• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    短柱八角中二萜類成分及其抗炎活性

    2019-01-25 07:31:24呂閃閃孫連娜
    中成藥 2019年1期
    關鍵詞:二萜柱層析石油醚

    陳 偉, 呂閃閃, 王 璇, 陳 程, 孫連娜?

    (1. 菏澤家政職業(yè)學院, 山東 菏澤274300; 2. 上海中醫(yī)藥大學中藥學院中藥炮制學教研室, 上海

    201203)

    二萜是一種廣泛存在于自然界的C20類化合物,具有抗菌消炎、 抗腫瘤、 抗氧化等生物活性[1]。八角屬木蘭科植物廣泛分布在東南亞地區(qū), 在我國主要見于云南、 廣東、 廣西[2], 短柱八角Illicium brevistylum A. C. Smith 是八角屬的一種, 以灌木為主[3-5], 具有祛風除濕、 治療關節(jié)痛等功效[6]。 課題組前期已證實短柱八角干皮部位具有較好的抗炎活性[7-9], 可用于關節(jié)炎的治療, 具備一定開發(fā)前景; 本實驗進一步對其中二萜類成分進行分離, 并對其抗炎作用進行研究, 旨在闡明其相關活性物質(zhì)。

    1 材料

    安捷倫6540 型四級桿串聯(lián)飛行質(zhì)譜儀(美國安捷倫公司); AVANCE Ⅲ600 MHz 核磁共振儀(德國布魯克公司); WFH-201B 暗箱式紫外分析儀(上海馳唐實業(yè)有限公司)。 S03230G-A 反相填料(加拿大Silicycle 公司); Sephadex LH-20 (美國通用公司); DMEM 培養(yǎng)基和胎牛血清(美國Gibico公司); RP-18F254硅膠板(德國默克公司); GF254薄層硅膠(青島裕寶精細化工有限公司); 布洛芬(珠海嘉億生物科技有限公司)。 HEK293/NF-κBluc 細胞(上海哈靈生物科技有限公司)。 所用試劑均為分析純。

    短柱八角干皮由上海中醫(yī)藥大學孫連娜副教授2011 年10 月在廣西省金秀縣采集并鑒定為正品,其標本(編號IB1110) 保存在上海中醫(yī)藥大學中藥炮制教研室。

    2 提取分離

    短柱八角干燥干皮(10 kg) 按照常規(guī)提取與萃取流程分別得到石油醚、 乙酸乙酯、 正丁醇、 水部位[6]。 取石油醚部位300 g, 采用石油醚與乙酸乙酯混合體系進行溶解, 揮干溶劑后, 進行硅膠柱層析, 以不同比例的石油醚-乙酸乙酯(50 ∶1 ~1 ∶1) 及純乙酸乙酯進行梯度洗脫, TLC 檢測合并的6 個餾分(P1~P6)。 P1 (18.9 g) 經(jīng)硅膠柱層析, 石油醚-乙酸乙酯(30 ∶1 ~15 ∶1) 梯度洗脫, TLC 檢測合并得到4 個部位P1.1 ~P1.4,P1.2 (2.1 g) 經(jīng)ODS 柱層析, 水-甲醇(2 ∶8)洗脫, 得化合物1 (15 mg); P1.2 (5.8 g) 經(jīng)硅膠柱層析, 石油醚-丙酮(10 ∶1 ~2 ∶1) 梯度洗脫, 得 化 合 物2 (11 mg)、 3 (12.7 mg)。 P2(15.3 g) 經(jīng)硅膠柱層析, 石油醚-丙酮(20 ∶1 ~7 ∶1) 梯度洗脫, TLC 檢測合并得到3 個部位P2.1~P2.3, P2.2 (5.8 g) 經(jīng)Sephadex LH-20 柱層析, 二氯甲烷-甲醇(1 ∶1) 洗脫, 得化合物4(27 mg)、 5 (26 mg); P2.3 (6.8 g) 經(jīng)硅膠柱層析, 石油醚-丙酮 (3 ∶ 1) 洗脫, 得化合物6(23 mg)。 P3 (23.8 g) 經(jīng)硅膠柱層析, 石油醚-乙酸乙酯(10 ∶1 ~1 ∶1) 梯度洗脫, TLC 檢測合并得到5 個部位P3.1 ~P3.5, P3.2 (2.1 g) 經(jīng)ODS柱層析, 水-甲醇 (4 ∶ 6) 洗脫, 得化合物7(15 mg); P3.3 (2.8 g) 經(jīng)硅膠柱層析, 石油醚-丙酮(2 ∶1) 洗脫, 得化合物8 (26 mg); P3.4(1.7 g) 經(jīng)硅膠柱層析, 二氯甲烷-甲醇(3 ∶1)洗脫, 得化合物9 (15 mg)。

