三種梅毒血清學(xué)檢測方法的應(yīng)用評(píng)價(jià)

余育春

[摘要] 目的 研究3種梅毒血清學(xué)檢測方法的應(yīng)用。方法 方便選取該院2016年2月—2019年4月收治的梅毒患者80例作為研究對(duì)象，以感染梅毒情況為基點(diǎn)隨機(jī)分感染組與未感染組，各40例，均采用甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)、梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)與梅毒螺旋體免疫印跡法，比較兩組梅毒抗體陽性情況、3種血清學(xué)實(shí)驗(yàn)方法的檢測效能與實(shí)驗(yàn)方法的應(yīng)用價(jià)值。 結(jié)果 感染組抗體陽性率（80.00%、90.00%與97.50%高于未感染組12.50%、2.50%與0.00%;感染組的免疫印跡法陽性率（97.50%）高于甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（80.00%）與梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)（90.00%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=6.383，P=0.041）;甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)敏感性為80.00%、特異性為90.00%、陽性預(yù)測值為88.88%、陰性預(yù)測值為81.81%;梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)敏感性為87.50%、特異性為97.50%、陽性預(yù)測值為97.22%、陰性預(yù)測值為88.63%;免疫印跡法敏感性為92.50%、特異性為100.00%、陽性預(yù)測值為100.00%、陰性預(yù)測值為93.02%，與甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)與梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)比較，免疫印跡法的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值與陰性預(yù)測值均高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 對(duì)梅毒患者采用甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)、梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)與免疫印跡法檢測能早期確診病情，避免發(fā)生誤診或漏診，為后續(xù)治療提供參考，值得借鑒。

[關(guān)鍵詞] 梅毒;血清學(xué);甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn);梅毒螺旋體免疫印跡法

[中圖分類號(hào)] R4? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1674-0742（2019）12（a）-0184-03

[Abstract] Objective To study the application of three serological tests for syphilis. Methods Eighty patients with syphilis admitted to the hospital from February 2016 to April 2019 were convenient enrolled in the study. The infection was treated with syphilis as the basis for random infection and 40 cases of uninfected group. The test， syphilis spirogel gelatin agglutination test and Treponema pallidum immunoblotting， comparing the serotype antibody positive status of the two groups， the detection efficiency of the three serological test methods and the application value of the experimental method. Results The positive rate of antibody in the infected group （80.00%， 90.00% and 97.50% was higher than 12.50%， 2.50% and 0.00% in the uninfected group; the positive rate of immunoblotting in the infected group （97.50%） was higher than that in the toluidine red non-heated serum test （80.00%） and syphilis spirogel gelatin agglutination test （90.00%）， ，the difference was statistically significant（χ2=6.383， P=0.041） toluidine red unheated serum test sensitivity is 80.00%， specificity is 90.00%， positive predictive value is 88.88%， negative The predicted value was 81.81%; the sensitivity of the syphilis spirogel gelatin test was 87.50%， the specificity was 97.50%， the positive predictive value was 97.22%， the negative predictive value was 88.63%; the immunoblotting sensitivity was 92.50%， and the specificity was 100.00. %， positive predictive value is 100.00%， negative predictive value is 93.02%， compared with toluidine red unheated serum test and treponema pallidum gelatin agglutination test， the sensitivity， specificity， positive predictive value and negative predictive value of immunoblotting are both High， the difference was statistically significant（P<0.05）.Conclusion Toluidine red unheated serum test， syphilis spirogel gelatin agglutination test and immunoblotting test for syphilis patients can diagnose the disease early and avoid it. Misdiagnosis or missed diagnosis provides reference for follow-up treatment and is worth learning.

[Key words] Syphilis; Serology; Toluidine red unheated serum test; Treponema pallidum immunoblotting

梅毒是臨床常見的系統(tǒng)性性傳播疾病，主要是由梅毒螺旋體引起的，常見傳播途徑為性傳播，根據(jù)疾病類型具體劃分成Ⅰ期梅毒、Ⅱ期梅毒、Ⅲ期梅毒、潛伏梅毒與胎傳梅毒等，經(jīng)調(diào)查研究[1]顯示，該項(xiàng)疾病屬于《中華人民共和國傳染病防治法》中乙類防治管理病種，其在全世界范圍內(nèi)流行，具有較高發(fā)病率，患者黏膜或皮膚中存在梅毒螺旋體，若未患病癥者與梅毒患者進(jìn)行性接觸，黏膜或皮膚出現(xiàn)細(xì)微破損造成傳染，少數(shù)患者是由輸血途徑傳播的，后天梅毒是傳染源，經(jīng)無保護(hù)或危險(xiǎn)性性行為傳播疾病，甚至通過輸血、衣物污染或親吻等形式也會(huì)傳染，感染梅毒螺旋體主要存在于皮損分泌物或血液內(nèi)部，直接威脅患者的生命健康。隨著現(xiàn)代醫(yī)療事業(yè)發(fā)展，臨床診斷梅毒患者采用甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)、梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)與梅毒螺旋體免疫印跡法檢測，早期確診病情，為后續(xù)早期開展臨床治療提供重要參考依據(jù)，具時(shí)效性[2]。為分析3種梅毒血清學(xué)檢測方法的應(yīng)用效果，該院方便選擇2016年2月—2019年4月收治的梅毒患者80例作為研究對(duì)象，報(bào)道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

