嶺南中藥廣藿香活性成分誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡的研究進展※

來慧麗1 吳文如2* 陳 俠1 安 鑫2 唐省三1

（1 廣東食品藥品職業(yè)學(xué)院護理學(xué)院，廣東 廣州 510520；2 廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，廣東 廣州 510006）

廣藿香 （Pogostemon cablin（Blanco） Benth） 為唇形科刺蕊草屬植物的全草，味辛、性微溫；歸脾、胃、肺經(jīng)；具有芳香化濕、和胃止嘔、清熱解暑之功效。廣藿香之名首見于東漢楊孚所著《異物志》一書，文獻記載廣藿香原產(chǎn)于東南亞一帶，后傳入我國嶺南地區(qū)進行種植，目前其產(chǎn)地主要在我國廣東省的廣州、肇慶、湛江以及海南、廣西、四川省等地。2016年廣藿香與廣陳皮、廣佛手、沉香、何首烏等8味嶺南中藥材入選首批嶺南道地藥材［1］。

臨床常用于濕濁中阻，脘痞嘔吐，暑濕表證，濕溫初起，發(fā)熱倦怠，胸悶不舒，寒濕閉暑，腹痛吐瀉，鼻淵頭痛等疾?。?］。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明廣藿香具有調(diào)節(jié)胃腸功能、促進消化液的分泌；抗菌、抗病毒；抗炎、鎮(zhèn)靜；解熱、殺蟲增效等作用［3］。中醫(yī)學(xué)認為腫瘤的發(fā)生與機體正氣虛弱、陰陽及臟腑功能失調(diào)導(dǎo)致的氣滯血瘀有關(guān)，中醫(yī)藥在改善腫瘤患者生活質(zhì)量、提高患者免疫力、防止腫瘤復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移、減輕腫瘤藥物不良反應(yīng)等方面有著較好的作用［4］。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認為腫瘤發(fā)生的主要原因是基因突變與免疫逃逸，對于廣藿香活性成分抗腫瘤的藥理研究近年來也陸續(xù)可見，本文著重對廣藿香活性成分通過誘導(dǎo)細胞凋亡抗腫瘤的機制進行論述。

1 細胞凋亡及其途徑

1.1 細胞凋亡 細胞凋亡（apoptosis）是由細胞內(nèi)基因調(diào)控的細胞程序性死亡的過程，見于正常細胞的發(fā)育過程中，細胞凋亡可維持細胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，異常的凋亡可引起多種疾?。?］。腫瘤的發(fā)生與發(fā)展與細胞異常凋亡密切相關(guān)，研究藥物誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡一直是腫瘤基礎(chǔ)研究中的熱點。細胞凋亡的途徑有線粒體途徑、死亡受體途徑與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑。目前對廣藿香活性成分誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡的研究，多集中在線粒體途徑。

1.2 細胞凋亡的線粒體途徑 線粒體是細胞的能量站，為細胞正常生長與分裂提供能量來源。線粒體途徑也稱為內(nèi)源性途徑，根據(jù)凋亡的發(fā)生是否需要激活Caspase蛋白家族而分為兩大類。Caspase蛋白家族是一種半胱氨酸蛋，在整個凋亡的發(fā)生過程中處于核心地位，目前已發(fā)現(xiàn)有14種，大多數(shù)參與到細胞凋亡過程中［6］。凋亡線粒體途徑中第一類需要Caspase蛋白來誘導(dǎo)凋亡，細胞發(fā)生損傷時，線粒體通透性轉(zhuǎn)換膜開放，釋放細包色素C到細胞質(zhì)，進入胞質(zhì)的細胞色素C在ATP與dATP的作用下與凋亡蛋白酶活化因子Ⅰ（apoptotic protease activating factor-1，Apaf-1）形成復(fù)合物。并通過Apaf-1的募集結(jié)構(gòu)域募集Caspase-9前體，啟動Caspase級聯(lián)反應(yīng)，激活Caspase-3、Caspase-7等一系列下激蛋白分子，從而誘導(dǎo)細胞凋亡。第二類不依靠Caspase而誘導(dǎo)的凋亡中，線粒體可釋放凋亡誘導(dǎo)因子（apoptosis-inducing factor，AIF）直接誘導(dǎo)細胞凋亡，AIF的釋放受到了bcl-2等相關(guān)基因的調(diào)控［7］。

2 廣藿香抗腫瘤活性成分

20世紀70年代，研究人員從廣藿香中提取出具有抗菌活性的揮發(fā)油成分廣藿香酮，開啟了對廣藿香活性成分研究的篇章。隨著分析儀器的發(fā)展，現(xiàn)已從廣藿香揮發(fā)油中分析出120多個化學(xué)成分，目前對廣藿香揮發(fā)油成分抗腫瘤機制的研究熱點集中在廣藿香醇與廣藿香酮［8］，也有報道廣藿香內(nèi)生真菌次生代謝產(chǎn)物對腫瘤細胞的增殖有抑制作用［9］。

