中醫(yī)藥治療阿爾茨海默病APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠的研究進(jìn)展※

孫寧寧 張松江 武 鑫 蘇少華 王冬慧 高劍峰

（1 河南中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河南 鄭州 450008；2 河南中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，河南 鄭州 450008）

阿爾茨海默?。ˋlzheimer disease，AD），是一種以腦部神經(jīng)病變?yōu)橹饕R床表現(xiàn)的疾病。本病的主要病理改變：大腦海馬區(qū)β淀粉樣蛋白（amyloid β peptide，Aβ）的沉積而形成的老年斑、大腦皮質(zhì)與海馬區(qū)tau蛋白過度磷酸化而致的神經(jīng)元纖維纏結(jié)（neurofibrillary tangles，NFTs）［1］。就目前的研究狀況來看，AD仍舊是人類還需耗費(fèi)大量精力和時間才能有所突破的一項(xiàng)重大的挑戰(zhàn)。

APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因癡呆模型小鼠表達(dá)人類突變的β淀粉樣蛋白 swe基因 （β-amyloid precursor protein swe，APP swe） 和早老素 1基因 （preseniline 1-246E，PS1-246E），可短期內(nèi)形成Aβ1-42和蛋白沉積，并隨增齡出現(xiàn)進(jìn)行性加重［2］。實(shí)驗(yàn)證明，這種模型可以很好的模擬早期及逐漸進(jìn)展期腦內(nèi)老年斑的形成［3］。APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因模型對于AD的研究意義重大，本文結(jié)合近年來該方面的最新研究進(jìn)展，從中藥復(fù)方和有效成分這兩方面進(jìn)行綜述。

1 中藥復(fù)方與APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因AD鼠

1.1 地黃飲子 周妍妍等［4］給 APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因 AD小鼠地黃飲子灌胃4周，觀察到地黃飲子可能通過降低小鼠腦組織的細(xì)胞凋亡、提高腦組織Bcl-2 mRNA表達(dá)、降低Bax mRNA和 Caspese-3mRNA的表達(dá)來治療 AD。樸鐘源等［5］研究地黃飲子對APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因癡呆小鼠行為學(xué)及RAGE/p38信號通路的影響，地黃飲子可能通過抑制RAGE/p38信號通路提高 APP/PS1鼠的空間記憶能力。

1.2 黃連解毒湯 馮佩［6］給 3月齡 APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因 AD模型小鼠黃連解毒湯6個月，觀察各組腦內(nèi)β-APP基因表達(dá)情況，黃連解毒湯能降低APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因AD模型小鼠腦內(nèi) β-淀粉樣前體蛋白（β-APP） 基因表達(dá)。邱昕等［7］給予 APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠黃連解毒湯灌胃治療，黃連解毒湯可能通過提高抗氧化能力減輕炎癥反應(yīng)來治療AD。

1.3 補(bǔ)陽還五湯 周忠光等［8］給予 APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因雄性小鼠補(bǔ)陽還五湯持續(xù)28 d灌胃并測試小鼠行為學(xué)指標(biāo)和海馬組織白介素IL-6蛋白水平，結(jié)果顯示補(bǔ)陽還五湯組能顯著降低海馬組織IL-6蛋白水平，改善小鼠學(xué)習(xí)記憶功能。費(fèi)洪新等［9］將補(bǔ)陽還五湯水煎劑給予 7月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因鼠灌胃 28 d，發(fā)現(xiàn)可明顯改善海馬CA3區(qū)神經(jīng)元形態(tài)和降低腦內(nèi)Aβ水平，可有效改善腦內(nèi)炎癥反應(yīng)。

1.4 中藥Ⅰ號方 鄧巍等［10］給 5月齡 APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠中藥1號方水煎劑4個月，觀察APP及其代謝產(chǎn)物和分解酶的變化，中藥1號方通過影響APP的分解過程減少Aβ的生成進(jìn)而減少老年斑的沉積。秦川等［11］給予5月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠中藥1號方灌胃3個月，觀察小鼠行為和精神癥狀的改變，中藥1號方能明顯改善APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠的學(xué)習(xí)能力和焦慮癥狀，提高其耐力。

1.5 醒腦液 張子洋等［12］給予 PAP雙轉(zhuǎn)基因癡呆小鼠醒腦液灌胃 4個月，觀察其大腦組織中中性內(nèi)肽酶（NEP） 和 β分泌酶（BACE1） mRNA的表達(dá)情況，醒腦液對雙轉(zhuǎn)基因癡呆小鼠NEP和BACE1mRNA表達(dá)有較好的調(diào)控作用，醒腦液對防治AD有良好的效果。常富業(yè)等［13-15］給予APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因癡呆小鼠醒腦液灌胃4個月，觀察Aβ40、Aβ42、老年斑的表達(dá)及血漿中乙酰膽堿活性，醒腦液能改善AD模型小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。

1.6 調(diào)心方 王曉雯等［16］給予 3月齡 APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因AD小鼠調(diào)心方12周，觀察其行為改變和電生理改變，調(diào)心方可有效改善APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因AD小鼠空間記憶能力，保護(hù)神經(jīng)突觸的作用。王健等［17］給予 3月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因AD小鼠調(diào)心方灌胃12周，觀察小鼠行為學(xué)改變，調(diào)心方可改善APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因AD小鼠學(xué)習(xí)記憶水平，保護(hù)神經(jīng)突觸。

此外，劉旻等［18］認(rèn)為復(fù)方丹參片可能通過減少海馬Aβ水平和增加胰島素分解酶的表達(dá)來改善APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠學(xué)習(xí)記憶能力。高彥斌等［19］認(rèn)為洗心湯通過提高小鼠海馬突觸功能蛋白及受體表達(dá)來改善APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠的空間學(xué)習(xí)記憶功能。

