犬病的臨診表現(xiàn)主要取決于感染病毒的毒力和感染量，以及感染豬的年齡。其中，感染豬的年齡是最主要的。與其他動(dòng)物的皰疹病毒一樣，幼齡豬感染偽狂犬病病毒后病情最重。

新生仔豬感染偽狂犬病病毒會(huì)引起大量死亡，臨診上新生仔豬第1天表現(xiàn)正常，從第2天開始發(fā)病，3～5 d內(nèi)是死亡高峰期，有的整窩死光。同時(shí)，發(fā)病仔豬表現(xiàn)出明顯的神經(jīng)癥狀、昏睡、嗚叫、嘔吐、拉稀，一旦發(fā)病，1～2 d內(nèi)死亡。剖檢主要是腎臟布滿針尖樣出血點(diǎn)，有時(shí)見到肺水腫、腦膜表面充血、出血。15日齡以內(nèi)的仔豬感染本病者，病情極嚴(yán)重，發(fā)病死亡率可達(dá)100%。仔豬突然發(fā)病，體溫上升達(dá)41℃以上，精神極度委頓，發(fā)抖，運(yùn)動(dòng)不協(xié)調(diào)，痙攣，嘔吐，腹瀉，極少康復(fù)。斷奶仔豬感染偽狂犬病病毒，發(fā)病率在20%～40%左右，死亡率在10%～20%左右，主要表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀、拉稀、嘔吐等。成年豬一般為隱性感染，若有癥狀也很輕微，易于恢復(fù)。主要表現(xiàn)為發(fā)熱、精神沉郁，有些病豬嘔吐、咳嗽，一般于4～8 d內(nèi)完全恢復(fù)。懷孕母豬可發(fā)生流產(chǎn)、產(chǎn)木乃伊胎兒或死胎，其中以死胎為主無(wú)論是頭胎母豬還是經(jīng)產(chǎn)母豬都發(fā)病，而且沒有嚴(yán)格的季節(jié)性，但以寒冷季節(jié)即冬末春初多發(fā)[3]。

豬偽狂犬病的另一發(fā)病特點(diǎn)是表現(xiàn)為種豬不育癥。近幾年發(fā)現(xiàn)有的豬場(chǎng)春季暴發(fā)偽狂犬病，出現(xiàn)死胎或斷奶仔豬患偽狂犬病后，緊接著下半年母豬配不上種，返情率高達(dá)90%，有反復(fù)配種數(shù)次都屢配不上的。此外，公豬感染偽狂犬病病毒后，表現(xiàn)出睪丸腫脹、萎縮，喪失種用能力。

2.2 流行病學(xué)

豬偽狂犬病是指不同階段豬受到偽狂犬病毒的侵入，造成自身免疫力低下，表現(xiàn)出不同癥狀的一種具有傳染性的疾病。豬偽狂犬病主要是通過(guò)直接和間接兩種接觸方式進(jìn)行傳播，且此疾病的病癥最為明顯，傳染率最高。通常情況下，偽狂犬病毒通過(guò)鼻液、飛沫、分泌物等多種途徑排出體外，然而病豬的病毒傳播可依靠鼻部接觸、飲水等途徑，這些方式的接觸均導(dǎo)致偽狂犬病毒散播在豬場(chǎng)內(nèi)的各個(gè)不同豬群中。當(dāng)偽狂犬病毒侵入公豬身體后，偽狂犬病毒在精液中一般可存活12d之久。當(dāng)豬場(chǎng)人員采用此精液對(duì)母豬進(jìn)行人工授精，極易導(dǎo)致母豬感染病毒，最終出現(xiàn)妊娠不成功。豬場(chǎng)工作人員可以采用血清學(xué)檢測(cè)方法對(duì)豬場(chǎng)內(nèi)的豬群進(jìn)行檢查，繼而篩選出患有偽狂犬病毒的陽(yáng)性豬。引起豬群免疫力低下的主要原因是由于豬場(chǎng)內(nèi)沒有合理、安全的免疫程序。其中較為常見的是由于豬場(chǎng)內(nèi)工作人員未掌握母源抗體的消失時(shí)間規(guī)律，從而對(duì)仔豬的免疫時(shí)間無(wú)法進(jìn)行確定，所以當(dāng)仔豬體內(nèi)來(lái)自母豬的抗體在高滴度時(shí)，通常對(duì)仔豬進(jìn)行肌肉注射，繼而達(dá)到接種的目的，然而母源抗體將影響仔豬的免疫效果[4]。豬偽狂犬病傳播的速度較快，且陽(yáng)性率可達(dá)100%。當(dāng)整個(gè)豬場(chǎng)內(nèi)個(gè)別豬群發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性野毒抗體，同時(shí)伴有咳嗽時(shí)，在以后的2～3周內(nèi)整個(gè)豬場(chǎng)都有可能被病毒感染。