2.1 廣藿香醇誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡 廣藿香醇（PA）又稱百秋李醇，是一種三環(huán)倍半萜類化合物，是廣藿香揮發(fā)油中的主要成分之一。由于其獨特的氣味，也是重要的香料與食品添加劑，被廣泛用于化妝品、日用品與食品中?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，廣藿香醇具有神經(jīng)保護、抗氧化、抗真菌、抗炎、抗寄生蟲等藥理作用。近些年，研究者也將廣藿香醇用于抗腫瘤的研究當中。

Jeong J B等［10］將廣藿香醇作用于人大腸癌細胞HCT116、SW480，發(fā)現(xiàn)廣藿香醇通過抑制大腸癌細胞的生長和促進其凋亡而發(fā)揮抗癌活性。其機制包括抑制組蛋白去乙酰化酶2（histone deacetylases 2，HDAC2）的表達和組蛋白去乙?；富钚?，以及下調(diào)細胞色素C和激活NF-κB途徑，增強其轉(zhuǎn)錄活。廣藿香醇誘導(dǎo)人大腸癌細胞生長停滯和細胞凋亡是由于HDAC2介導(dǎo)的NF-κB激活所致。

研究人員將廣藿香醇作用于多種腫瘤細胞，發(fā)現(xiàn)廣藿香醇能不同程度的抑制人腫瘤細胞HCT116、HepG-2、A549、MV4-11、A375、THP-1的增殖，在對人急性淋巴髓單核細胞白血病細胞MV4-11的蛋白印跡檢測表明，廣藿香醇能明顯上調(diào)Caspase-3的表達，同時能夠抑制PKM2 磷酸化和 NF-κB 的表達［11］。

體內(nèi)外實驗表明，廣藿香醇對人肺癌細胞A549有抑制作用。JNK信號通路的磷酸化激活和EGFR通路的去磷酸化導(dǎo)致線粒體膜電位丟失，使得Bcl-2/Bax失衡，從而釋放細胞色素C，激活Caspase-3與Caspase-9，從而通過線粒體途徑誘導(dǎo)凋亡［12］。

2.2 廣藿香酮誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡 廣藿香酮是廣藿香油中的重要活性成分之一，是廣藿香油質(zhì)量的指標成分。其藥理研究多集中其抗菌、抗炎等作用，已有學(xué)者對其抗腫瘤的研究機制進行初步的研究。

吳瑤詩等［13］研究表明，廣藿香酮可通過誘導(dǎo)細胞凋亡抑制人膽囊癌細胞SGC-996細胞的增殖，明顯抑制細胞克隆形成，且具有劑量與時間依賴性。通過蛋白印跡法檢測線粒體凋亡通路相關(guān)蛋白的表達，活化型Caspase-3、Caspase-9、PARP-1蛋白的表達水平及 Bax與Bcl-2的比值上升，因此推測，廣藿香酮通過線粒體通路誘導(dǎo)膽囊癌細胞凋亡，從而抑制膽囊癌細胞SGC-996的增殖。

Cao Z X等［14］通過體外研究發(fā)現(xiàn)，廣藿香酮對人大腸癌細胞HCT116具有顯著的抗腫瘤活性。廣藿香酮通過誘導(dǎo)自噬與凋亡抑制大腸癌細胞的活性，凋亡機制與上調(diào)LC3-Ⅱ、活化型Caspase-7和Caspase-3的表達與下調(diào)磷酸化AKT/mTOR表達有關(guān)。

蔡劍等［15］研究表明，廣藿香酮可抑制前列腺癌細胞DU145的增殖。通過蛋白印跡法檢測，活化Caspase-3表達水平明顯上調(diào)，Bax蛋白表達上調(diào)與Bcl-2表達下調(diào)，Bax與Bcl-2的比值增加。研究表明廣藿香酮對前列腺癌細胞的抑制與線粒體途徑的細胞凋亡有關(guān)。

3 展望

隨著人口老齡化的加劇，中國惡性腫瘤發(fā)病率將持續(xù)上升，越來越多的研究者將目光投向中草藥及其活性成分抗腫瘤的研究。由于中藥復(fù)方成分復(fù)雜，影響因素較多，近年來對抗腫瘤中藥的研究多以中藥單體作為研究對象。已發(fā)現(xiàn)姜黃素、漢防己甲素、丹參酮等中藥單體具有抗腫瘤的作用；其機制主要有抑制腫瘤細胞新生血管形成、抑制腫瘤細胞增殖、抗腫瘤細胞的侵襲與轉(zhuǎn)移、與化療聯(lián)合協(xié)同增效等。葛根素、丹酚酸B、人參皂苷等中藥單體可通過線粒體通路誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡。

目前對于廣藿香活性成分抗腫瘤的研究焦點主要集中在廣藿香的揮發(fā)油成分，包括廣藿香酮與廣藿香醇。在其誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡的機制研究中，大多數(shù)研究者從線粒體途徑著手研究，對通過死亡受體途徑與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑誘導(dǎo)的凋亡機制研究較少，且研究內(nèi)容不夠深入，局限于抑制腫瘤細胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡等方面。隨著人們對腫瘤發(fā)生機制的不斷探索與研究，中藥單體尤其是廣藿香活性分在抗腫瘤方面的深入研究，以及新藥的不斷涌現(xiàn)，腫瘤的治療將有更大的改觀。