    3 結構鑒定

    化合物1: 白色粉末, ESI-MS m/z: 215 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ: 5.81 (1H,dd, J =10.6, 17.6 Hz, H-15), 5.32 (1H, dd, J =1.2, 5.4 Hz, H-7), 4.92 (1H, dd, J =1.2, 17.6 Hz, H-16a), 4.86 (1H, dd, J =1.2, 10.6 Hz, H-16b), 1.21 (3H, s, H-17), 0.91 (3H, s, H-19),0.9 (3H,s,H-20);13C-NMR (150 MHz,CDCl3) δ:38.9 (C-1), 18.0 (C-2), 36.9 (C-3), 46.5 (C-4), 45.1 (C-5),25.3 (C-6),121.1 (C-7),135.8(C-8), 52.2 (C-9), 35.1 (C-10), 20.1 (C-11),36.8 (C-12), 37.1 (C-13), 47.1 (C-14), 150.4(C-15), 109.4 (C-16), 21.6 (C-17), 185.7 (C-18),17.2 (C-19),15.4 (C-20)。 以上數(shù)據(jù)與文獻[10] 基本一致, 故鑒定為異海松酸。

    化合物2: 白色無定形粉末, ESI-MS m/z:301.4 [M +H]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ:7.27 (1H, d, J =8.2 Hz, H-11), 7.12 (1H, dd,J =8.2, 2.0 Hz, H-12), 7.00 (1H, d, J =2.0 Hz,H-14), 3.05 (1H, t, J =17.2 Hz, H-7α), 2.99(1H, t, J =17.2 Hz, H-7β), 2.93 (1H, m, H-15), 1.62 (1H, dd, J =12.8, 3.8 Hz, H-1α),2.42 (1H, m, H-1β), 1.68 (1H, d, J =12.6 Hz,H-5), 1.93 (1H, m, H-6β), 1.83 (1H, m, H-2β), 1.20 (1H, m, H-3α), 2.36 (1H, m, H-3β), 1.75 (1H, m, H-2α), 1.67 (1H, m, H-6α), 1.40 (3H, s, H-18),1.34 (3H, brs, H-16),1.33 (3H, brs, H-17), 1.23 (3H, s, H-20);13CNMR (150 MHz, CDCl3) δ: 37.9 (C-1), 18.5 (C-2), 36.7 (C-3), 47.5 (C-4), 54.5 (C-5), 21.7(C-6), 29.9 (C-7), 134.6 (C-8), 146.7 (C-9),36.8 (C-10),124.0 (C-11),123.8 (C-12),145.6(C-13), 126.8 (C-14), 33.4 (C-15), 24.0 (C-16), 24.0 (C-17), 185.7 (C-18), 16.1 (C-19),25.0 (C-20)。 以上數(shù)據(jù)與文獻[11] 基本一致,故鑒定為脫氫樅酸。

    化合物3: 白色細針晶(丙酮), ESI-MS m/z:337 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ: 3.32(1H, d, J =5.6 Hz, 3-OH), 3.31 (1H, s, 16-OH),3.13 (1H, t, J =11.2 Hz, H-3),1.86 (2H,m, H-2), 1.62 (2H, m, H-15), 1.74 (1H, m,H-13), 1.23 (3H, s, H-17), 1.07 (3H, s, H -20), 0.91 (3H, s, H -18), 0.73 (3H, s, H-19);13C-NMR (150 MHz, CDCl3) δ: 38.6 (C-1),27.6 (C-2), 76.2 (C-3), 38.4 (C-4), 57.8 (C-5), 19.2 (C-6), 42.4 (C-7), 38.6 (C-8), 55.1(C-9), 44.4 (C-10), 18.4 (C-11), 26.6 (C-12),47.4 (C-13), 38.6 (C -14), 57.8 (C-15), 77.8(C-16), 32.2 (C-17), 28.1 (C-18), 17.4 (C-19), 15.7 (C -20)。 以上數(shù)據(jù)與文獻[12] 基本一致, 故鑒定為3, 16α-二羥基-貝殼杉烷。