2.3 病理變化

豬偽狂犬病病毒株感染豬群后，哺乳仔豬、保育豬、生長(zhǎng)育肥豬都有非常典型的豬偽狂犬病的病變。主要表現(xiàn)為扁桃體水腫、化膿、出血、潰瘍甚至形成偽膜，肝臟、脾臟形成非常典型的黃白色壞死點(diǎn)或白色壞死結(jié)節(jié)病變，肺臟彌漫性點(diǎn)狀出血，腸道出血，腎出血，腦出血、水腫等特別典型的病理變化。尤其以臨床上發(fā)現(xiàn)哺乳仔豬發(fā)生病毒性心肌炎為主要特征，心肌呈白色條紋狀壞死[5]。

2.4 實(shí)驗(yàn)室診斷

2.4.1 分子生物學(xué)診斷

分子生物學(xué)診斷主要包括核酸雜交（DNA探針技術(shù)）、普通PCR診斷和實(shí)時(shí)熒光定量PCR監(jiān)測(cè)等。其中，DNA探針技術(shù)利用DNA探針敏感性高和特異性強(qiáng)的特性，可以活體直接檢測(cè)，而且快捷簡(jiǎn)便；普通PCR診斷樣本用量少、檢測(cè)速度快，一般5 h就可以檢測(cè)出結(jié)果。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)更加敏感，特異性相對(duì)其他方法更強(qiáng)，可以對(duì)潛伏期或者亞臨床感染疾病進(jìn)行有效的診斷[6]。

2.4.2 血清學(xué)診斷

血清學(xué)診斷多種血清學(xué)方法可用于偽狂犬病的診斷，目前常使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、微量血清中和試驗(yàn)（MSN）、間接免疫熒光試驗(yàn)（IFA）和乳膠凝集試驗(yàn)（LA）等進(jìn)行診斷[7]。其中血清中和試驗(yàn)的特異性、敏感性都是最好的，并且被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）列為法定的診斷方法。但由于中和試驗(yàn)的技術(shù)條件要求高、時(shí)間長(zhǎng)，所以主要是用于實(shí)驗(yàn)室研究。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)同樣具有特異性強(qiáng)、敏感性高的特點(diǎn)，3～4 h內(nèi)可得出試驗(yàn)結(jié)果，并可同時(shí)檢測(cè)大批量樣品，廣泛用于偽狂犬病的臨診診斷。另外，近幾年來(lái)，乳膠凝集試驗(yàn)以其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)也在臨診上廣泛應(yīng)用，操作極其簡(jiǎn)便，幾分鐘之內(nèi)便可得出試驗(yàn)結(jié)果。

2.5 鑒別診斷

豬偽狂犬病同流行性乙型腦炎、豬圓環(huán)病毒病和豬流感等病的癥狀類似，臨床上需進(jìn)行鑒別診斷。

（1）對(duì)于出現(xiàn)神經(jīng)癥狀的病例，有木乃伊胎則考慮偽狂犬病；弱胎、死胎的頭蓋骨肥厚者考慮流行性乙型腦炎；對(duì)死胎剖檢，前驅(qū)皮下水腫、腦膜出血、腦蓋骨出血?jiǎng)t懷疑為偽狂犬病，后驅(qū)皮下水腫、腦組織出血、溝回間出血?jiǎng)t懷疑為流行性乙型腦炎。

（2）豬感染偽狂犬病毒后，其吻突通常有綠豆大小的瘀血斑點(diǎn)，呈紫黑色；病死豬剖檢，腹股溝淋巴結(jié)不腫大，表面呈淺紅色或灰色，且腎臟有針尖狀出血點(diǎn)；而圓環(huán)病毒病例的吻突部顏色深諳，觸診發(fā)涼；軀體皮膚或四肢下部有吉痘樣潰點(diǎn)；病死豬剖檢，腹股溝淋巴結(jié)明顯腫大，表面呈白色，且腎臟出現(xiàn)邊沿整齊、綠豆大小的白色壞死灶。

（3）豬流感通常與氣候突變有密切關(guān)系，不同年齡的豬均可感染發(fā)病，且一般無(wú)神經(jīng)癥狀，采用退熱藥和抗生素類藥可治愈[8]。

3 防控措施

豬偽狂犬病尚無(wú)有效藥物治療，應(yīng)以預(yù)防為主。遵守科學(xué)引種制度，發(fā)病果斷隔離或淘汰，制定科學(xué)合理的免疫程序，建立嚴(yán)格的生物安全體系，采取科學(xué)的飼養(yǎng)管理措施，減少各種應(yīng)激因素，逐步凈化豬場(chǎng)。