方便選取該院收治的梅毒患者80例作為研究對(duì)象，感染組有40例，男26例，女14例，年齡1～65歲，平均年齡（47.58±10.24）歲;病程1～7年，平均（4.17±1.28）年;梅毒分期：Ⅰ期13例，Ⅱ期16例，Ⅲ期11例;既往存在梅毒史28例，并未存在梅毒史12例。未感染組有40例，男29例，女11例，年齡3～67歲，平均年齡（47.64±10.36）歲;病程1～8年，平均（4.29±1.17）年;梅毒分期：Ⅰ期15例，Ⅱ期13例，Ⅲ期12例;既往存在梅毒史27例，并未存在梅毒史13例。兩組年齡、病程、梅毒分期與既往病史等基線資料，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具可比性。①納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)檢查符合梅毒的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3];患者表現(xiàn)為濕丘疹、扁平濕疣或硬下疳等情況;自愿參與并對(duì)《知情同意書》簽字;醫(yī)院倫理委員會(huì)審核同意。②排除標(biāo)準(zhǔn)：惡性腫瘤;嚴(yán)重心腦血管疾病;嚴(yán)重肝腎疾病;凝血功能障礙或免疫系統(tǒng)疾病;精神異常;病例資料不全。

1.2? 方法

研究對(duì)象均采用甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)、梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)與梅毒螺旋體免疫印跡法測定患者血清標(biāo)本中的梅毒螺旋體抗體，實(shí)際操作流程如下：采集患者空腹?fàn)顟B(tài)下靜脈血5 mL，采用低速自動(dòng)平衡離心機(jī)（型號(hào)：TDZ5-WS）分離血清[4]。

甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)的試劑盒由上海榮盛生物有限公司提供，所用儀器為蘇州市東吳醫(yī)用電子儀器廠生產(chǎn)的數(shù)顯混勻器（型號(hào)：WZR-H6000），將血清按照1：1、1：2、1：4與1：8的比例進(jìn)行稀釋，最終對(duì)血清標(biāo)本內(nèi)的梅毒螺旋體抗體進(jìn)行檢測[5]。

梅毒螺旋體明膠凝膠試驗(yàn)的試劑盒由日本富士瑞必歐株式會(huì)社提供，所用儀器為江蘇康健醫(yī)療用品有限公司生產(chǎn)的梅毒螺旋微量振蕩儀（型號(hào)為：KJ-201A型振蕩器），檢測血清標(biāo)本內(nèi)梅毒螺旋體抗體[6]。

梅毒螺旋體免疫印跡法的試劑盒由德國歐蒙試驗(yàn)免疫制品有限公司提供，對(duì)最終結(jié)果進(jìn)行觀察，若印跡膜上出現(xiàn)兩條以上47 000，17 000與14 000的多肽抗原條帶，判斷最終結(jié)果陽性;印跡膜上無顯色待或出現(xiàn)90 000，60 000，33 000，3 000，25 000，22 000與45 000，等多肽抗原弱條帶，則判斷最終結(jié)果為陰性[7]。免疫印跡法測定梅毒特異性抗體的重復(fù)性：①批內(nèi)重復(fù)性：將強(qiáng)陽性、弱陽性與陰性的血清標(biāo)本分別檢測5次，確保每次檢測的多肽抗原條帶數(shù)一致，確保陰性與陽性結(jié)果一致。②批間重復(fù)性：5 d內(nèi)分別檢測強(qiáng)陽性、弱陽性與陰性指標(biāo)，每次檢測多肽抗原帶數(shù)一致，確保陰性與陽性結(jié)果相符合[8]。

1.3? 療效評(píng)價(jià)