    化合物4: 白色無定型粉末, ESI-MS m/z:299.2 [M +H]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ:7.26 (1H, dd, J =8.4, 1.9 Hz, H-12), 7.21(1H, d, J =8.4 Hz, H-11), 7.14 (1H, s, H-14),5.33 (1H, s, H-16a),5.05 (1H, s, H-16b),2.94(1H, dd, J =16.8, 4.6 Hz, H-7a), 2.83 (1H, m,H-7b), 2.27 (1H, m, H-1b), 2.24 (1H, dd, J =13.6, 6.2 Hz, H-6a), 2.22 (1H, m, H-3b), 2.15(1H, m, H-6b), 2.13 (3H, s, H-17), 1.98 (1H,m, H-2b), 1.58 (1H, m, H-2a), 1.52 (1H, m,H-5), 1.47 (1H, m, H-1a),1.30 (3H, s, H-18),1.24 (3H, s, H-20), 1.12 (1H, m, H-3a);13CNMR (150 MHz, CDCl3) δ: 38.3 (C-1), 17.6 (C-2), 40.8 (C-3), 50.1 (C-4), 46.1 (C-5), 19.9(C-6), 19.8 (C-7), 128.8 (C-8), 139.1 (C-9),40.3 (C-10),119.3 (C-11),123.2 (C-12),138.4(C-13), 126.2 (C-14), 148.8 (C-15), 111.0 (C-16), 21.1 (C-17), 25.1 (C-18), 185.3 (C-19),16.4 (C-20)。 以上數(shù)據(jù)與文獻[13] 基本一致,故鑒定為8, 11, 13, 15-abietatetraen-19-oic acid。

    化合物5: 白色無定形粉末, ESI-MS m/z:315.14 [M +H]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ:7.70 (1H, dd, J =8.4,1.8 Hz, H-12),7.64 (1H,d, J =1.8 Hz, H-14),7.34 (1H, d, J =8.4 Hz, H-11), 3.68 (3H, s, H-OCH3), 2.56 (3H, s, H-17), 2.96 (2H, m, H-7), 2.34 (1H, t, J =12.0,3.0 Hz, H-1β), 2.23 (2H, dd, J =12.6, 3.0 Hz,H-5), 1.86 (1H, m, H-6β),1.78 (2H, m, H-2),1.71 (2H, m, H-3), 1.56 (1H, m, H-6α), 1.50(1H, m, H-1α), 1.29 (3H, s, H-19), 1.22 (3H,s, H-20);13C-NMR (150 MHz, CDCl3) δ: 18.47(C-2), 36.6 (C-3), 47.7 (C-4), 44.5 (C-5),21.4 (C-6), 29.9 (C-7), 135.5 (C-8), 154.95(C-9), 37.8 (C-10), 124.6 (C-11), 125.9 (C-12),134.6 (C-13),129.4 (C-14),198.1 (C-15),29.7 (C-16), 26.55 (C-17), 178.9 (C-18), 16.5(C-19), 24.8 (C-20), 52.0 (C-OCH3)。 以上數(shù)據(jù)與文獻[14] 基本一致, 故鑒定為methyl-16-nor-15-oxodehydroabietate。

    化合物6: 無色油狀物, ESI-MS m/z: 317.2[M +H]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ: 6.84(1H, s, H-14), 6.63 (1H, s, H-11), 3.13 (1H,m, H-15), 2.83 (2H, m, H-7), 2.23 (1H, d, J =1.8 Hz, H-5), 1.56 (1H, dd, J =12.8, 3.8 Hz,H-1α), 2.19 (1H, m, H-1β), 1.84 (2H, m, H-3), 1.83 (2H, m, H-6), 1.53 (2H, m, H-2),1.28 (3H, s, H-19), 1.24 (3H, d, J =6.6 Hz, H-16), 1.23 (3H, d, J =6.6 Hz, H-17), 1.20 (3H,s, H-20);13C-NMR (150 MHz, CDCl3) δ: 36.8 (C-1), 18.5 (C-2), 36.7 (C-3), 47.4 (C-4), 44.5(C-5), 21.8 (C-6), 29.2 (C-7), 127.0 (C-8),147.7 (C-9), 37.8 (C-10), 110.8 (C-11), 150.6(C-12), 131.8 (C-13), 126.7 (C-14), 26.7 (C-15), 22.5 (C-16), 22.7 (C-17), 185.1 (C-18),16.2 (C-19), 24.9 (C-20)。 以 上數(shù)據(jù)與文獻[15] 基本一致, 故鑒定為12-羥基-脫氫樅酸。

    化合物7: 白色晶體(甲醇), ESI-MS m/z:317.1 [M +H]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ:4.86 (1H, d, J =1.6 Hz, H-16α), 4.84 (1H, d,J =1.6 Hz, H-16β), 4.72 (1H, d, J =1.6 Hz, H-18α), 4.68 (1H, d, J =1.6 Hz, H-18β), 1.08(3H, s, H-19), 1.38 (3H, s, H-20),1.74 (3H,s, H-17);13C-NMR (150 MHz, CDCl3) δ:25.8 (C-1), 34.6 (C-2), 173.4 (C-3), 149.6 (C-4),41.6 (C-5), 17.6 (C-6), 24.3 (C-7), 129.4 (C-8), 128.9 (C-9), 41.4 (C-10), 40.7 (C-11),38.2 (C-12), 44.6 (C-13), 34.7 (C-14), 145.4(C-15), 112.8 (C-16), 28.3 (C-17), 103.1 (C-18), 15.8 (C-19),17.8 (C-20),50.1 (C-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[12] 基本一致, 故鑒定為3, 4-開環(huán)海松烷-4, 8 (9), 15 (18) -三烯-3-酸甲酯。