3.1 科學(xué)引種制度

由于該病一經(jīng)感染可潛伏感染，存在隱性帶毒豬，因此，規(guī)模豬場(chǎng)應(yīng)實(shí)行自繁自養(yǎng)，培育屬于自己豬場(chǎng)的健康種群，若無(wú)特殊情況不要從外面引種（精液），嚴(yán)禁從疫區(qū)引入。引進(jìn)種豬、后備豬時(shí)，需隔離飼養(yǎng)45 d，期間采血送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，并做好配種前的疫苗免疫及驅(qū)蟲工作，血清學(xué)檢測(cè)確認(rèn)為健康豬只，方可混群飼養(yǎng)。

3.2 果斷隔離或淘汰

一旦發(fā)病立即采取隔離措施，檢測(cè)確診后，全場(chǎng)緊急免疫，條件允許時(shí)，淘汰全部陽(yáng)性豬。對(duì)一切有可能被污染的場(chǎng)所和設(shè)施、設(shè)備均進(jìn)行徹底消毒。隔離舍由專業(yè)人員飼養(yǎng)，隔離期間禁止外來(lái)車輛及人員隨意走動(dòng)。

3.3 免疫接種

（1）后備豬應(yīng)在配種前實(shí)施至少2次偽狂犬疫苗的免疫接種，使用基因缺失弱毒活疫苗。

（2）經(jīng)產(chǎn)母豬應(yīng)根據(jù)本場(chǎng)感染程度，每年全群普免3～4次，使用滅活苗或基因缺失弱毒活疫苗均可，2次免疫中至少有1次使用基因缺失弱毒苗，陽(yáng)性率高的豬場(chǎng)，第一次使用基因缺失弱毒活疫苗，第二次使用滅活苗較為穩(wěn)妥。

（3）哺乳仔豬免疫根據(jù)本場(chǎng)豬群感染情況而定。本場(chǎng)未發(fā)生過(guò)或周圍也未發(fā)生過(guò)偽狂犬疫情的豬群，可在35 d以后免疫1頭份滅活苗；若本場(chǎng)或周圍發(fā)生過(guò)疫情的豬群應(yīng)在3日齡內(nèi)使用弱毒活疫苗滴鼻免疫，55～65日齡接種弱毒活疫苗1頭份，3周后弱毒活疫苗加強(qiáng)免疫1次。

（4）疫區(qū)或疫情嚴(yán)重的豬場(chǎng)：3日齡內(nèi)使用弱毒活疫苗滴鼻免疫，55-65日齡接種滅活疫苗1頭份，3周后弱毒活疫苗加強(qiáng)免疫1次。

3.4 生物安全措施

豬場(chǎng)要科學(xué)選址，其內(nèi)部各區(qū)間的距離適當(dāng)，相互獨(dú)立，防止交叉感染，各飼養(yǎng)管理人員禁止串舍，并做好人員、車輛、豬群、用具以及各種器械的日常消毒工作。消滅豬場(chǎng)中的鼠類，嚴(yán)格控制犬、貓、鳥類和其他禽類進(jìn)入豬場(chǎng)，嚴(yán)格控制人員來(lái)往，并做好消毒工作及血清學(xué)監(jiān)測(cè)等，這樣對(duì)本病的防制也可起到積極的推動(dòng)作用。

3.5 飼養(yǎng)管理措施

全進(jìn)全出，分階段分日齡飼養(yǎng)，根據(jù)不同階段的豬只營(yíng)養(yǎng)需求給予新鮮的飼料供給。保證飲水的清潔和充足。做好圈舍衛(wèi)生、通風(fēng)、夏天降溫和冬天保溫等工作，讓豬只處于舒適的環(huán)境，減少豬群應(yīng)激。在豬只轉(zhuǎn)群、疫苗免疫前添加維生素及黃芪多糖等，提高主動(dòng)免疫力，及被動(dòng)免疫應(yīng)答能力。

3.6 凈化技術(shù)要點(diǎn)

（1）引進(jìn)陰性后備豬，做好配種前疫苗免疫工作。

（2）定期監(jiān)測(cè)豬群抗體情況，制定合理免疫程序。

（3）做好生物安全措施，切斷傳播途徑。

（4）杜絕犬、貓、雞及其他鳥類進(jìn)入豬場(chǎng)，定期進(jìn)行場(chǎng)內(nèi)滅鼠、滅蠅工作。