①參考《全面臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[9]對(duì)最終結(jié)果進(jìn)行判定，梅毒抗體陽性標(biāo)準(zhǔn)：OD值為S/C.0在1及以上;梅毒抗體陰性標(biāo)準(zhǔn)：OD值為S/C.0在1以下。

②敏感度為真陽性率，特異度為真陰性率。

③陽性預(yù)測值=真陽性/真陽性+假陽性。

④陰性預(yù)測值=真陰性/真陰性+假陰性。

1.4? 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料（%）進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料（x±s）進(jìn)行t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1? 兩組梅毒抗體陽性情況

經(jīng)調(diào)查研究顯示，感染組抗體陽性率高于未感染組;免疫印跡法陽性率明顯高于甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)與梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2? 3種血清學(xué)實(shí)驗(yàn)方法的檢測效能

經(jīng)該研究發(fā)現(xiàn)，甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)敏感性為80.00%（32/40）、特異性為90.00%（36/40）、陽性預(yù)測值為88.88%（32/36）、陰性預(yù)測值為81.81%（36/44）;梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)敏感性為87.50%（35/40）、特異性為97.50%（39/40）、陽性預(yù)測值為97.22%（35/36）、陰性預(yù)測值為88.63%（39/44）;免疫印跡法敏感性為92.50%（37/40）、特異性為100.00%（40/40）、陽性預(yù)測值為100.00%（37/37）、陰性預(yù)測值為93.02%（40/43），與甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)與梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)比較，免疫印跡法的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值與陰性預(yù)測值均高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3? 討論

梅毒是臨床較常見的傳染性疾病，致病機(jī)制為梅毒螺旋體造成機(jī)體引起慢性或系統(tǒng)性性傳播，主要的傳播途徑為性傳播，發(fā)病率高，早期梅毒患者是傳染源，少數(shù)患者可能會(huì)經(jīng)親吻、輸血或污染衣物等傳染，病情加重會(huì)直接威脅生命健康，因此根據(jù)病情嚴(yán)重程度，早期采取針對(duì)性診斷措施確診病情具重要意義，確保早期開展治療流程，預(yù)防疾病加重，具時(shí)效性與可靠性[10]。

有研究報(bào)道[11]，甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)、梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)與免疫印跡法診斷梅毒患者能提高疾病確診率，其中甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)屬于非美都螺旋體抗原血清試驗(yàn)，選擇的抗原為較正常心肌的心類脂，重點(diǎn)對(duì)機(jī)體內(nèi)反應(yīng)素進(jìn)行測定，檢測梅毒的陽性指征為測定梅毒螺旋體感染正常心肌的心類脂后相應(yīng)的螺旋體表面脂質(zhì)會(huì)提出免疫應(yīng)答，受梅毒螺旋體感染后會(huì)出現(xiàn)抗類脂質(zhì)抗原的抗體，主要在篩查梅毒患者中被廣泛應(yīng)用;梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)屬于梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)，選擇的抗原為超聲裂解的梅毒螺旋體，將血漿或血清中的梅毒螺旋抗體與人工合成的致敏紅色明膠顆粒相結(jié)合，機(jī)體會(huì)發(fā)生紅色凝集反應(yīng)，便于確診病情;免疫印跡法是將免疫化學(xué)分析技術(shù)與高分辨率的凝膠電泳結(jié)合檢測蛋白質(zhì)特性與表達(dá)，具有敏感度高、特異性強(qiáng)與分析容量大等特征，因此給予梅毒患者上述血清檢測能提高疾病確診率，為后續(xù)臨床治療提供重要參考。

在該次研究中，感染組抗體陽性率高于未感染組;免疫印跡法陽性率明顯高于甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)與梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn);甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)敏感性為80.00%、特異性為90.00%、陽性預(yù)測值為88.88%、陰性預(yù)測值為81.81%;梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)敏感性為87.50%、特異性為97.50%、陽性預(yù)測值為97.22%、陰性預(yù)測值為88.63%;免疫印跡法敏感性為92.50%、特異性為100.00%、陽性預(yù)測值為100.00%、陰性預(yù)測值為93.02%，與甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)與梅毒螺旋體明集凝膠試驗(yàn)比較，免疫印跡法的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值與陰性預(yù)測值均高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），朱學(xué)英[12]研究中指出甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)的靈敏度是88.57%，特異度是97.14%;梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)的靈敏度是96.53%，特異度是99.29%，說明與該研究報(bào)道基本一致。

綜上所述，對(duì)梅毒患者采用甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)、梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)與免疫印跡法檢測能早期確診病情，避免發(fā)生誤診或漏診，為后續(xù)治療提供參考，值得借鑒。

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（收稿日期：2019-09-05）