    化合 物8: ESI-MS m/z: 331 [M +H]+。1HNMR (600 MHz, CDCl3) δ: 7.27 (1H, d, J =8.2 Hz, H-11), 7.21 (1H, dd, J =8.2, 2.0 Hz, H-12), 7.15 (1H, d, J =2.0 Hz, H-14), 3.66 (3H,s, H-OCH3), 2.91 (1H, t, J =17.2 Hz, H-7b),2.89 (1H, m, H-15), 2.32 (1H, m, H-1β), 2.30(1H, dd, J =12.6, 2.2 Hz, H-5), 2.24 (1H, m,H-6β), 2.22 (1H, m, H-2β), 1.78 (1H, m, H-3α), 1.66 (1H, m, H-2α), 1.70 (1H, m, H-3α), 1.67 (1H, m, H-6α), 1.55 (6H, s, H-16/17), 1.49 (1H, m, H-1α), 1.29 (3H, s, H-19),1.21 (3H, s, H-20);13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ:38.0 (C-1),18.6 (C-2),36.7 (C-3),47.7 (C-4), 44.9 (C-5), 21.7 (C-6), 30.2 (C-7), 134.7(C-8), 147.9 (C-9), 37.0 (C-10), 124.2 (C-11),122.1 (C-12),146.2 (C-13),124.9 (C-14),72.3 (C-15), 31.7 (C-16), 31.7 (C-17), 179.2(C-18), 25.1 (C-19), 16.6 (C-20), 52.0 (COCH3)。 以上數(shù)據(jù)與文獻[16] 基本一致, 故鑒定為15-羥基取代松香烷甲酯。

    化合物9: 白色無定型粉末, ESI-MS m/z:335.2 [M +H]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ:6.13 (1H, t, J =1.8 Hz, H-14), 1.28 (3H, s, H-19), 1.07 (3H, s, H-20), 0.97 (3H, d, J =4.2 Hz, H-17), 0.96 (3H, d, J =4.2 Hz, H-16);13CNMR (150 MHz, CDCl3) δ: 33.6 (C-1), 17.7 (C-2), 37.5 (C-3), 47.2 (C-4), 40.3 (C-5), 20.7(C-6), 27.5 (C-7), 143.9 (C-8), 82.3 (C-9),38.6 (C-10), 23.7 (C-11), 25.3 (C-12), 79.8(C-13), 127.2 (C-14), 32.3 (C-15), 17.6 (C-16), 17.3 (C-17), 183.9 (C-18), 17.7 (C-19),17.9 (C-20)。 以上數(shù)據(jù)與文獻[17] 基本一致,故鑒定為9β, 13β-endoperoxide-abieta-8 (14) -en-18-oic acid。

    4 抗炎活性檢測

    293-NF-κB-luc 細胞轉(zhuǎn)至48 孔板(1×104/孔),采用含10% FBS 的DMEM 完全培養(yǎng)液培養(yǎng)24 h,然后將細胞分為空白組(含10%FBS 的DMEM 完全培養(yǎng)液)、 正常組(含10%FBS 的DMEM 完全培養(yǎng)液培養(yǎng)的293-NF-κB-luc 細胞)、 模型組(1 μg/mL LPS 刺激48 h, 含10%FBS 的DMEM 完全培養(yǎng)液培養(yǎng)的293-NF-κB-luc 細胞)、 給藥組(含有藥物、10%FBS 的DMEM 正常 培 養(yǎng)的293-NF-κB-luc 細胞, 同時加LPS 刺激48 h)、 陽性藥組 (含有10 μg/mL布洛芬、 10% FBS 的DMEM 正常培養(yǎng)的293-NF-κB-luc 細胞, 同時加LPS 刺激48 h)。

    將化合物4 ~6、 8 配制成3 mg/mL 溶液[6],PBS 稀釋成10 μg/mL, MTT 法檢測發(fā)現(xiàn)上述化合物在10 μg/mL 時不影響細胞的正常生長, 因此后續(xù)均采用該質(zhì)量濃度考察抗炎活性。 將10 μg/mL化合物與細胞共同孵育 4 h 后, 加入 LPS(1 μg/mL) 再培養(yǎng)48 h, 檢測細胞上清液的熒光強度。

    實驗過程中, 化合物1 ~5、 7、 9 質(zhì)量較少,在保證為后期實驗存有對照品的基礎上, 課題組只對化合物4 ~6、 8 進行了抗炎活性檢測。結果表明, 三者均能降低LPS 誘導293-NF-κB-luc 的熒光強度, 其中5、 8 活性優(yōu)于陽性藥, 見表1。

    表1 各化合物抗炎活性(±s, n=3)Tab.1 Anti-inflammatory activities of various compounds(±s, n=3)

    表1 各化合物抗炎活性(±s, n=3)Tab.1 Anti-inflammatory activities of various compounds(±s, n=3)

    注:與正常組比較,##P<0.01;與模型組比較,??P<0.01

    組別 熒光強度正常組 356.66±9.01模型組 2 946.00±44.23#?;衔? 組 1 522.33±74.11??化合物5 組 894.67±18.88??化合物6 組 1 508.33±54.54??化合物8 組 575.67±24.79??陽性藥組 1 338.33±35.53??

