云浮地區(qū)1 927名婦女HPV感染狀況及基因分型情況分析

江炎章 溫日葵 歐雅文

宮頸癌目前已成為威脅全世界女性健康的第二大惡性腫瘤，宮頸癌的發(fā)生發(fā)展與人乳頭瘤病毒(HPV)感染密切相關(guān)[1]。隨著人們健康意識(shí)的提高，HPV的檢測(cè)越來(lái)越受到臨床醫(yī)生的重視和女性的關(guān)注。由于人們生活方式的改變，宮頸癌的發(fā)病率有逐年升高的趨勢(shì)[2]。根據(jù)相關(guān)調(diào)查資料顯示，HPV 感染具有明顯的地域性,不同國(guó)家或地區(qū)HPV的感染率及型別分布均存在差異[3]。全面掌握地區(qū)女性宮頸 HPV 感染的相關(guān)危險(xiǎn)因素，對(duì)于 HPV 感染與宮頸癌病變的早期防治有著十分重要的意義[4]。本研究對(duì)云浮地區(qū)女性人群中HPV感染狀況及基因分型情況進(jìn)行調(diào)查分析，旨在發(fā)現(xiàn)本地區(qū)女性HPV感染率和感染的主要HPV基因型的分布及其流行病學(xué)特征，可為本地區(qū)宮頸癌的防治提供科學(xué)的依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析我院在2016年11月—2018年7月進(jìn)行宮頸癌篩查的女性1 927例，所有就診者均自愿進(jìn)行HPV-DNA檢測(cè)。

1.2 方法

1.2.1 采樣方法 用亞能生物技術(shù)(深圳)有限公司生產(chǎn)的宮頸脫落細(xì)胞采集器(宮頸刷)進(jìn)行采樣。取出宮頸刷置于宮頸口，單方向旋轉(zhuǎn)4～5周以獲得足量的上皮細(xì)胞標(biāo)本，然后將宮頸刷頭部放入細(xì)胞保存液管中，沿刷柄折痕處將宮頸刷柄折斷，旋緊管蓋，做好標(biāo)本標(biāo)識(shí)。

1.2.2 標(biāo)本保存 標(biāo)本一經(jīng)采集，應(yīng)盡快送檢；標(biāo)本室溫保存不超過(guò)12 h，2～8℃保存不超過(guò)7 d，-20℃以下保存不超過(guò)3個(gè)月。避免反復(fù)凍融。

1.2.3 主要儀器 亞能YN-H16分子雜交儀。

1.2.4 試劑 使用亞能生物技術(shù)(深圳)有限公司生產(chǎn)的人乳頭瘤病毒基因分型(23型)檢測(cè)試劑盒。

1.2.5 檢測(cè)方法 PCR和DNA反向點(diǎn)雜交法。

1.2.6 實(shí)驗(yàn)原理 利用HPV的基因特點(diǎn)設(shè)計(jì)特異引物，可以擴(kuò)增出23種HPV基因型的目的片段，再將擴(kuò)增產(chǎn)物與固定在膜條上的包括17種高危型和6種低危型在內(nèi)的分型探針進(jìn)行雜交，依據(jù)雜交信號(hào)的有無(wú)來(lái)判斷各HPV基因型的存在。

2 結(jié)果

1 927例女性的HPV-DNA結(jié)果中，檢測(cè)HPV陽(yáng)性的有465例，陽(yáng)性率為24.13%；在感染 HPV 的 465 例女性中，感染高危型 HPV(包括16型、18型、31型、33型、35型、39型、45型、51型、52型、53型、56型、58型、59型、66型、68型、73型、82型) 者有 407 例，感染率為21.12%，占總感染者數(shù)的87.53% ；感染低危型HPV(包括6型、11型、42型、43型、81型、83型)者有 58 例，感染率為3.01%，占總感染者數(shù)的12.47% 。見(jiàn)表1。

表1 1 927例標(biāo)本HPV DNA結(jié)果分析 (n,%)

注：1)多重高危型指含有至少一個(gè)或多個(gè)高危型HPV基因；2)多重低危型指所含基因型全為低危型HPV基因

其中感染單純高危型HPV的主要基因型分別為HPV-58型、18型、56型、68型、66型等，分別占總感染者數(shù)的13.76%、11.40%、6.02%、4.73%、4.52%；感染單純低危型HPV的主要基因型分別為HPV 11型、43型，分別占總感染者數(shù)的4.52%、3.66%。見(jiàn)表2。

表2 361例感染單純型HPV的基因型結(jié)果分析 (n,%)

3 討論

目前大量的研究與實(shí)踐結(jié)果表明，嚴(yán)重危害女性健康的宮頸癌是惟一一種可以經(jīng)過(guò)醫(yī)學(xué)干預(yù)使發(fā)病率和死亡率下降的人類(lèi)惡性腫瘤[5]。感染 HPV基因型在人群中的分布有近130多種亞型，根據(jù)在致宮頸癌的危險(xiǎn)性不同,分為高危型HPV和低危型HPV兩大類(lèi)[6]，而且感染不同HPV-DNA亞型其致病性和后果也有不同[7-8]。研究證實(shí)，高危型 HPV的持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的前提條件[9]。

本研究結(jié)果顯示，云浮地區(qū)1 927名女性體檢檢測(cè) HPV總陽(yáng)性率為24.13%，其中高危型HPV感染率為21.12%，占總感染者數(shù)的87.53% ；低危型HPV感染率為3.01%，占總感染者數(shù)的12.47% 。感染單純高危型HPV的主要基因型分別為HPV58型、18型、56型、68型、66型、59型和31型；感染單純低危型HPV的主要基因型分別為HPV11型、43型；多重高危型感染率為5.29%，占總感染者數(shù)的21.94%，以攜帶高危HPV58型為主。HPV的多重高危型感染比單一高危型感染會(huì)增加宮頸病變的發(fā)展[10]。

由于HPV感染的分布有地域性，現(xiàn)行引入我國(guó)的宮頸癌疫苗不一定完全適合我國(guó)人群[11]。目前我國(guó)引入的宮頸癌疫苗有二價(jià)、四價(jià)和九價(jià)三種，其中二價(jià)疫苗包括HPV-16型和18型；四價(jià)疫苗包括HPV-6型、11型、16型和18型；九價(jià)疫苗包括HPV-6型、11型、16型、18型、31型、33型、45型、52型和58型。由此可見(jiàn)，目前的三類(lèi)宮頸癌疫苗所包含的HPV-DNA類(lèi)型與云浮地區(qū)女性感染的主要HPV-DNA類(lèi)型不完全相符，接種這三類(lèi)宮頸癌疫苗并未能完全很好地預(yù)防和保護(hù)本地區(qū)女性遠(yuǎn)離宮頸癌的危害，希望宮頸癌疫苗的研發(fā)可以向多組合HPV基因型的方向發(fā)展，可以根據(jù)不同地區(qū)女性感染主要HPV基因型進(jìn)行選擇性接種組合疫苗，從而能夠更好地預(yù)防女性宮頸癌的發(fā)生。同時(shí)云浮屬于廣東省的粵西山區(qū)城市，居民經(jīng)濟(jì)收入不高，目前的宮頸癌疫苗價(jià)格相對(duì)比較昂貴，很多家庭都消費(fèi)不起，希望政府能夠在預(yù)防宮頸癌這方面投入更多的財(cái)政補(bǔ)貼，讓更多的女性能夠接種到宮頸癌疫苗，從而更好地預(yù)防宮頸癌的發(fā)生，提高女性的生活質(zhì)量和幸福感。