2 中藥有效成分與APP/PSI雙轉(zhuǎn)基因AD鼠

2.1 姜黃素 姜黃素是從多年生草本植物姜黃、郁金、莪術(shù)等的根莖中提取，有特殊的味道和芳香的酚類色素［20］。滕志鵬等［21］給予APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因鼠姜黃素飼料喂養(yǎng)6個月，觀察海馬組織中三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)子 A1（ABCA1） 和載脂蛋白 A1（apoA1）的表達(dá)及血清中總膽固醇和高密度脂蛋白（HDL）含量的變化，姜黃素可能通過增加ABCA1表達(dá)、升高apoA1和HDL含量降低膽固醇水平起到干預(yù)的作用。黨惠子等［22］給予 3月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠姜黃素灌胃3個月，觀察姜黃素對轉(zhuǎn)基因小鼠及海馬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)子 1（GLUT1） 和GLUT3表達(dá)的影響，姜黃素可改善APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力。

2.2 石菖蒲活性成分 石菖蒲屬天南星、菖蒲屬禾草狀多年生草本植物，其主要活性成分為β-細(xì)辛醚和丁香酚。張春霞等［23］給 3月齡 APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠石菖蒲活性成分β-細(xì)辛醚和丁香酚連續(xù)用藥4個月，觀察大腦內(nèi)海馬皮層APP表達(dá)、海馬CA1區(qū)神經(jīng)元及神經(jīng)突觸超微結(jié)構(gòu)的變化，結(jié)果顯示β-細(xì)辛醚和丁香酚可以抑制APP的過量表達(dá)，對與學(xué)習(xí)記憶密切相關(guān)的突觸有一定的保護(hù)和修復(fù)作用。

2.3 遠(yuǎn)志提取物 遠(yuǎn)志屬養(yǎng)心安神藥，有安神益智之功。帥智峰等［24］給予 4月齡 APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠遠(yuǎn)志皂苷灌胃2周，觀察海馬神經(jīng)細(xì)胞線粒體膜電位及相關(guān)指標(biāo)，遠(yuǎn)志皂苷可能通過調(diào)控線粒體功能保護(hù)海馬神經(jīng)元。陳玉靜等［25］給予 APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠遠(yuǎn)志皂苷元 3個月，觀察突觸相關(guān)蛋白 PSD-95和Shank-1的表達(dá)，遠(yuǎn)志皂苷元能夠增加APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠PDS-95和Shank-1的表達(dá)改善突觸功能。

2.4 二苯乙烯苷 二苯乙烯苷是中藥何首烏主要成分之一，外觀呈棕紅色粉末狀，是一種多羥基酚類化合物。楊曉穎等［26］給予 3月齡 APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠二苯乙烯苷灌胃60 d，觀察腦組織中APP、PS1mRNA的表達(dá)，結(jié)果顯示二本乙烯苷可對阿爾茨海默病起到一定防治保護(hù)作用可能與APP、PS1基因收到明顯抑制有關(guān)。楊曉穎等［27］給予 3月齡 APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠二苯乙烯苷灌胃 60 d，觀察小鼠海馬神經(jīng)元的一般結(jié)構(gòu)及腦組織APP蛋白和分揀蛋白相關(guān)受體（SORL）1的表達(dá)，二苯乙烯苷可能通過促進(jìn) SORL1mRNA生成、抑制APP異常代謝、減少老年斑的生成等來治療AD。

此外，表沒食子兒茶素沒食子酸酯可能通過減輕IRS-1磷酸化水平來減輕APP/PS1小鼠海馬胰島素抵抗［28］達(dá)到干預(yù)治療 AD的目的。雷公藤甲素抑制 Aβ的產(chǎn)生和 SP形成，或可用于 AD的治療［29］。

3 展望

AD復(fù)雜的病因及發(fā)病機(jī)制給人類帶來了極大的挑戰(zhàn)，給人們的工作和生活帶來了極大的不便，但這些挑戰(zhàn)與困難也更堅(jiān)定了人們戰(zhàn)勝并克服它的決心，西藥在治療AD上主要是通過膽堿酯酶抑制劑、谷氨酸受體阻斷藥、改善腦代謝和腦循環(huán)藥物、鈣通道阻滯藥等，治療并沒達(dá)到預(yù)期效果，因此需要尋求一種有效的解決方式。

近年來隨著科學(xué)研究的不斷進(jìn)展，中醫(yī)藥在治療AD方面具有多靶點(diǎn)、多方式、多途徑的特點(diǎn)，加大中醫(yī)藥在該領(lǐng)域的研究力度，潛心于這方面的研究，也許會給人們帶來意想不到的驚喜。APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因鼠雖已較大范圍的應(yīng)用于該領(lǐng)域的研究，轉(zhuǎn)基因鼠雖給人們的研究帶來了極大地便利，但轉(zhuǎn)基因畢竟是轉(zhuǎn)基因，和患者本身或者說病例本身是有差距的，仍有很多地方是不夠成熟的，最基本的比如說小鼠月齡的選擇，人們應(yīng)根據(jù)自己研究課題的需要，合理選用不同月齡的轉(zhuǎn)基因鼠，而不是人云亦云。轉(zhuǎn)基因小鼠是人類研究AD這一疾病發(fā)展的趨勢與潮流，中醫(yī)藥也逐漸被世界范圍內(nèi)認(rèn)可，這兩者的結(jié)合會是AD患者的福音、人類的福音。我們相信，隨著中醫(yī)藥在該領(lǐng)域研究的不斷深入，一定會給AD的研究帶來極大地改變，甚至?xí)抢锍瘫降倪M(jìn)展。