    5 討論與結論

    本實驗從短柱八角中分得9 個二萜化合物, 其中化合物1、 7 為海松酸型二萜, 化合物3 為貝殼杉烷型二萜, 2、 4 ~6、 8 ~9 為松香烷二萜, 均為首次從該植物中分離得到, 其中3、 7 為首次從八角屬植物中分離得到。 藥理實驗顯示, 化合4 ~6、8 均具有較強的NF-κB 抑制活性, 表明松香烷二萜可能是短柱八角抗炎活性的代表成分, 可為其深入研究提供依據(jù)。

    猜你喜歡
    二萜柱層析石油醚
    益母草中的1個新二萜苷
    中草藥(2022年1期)2022-01-13 03:11:56
    結構改造制備抗菌和抗腫瘤的姜科二萜衍生物
    錦燈籠宿萼與果實的石油醚部位化學成分及抗氧化活性比較①
    泥炭組成成分的GC-MS分析
    補腎活血湯石油醚提取物對BMSCs遷移過程中Wnt5a/PKC通路的影響
    中成藥(2017年12期)2018-01-19 02:06:26
    柱層析用硅膠對羌活中主要成分的影響
    中成藥(2017年10期)2017-11-16 00:50:15
    厚樸酚中壓硅膠柱層析純化工藝的優(yōu)化
    中成藥(2017年4期)2017-05-17 06:09:46
    煙草石油醚含量研究
    光敏氧化制備抗癌及保肝的二萜衍生物
    北極真菌Eutypellasp.D-1中海松烷二萜類化合物的研究
    国产成人免费观看mmmm| 国产成人精品婷婷| 在线天堂中文资源库| a级片在线免费高清观看视频| 亚洲图色成人| 国产精品久久久久久久久免| 丰满少妇做爰视频| 久久韩国三级中文字幕| 亚洲av.av天堂| 男女啪啪激烈高潮av片| 午夜福利网站1000一区二区三区| 国产伦理片在线播放av一区| 午夜福利视频在线观看免费| 三上悠亚av全集在线观看| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 亚洲综合色网址| 日韩伦理黄色片| 日本wwww免费看| 五月伊人婷婷丁香| 婷婷色综合大香蕉| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲成人av在线免费| av在线老鸭窝| 丰满饥渴人妻一区二区三| 国产精品国产三级国产专区5o| 丰满少妇做爰视频| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 国产成人a∨麻豆精品| 91在线精品国自产拍蜜月| 久久ye,这里只有精品| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 男女下面插进去视频免费观看| 国产午夜精品一二区理论片| 午夜精品国产一区二区电影| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 国产精品99久久99久久久不卡 | 一级毛片 在线播放| 这个男人来自地球电影免费观看 | 欧美成人午夜免费资源| 在线 av 中文字幕| 亚洲精品久久午夜乱码| 国产av国产精品国产| 免费av中文字幕在线| 日韩中文字幕视频在线看片| av片东京热男人的天堂| 少妇人妻 视频| 精品国产乱码久久久久久小说| 久久99一区二区三区| 亚洲av电影在线进入| 国产成人精品无人区| 国产熟女欧美一区二区| 黄色配什么色好看| 精品人妻在线不人妻| 精品人妻一区二区三区麻豆| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产片内射在线| av在线观看视频网站免费| 成人免费观看视频高清| 欧美+日韩+精品| 一区二区日韩欧美中文字幕| 熟妇人妻不卡中文字幕| 激情视频va一区二区三区| 午夜激情av网站| 亚洲欧美一区二区三区久久| 丝袜美足系列| 毛片一级片免费看久久久久| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 国产麻豆69| 美女国产视频在线观看| 国产成人91sexporn| av片东京热男人的天堂| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 天堂中文最新版在线下载| 黄色一级大片看看| 日韩一区二区视频免费看| 高清在线视频一区二区三区| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 亚洲精品第二区| 99热全是精品| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 久久这里有精品视频免费| 18禁动态无遮挡网站| 秋霞在线观看毛片| 99九九在线精品视频| 欧美精品国产亚洲| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 十八禁高潮呻吟视频| 亚洲精品国产av蜜桃| 婷婷成人精品国产| 欧美成人午夜精品| 美女视频免费永久观看网站| 另类精品久久| 在线观看www视频免费| 欧美成人精品欧美一级黄| 欧美成人午夜精品| 在线观看www视频免费| 2021少妇久久久久久久久久久| 亚洲成人手机| 9191精品国产免费久久| 丝袜脚勾引网站| 九色亚洲精品在线播放| 日韩免费高清中文字幕av| 人妻人人澡人人爽人人| 国产精品久久久久久av不卡| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产综合精华液| 在线观看美女被高潮喷水网站| 黑人欧美特级aaaaaa片| 久久久久久久久免费视频了| 久久久久久久久免费视频了| 夫妻午夜视频| 免费av中文字幕在线| 欧美少妇被猛烈插入视频| 男女边吃奶边做爰视频| 各种免费的搞黄视频| 丰满迷人的少妇在线观看| av国产久精品久网站免费入址| 激情视频va一区二区三区| 精品人妻在线不人妻| 亚洲av欧美aⅴ国产| 国产97色在线日韩免费| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| av女优亚洲男人天堂| 欧美av亚洲av综合av国产av | 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲第一av免费看| 久久精品国产亚洲av涩爱| 黄色一级大片看看| 日韩一本色道免费dvd| 成年女人毛片免费观看观看9 | 伦理电影大哥的女人| 国产午夜精品一二区理论片| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 日韩中字成人| 一本色道久久久久久精品综合| 青春草亚洲视频在线观看| 丰满乱子伦码专区| 亚洲色图综合在线观看| 一区二区三区乱码不卡18| 下体分泌物呈黄色| 免费黄频网站在线观看国产| 亚洲第一av免费看| 亚洲人成网站在线观看播放| 18禁国产床啪视频网站| 成人毛片a级毛片在线播放| 性少妇av在线| 人人澡人人妻人| 亚洲精品av麻豆狂野| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产在视频线精品| 九色亚洲精品在线播放| 18禁动态无遮挡网站| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| tube8黄色片| 免费少妇av软件| 久久久欧美国产精品| 精品一区二区三卡| 宅男免费午夜| 精品少妇黑人巨大在线播放| 女性生殖器流出的白浆| 久久久久久久久久人人人人人人| 在线天堂中文资源库| 成人免费观看视频高清| 国产成人精品久久久久久| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 国产精品偷伦视频观看了| 亚洲美女视频黄频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 色婷婷久久久亚洲欧美| 水蜜桃什么品种好| av在线老鸭窝| 日韩一区二区三区影片| 久久久久久人人人人人| 尾随美女入室| 人成视频在线观看免费观看| 国产精品av久久久久免费| 26uuu在线亚洲综合色| 国产精品一区二区在线观看99| 18禁国产床啪视频网站| 女人久久www免费人成看片| 寂寞人妻少妇视频99o| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 99久久中文字幕三级久久日本| av网站在线播放免费| 人人澡人人妻人| 国产免费一区二区三区四区乱码| 曰老女人黄片| 高清在线视频一区二区三区| 高清视频免费观看一区二区| 成年美女黄网站色视频大全免费| 精品福利永久在线观看| 欧美日韩精品成人综合77777| 久久久精品94久久精品| 校园人妻丝袜中文字幕| 又大又黄又爽视频免费| 国产一区二区 视频在线| 丝袜脚勾引网站| h视频一区二区三区| 亚洲av日韩在线播放| 亚洲国产欧美在线一区| 制服人妻中文乱码| 丰满少妇做爰视频| 国产精品蜜桃在线观看| h视频一区二区三区| 日本-黄色视频高清免费观看| 91国产中文字幕| 国产精品欧美亚洲77777| 看免费av毛片| 狂野欧美激情性bbbbbb| 秋霞伦理黄片| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产精品偷伦视频观看了| 欧美另类一区| 秋霞在线观看毛片| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产成人精品一,二区| 老汉色av国产亚洲站长工具| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲熟女精品中文字幕| 欧美中文综合在线视频| 女性被躁到高潮视频| videos熟女内射| 久久久久久久久久久免费av| 成人毛片60女人毛片免费| 七月丁香在线播放| 一本久久精品| 免费黄网站久久成人精品| kizo精华| 色94色欧美一区二区| av福利片在线| 搡女人真爽免费视频火全软件| 伊人亚洲综合成人网| 久久这里只有精品19| 国产精品女同一区二区软件| 日韩免费高清中文字幕av| xxxhd国产人妻xxx| 超碰97精品在线观看| 国产午夜精品一二区理论片| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 在线观看三级黄色| 在线 av 中文字幕| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 男女边摸边吃奶| 黄片播放在线免费| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 久久精品久久久久久久性| 老女人水多毛片| 考比视频在线观看| 成人毛片a级毛片在线播放| 桃花免费在线播放| 久久精品久久精品一区二区三区| videossex国产| 亚洲成人一二三区av| 免费大片黄手机在线观看| 哪个播放器可以免费观看大片| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 9191精品国产免费久久| 熟妇人妻不卡中文字幕| 久久久久精品人妻al黑| 在线观看免费日韩欧美大片| www.精华液| 99久国产av精品国产电影| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 在线观看免费日韩欧美大片| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 狂野欧美激情性bbbbbb| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲第一区二区三区不卡| 一区在线观看完整版| 观看美女的网站| 少妇 在线观看| 日韩电影二区| 日本-黄色视频高清免费观看| 久久久久精品久久久久真实原创| 久久久精品94久久精品| 啦啦啦在线免费观看视频4| 久久久精品区二区三区| 日韩精品免费视频一区二区三区| 日本黄色日本黄色录像| 欧美日韩成人在线一区二区| 日韩av免费高清视频| www日本在线高清视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 日韩在线高清观看一区二区三区| 国产免费福利视频在线观看| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产免费视频播放在线视频| 久久久久久免费高清国产稀缺| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 2022亚洲国产成人精品| 国产男女内射视频| 丝袜脚勾引网站| 人妻 亚洲 视频| 久久免费观看电影| www.精华液| 国产 精品1| 国产成人午夜福利电影在线观看| 亚洲人成77777在线视频| av免费观看日本| 久久久久人妻精品一区果冻| 少妇熟女欧美另类| 久久久久久久亚洲中文字幕| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 成人黄色视频免费在线看| 高清不卡的av网站| 久久久久久人人人人人| 深夜精品福利| 只有这里有精品99| 男女边吃奶边做爰视频| 五月天丁香电影| 国产精品国产av在线观看| 久久99蜜桃精品久久| av天堂久久9| 亚洲精品在线美女| 亚洲中文av在线| av又黄又爽大尺度在线免费看| 日韩欧美精品免费久久| tube8黄色片| 亚洲精品自拍成人| 性少妇av在线| 国产成人免费无遮挡视频| 三级国产精品片| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 久热久热在线精品观看| 亚洲在久久综合| 波多野结衣一区麻豆| 我的亚洲天堂| 18禁观看日本| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产激情久久老熟女| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 精品一区二区三卡| 天天操日日干夜夜撸| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 另类精品久久| videosex国产| 亚洲av福利一区| 人妻系列 视频| 日韩在线高清观看一区二区三区| 两性夫妻黄色片| 午夜福利视频精品| 久久久a久久爽久久v久久| 亚洲欧美精品自产自拍| 欧美精品国产亚洲| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 高清视频免费观看一区二区| 观看av在线不卡| 国产1区2区3区精品| 欧美成人午夜免费资源| 国产精品.久久久| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 国产免费福利视频在线观看| 只有这里有精品99| 伦理电影免费视频| 久久精品久久久久久久性| 18禁动态无遮挡网站| 国产免费福利视频在线观看| 亚洲 欧美一区二区三区| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 在线观看免费日韩欧美大片| 一本大道久久a久久精品| 国产不卡av网站在线观看| 美女主播在线视频| 午夜激情av网站| 久久国产精品大桥未久av| 久久ye,这里只有精品| 在线观看一区二区三区激情| 中文欧美无线码| 色播在线永久视频| 男人添女人高潮全过程视频| 久久精品国产自在天天线| 国产 精品1| 久久鲁丝午夜福利片| 七月丁香在线播放| 性色av一级| 久久精品国产亚洲av高清一级| 黄片播放在线免费| 91成人精品电影| 国产精品偷伦视频观看了| 最近手机中文字幕大全| 久久久a久久爽久久v久久| 国产淫语在线视频| av福利片在线| 久久韩国三级中文字幕| 纯流量卡能插随身wifi吗| 国产成人精品久久二区二区91 | 大香蕉久久成人网| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产欧美亚洲国产| 制服人妻中文乱码| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 国产精品成人在线| 777久久人妻少妇嫩草av网站| videosex国产| xxxhd国产人妻xxx| 赤兔流量卡办理| 少妇的丰满在线观看| 欧美成人精品欧美一级黄| 天天操日日干夜夜撸| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国产毛片在线视频| 国产精品欧美亚洲77777| 男女下面插进去视频免费观看| 国产高清国产精品国产三级| 如何舔出高潮| 亚洲精品视频女| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲在久久综合| 成人毛片60女人毛片免费| 午夜免费鲁丝| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 男女高潮啪啪啪动态图| 极品少妇高潮喷水抽搐| 免费观看a级毛片全部| 热99国产精品久久久久久7| 国产一区二区激情短视频 | 91在线精品国自产拍蜜月| 天天影视国产精品| 最黄视频免费看| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 99久久人妻综合| 免费人妻精品一区二区三区视频| av电影中文网址| 黄色一级大片看看| 一级毛片电影观看| 在线观看一区二区三区激情| av福利片在线| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲av中文av极速乱| 国产 精品1| 亚洲精品,欧美精品| 国产一级毛片在线| 久久这里只有精品19| 一级爰片在线观看| 男女高潮啪啪啪动态图| www.av在线官网国产| 午夜福利视频精品| 久久99一区二区三区| 少妇熟女欧美另类| 69精品国产乱码久久久| 十八禁高潮呻吟视频| 国产男人的电影天堂91| 国产午夜精品一二区理论片| 国产成人av激情在线播放| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 99九九在线精品视频| av线在线观看网站| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 99久久人妻综合| 国产97色在线日韩免费| 成人午夜精彩视频在线观看| 制服人妻中文乱码| 色94色欧美一区二区| 欧美国产精品va在线观看不卡| 欧美xxⅹ黑人| 一区二区三区激情视频| 亚洲国产av新网站| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 99久久人妻综合| 七月丁香在线播放| 少妇被粗大的猛进出69影院| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 深夜精品福利| 美国免费a级毛片| 交换朋友夫妻互换小说| 性色av一级| 精品久久久久久电影网| 人妻 亚洲 视频| 亚洲 欧美一区二区三区| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 老司机亚洲免费影院| freevideosex欧美| www.自偷自拍.com| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 久久这里有精品视频免费| 国产精品 欧美亚洲| 精品少妇黑人巨大在线播放| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产福利在线免费观看视频| 婷婷成人精品国产| 久久久久视频综合| 亚洲男人天堂网一区| 久久精品国产综合久久久| a级毛片在线看网站| 国产精品久久久久久久久免| 欧美激情极品国产一区二区三区| av国产久精品久网站免费入址| 香蕉丝袜av| 国产精品免费视频内射| 亚洲av成人精品一二三区| 国产免费又黄又爽又色| 国产精品欧美亚洲77777| 热99久久久久精品小说推荐| 嫩草影院入口| 麻豆av在线久日| 久久久久久人妻| 一边亲一边摸免费视频| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 最近中文字幕高清免费大全6| 亚洲精品美女久久av网站| 人妻人人澡人人爽人人| 伊人亚洲综合成人网| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 制服丝袜香蕉在线| 天堂俺去俺来也www色官网| 亚洲国产av新网站| 久久久欧美国产精品| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产精品蜜桃在线观看| 日韩av免费高清视频| 91精品三级在线观看| 最近手机中文字幕大全| 最新的欧美精品一区二区| 久久精品国产a三级三级三级| 久久久国产一区二区| 亚洲精品美女久久av网站| 国产精品熟女久久久久浪| 大香蕉久久成人网| 少妇精品久久久久久久| 久久综合国产亚洲精品| 免费高清在线观看日韩| 久久久久国产精品人妻一区二区| 69精品国产乱码久久久| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产精品二区激情视频| 中文字幕精品免费在线观看视频| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 欧美日韩一级在线毛片| 久久狼人影院| av在线播放精品| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 美女国产高潮福利片在线看| 哪个播放器可以免费观看大片| 国产亚洲精品第一综合不卡| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 美女高潮到喷水免费观看| 97人妻天天添夜夜摸| av免费观看日本| 久热久热在线精品观看| 搡女人真爽免费视频火全软件| 老熟女久久久| 久久久久久伊人网av| 飞空精品影院首页| 观看av在线不卡| 男女午夜视频在线观看| 国产男人的电影天堂91| 国产色婷婷99| 在线观看三级黄色| 一区二区日韩欧美中文字幕| 两个人看的免费小视频| 亚洲在久久综合| 亚洲精品久久午夜乱码| 国产欧美亚洲国产| 精品少妇内射三级| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 免费观看性生交大片5| 成人免费观看视频高清| 亚洲欧美清纯卡通| 色网站视频免费| 老司机影院成人| 寂寞人妻少妇视频99o| 日本欧美国产在线视频| 国产成人精品久久久久久| 亚洲精品日本国产第一区| 日韩av不卡免费在线播放| 99热全是精品| 亚洲美女黄色视频免费看| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产精品无大码| 黄色 视频免费看| 桃花免费在线播放| 久热这里只有精品99| 色视频在线一区二区三区| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 一区二区三区乱码不卡18| av网站免费在线观看视频| 韩国高清视频一区二区三区| 人人妻人人澡人人看| 国产精品久久久av美女十八| 国产高清国产精品国产三级| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 男人舔女人的私密视频| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 香蕉丝袜av| 999久久久国产精品视频| 青春草亚洲视频在线观看| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 性色av一级| 午夜久久久在线观看| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 人妻系列 视频| 亚洲精品乱久久久久久| 亚洲中文av在线| 激情视频va一区二区三区| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 成人免费观看视频高清| 国产精品一二三区在线看| av又黄又爽大尺度在线免费看| 黄色配什么色好看|