黃芪多糖對仔豬免疫力以及生長性能的影響

陶艷華 金福源 陸曉健 徐國東

1.江蘇省蘇州市吳江區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所，江蘇蘇州 215200；2.蘇州上方山森林動物世界，江蘇蘇州 215200

黃芪多糖在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的應(yīng)用中具有調(diào)節(jié)免疫 功能的作用，對提高機(jī)體的特異性和非特異性免疫應(yīng)答能力具有積極的意義，其作用機(jī)理主要是通過提高機(jī)體內(nèi)淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率以提高機(jī)體對抗病原的應(yīng)答能力。目前，黃芪多糖已經(jīng)作為一種免疫促進(jìn)劑或免疫調(diào)節(jié)劑在人類的臨床醫(yī)學(xué)中得到了應(yīng)用。隨著近年來我國畜牧業(yè)的快速發(fā)展，專業(yè)人士對豬只免疫功能調(diào)節(jié)的研究也逐漸深入，黃芪多糖在養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用也有了更多的研究，本文主要研究了黃芪多糖的使用對仔豬免疫力以及生長性能的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與試劑

試驗選用杜×長×大三元雜交仔豬，黃芪多糖注射液。

1.2 試驗方法

選擇體重相近的試驗仔豬共40頭，隨機(jī)平均分組，共分為4組，每組10頭，其中1組為對照組，2、3、4組均為試驗組，并對仔豬進(jìn)行空腹稱重。此批仔豬全部在20日齡時斷奶，同時在20日齡時接種豬瘟疫苗，接種劑量為每頭仔豬4頭份。在仔豬20、35日齡時進(jìn)行給藥。其中1組仔豬每頭肌肉注射2 mL生理鹽水，2組仔豬每頭注射2 mL黃芪多糖，3組仔豬每頭注射4 mL黃芪多糖，4組仔豬每頭注射6 mL黃芪多糖。分別在仔豬20、35、50日齡時采集前腔頸動脈血，檢測各項免疫指標(biāo)。

1.3 檢測指標(biāo)

1）外周血嗜中性白細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。對于仔豬外周血嗜中性白細(xì)胞百分?jǐn)?shù)的測定使用硝基藍(lán)四氮唑還原試驗，取仔豬的靜脈血1 mL，并添加抗凝素，取0.1 mL于試管底部，加入等量的硝基藍(lán)四氮唑應(yīng)用液，混合均勻后置于37℃的恒溫箱中25 min，在培育的過程中搖晃1次，隨后再置于室溫下15 min，取出上液滴于玻片，干燥后用甲醇固定，使用姬姆薩染色5 min，沖洗、干燥并用油鏡觀察樣本。若有10%以上的中性多核白細(xì)胞能還原硝基藍(lán)四氮唑，即檢測結(jié)果為陽性，反之則為陰性。

2）豬瘟抗體檢測。將抗凝血離心后取血清，經(jīng)過56℃水浴滅活30 min，使用間接血凝試驗進(jìn)行豬瘟抗體檢測。

3）淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率采用淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗進(jìn)行檢測，具體使用方法為形態(tài)學(xué)檢查法。

4）平均日增重。試驗開始時測試每頭仔豬的空腹體重，計算平均體重。試驗結(jié)束后對每頭仔豬進(jìn)行空腹稱重，計算平均日增重。

2 結(jié)果與分析

2.1 仔豬外周血嗜中性白細(xì)胞百分?jǐn)?shù)的變化

從表1可知，在仔豬35日齡時，所檢測的外周血嗜中性白細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)，3組試驗組的結(jié)果均要高于空白對照。在使用了黃芪多糖的3組試驗組中，3組仔豬的外周血嗜中性白細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)高于2組，低于4組；在仔豬50日齡時，3組試驗組的外周血嗜中性白細(xì)胞百分?jǐn)?shù)均高于對照組，其中4組最為顯著。此外，在仔豬35日齡時試驗組（2組、3組、4組）的嗜中性白細(xì)胞數(shù)量均明顯高于20日齡，但是50日齡時又呈下降的趨勢。

表1 黃芪多糖對仔豬外周血嗜中性白細(xì)胞百分?jǐn)?shù)的影響 %

2.2 仔豬豬瘟抗體水平的變化

由表2可知，在仔豬35日齡和50日齡時，試驗組的豬瘟抗體效價均高于對照組，且差異極顯著。其中在仔豬35日齡時，3組試驗組的檢測結(jié)果差異不顯著；在50日齡時，4組的豬瘟抗體水平顯著高于2組，與3組仔豬的差異不顯著。

表2 黃芪多糖對仔豬豬瘟抗體水平的影響 log2

2.3 仔豬淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的變化

由表3可知，在20日齡時，仔豬外周血淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率各組之間沒有顯著差異；在仔豬35日齡時，4組仔豬的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率極顯著高于對照組，3組的檢測結(jié)果顯著高于對照組，其余各組之間的差異均不顯著；在仔豬50日齡時，3組和4組的檢測結(jié)果顯著高于對照組1組。

表3 黃芪多糖對仔豬淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響 %

2.4 仔豬日增重

由表4可知，添加了黃芪多糖的3組和4組仔豬相比較對照組，平均日增重增加了13.1%、10.6%，2組仔豬相比較對照組，平均日增重增加了2.8%。

表4 黃芪多糖對仔豬日增重的影響 kg

3 討論

3.1 黃芪多糖對仔豬特異性與非特異性免疫功能的影響

嗜中性白細(xì)胞是一種免疫細(xì)胞，能夠吞噬侵入機(jī)體的細(xì)菌、真菌等，參與機(jī)體的非特異性免疫，清除病原體，增強(qiáng)機(jī)體的免疫力。嗜中性白細(xì)胞能夠還原硝基藍(lán)四氮唑，且其還原能力隨著吞噬能力的提升而提高。所以使用硝基藍(lán)四氮唑還原試驗?zāi)軌驒z測嗜中性白細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)，陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)越高說明嗜中性白細(xì)胞的免疫活性越高[1]。在開始試驗時，4組仔豬的外周血嗜中性白細(xì)胞百分?jǐn)?shù)沒有明顯的差別，在仔豬35日齡時，添加了黃芪多糖的試驗組仔豬外周血嗜中性白細(xì)胞百分?jǐn)?shù)高于對照組；對于3組添加了黃芪多糖的試驗組，仔豬外周血嗜中性白細(xì)胞百分?jǐn)?shù)隨黃芪多糖應(yīng)用劑量的增加而增加。由此試驗結(jié)果可知，黃芪多糖能夠增加仔豬機(jī)體內(nèi)嗜中性白細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)。此外，嗜中性白細(xì)胞能夠在有IgG抗體參與的情況下發(fā)揮ADcc作用，激發(fā)機(jī)體的特異性免疫并清除抗原異物，這也說明了黃芪多糖不僅能夠促進(jìn)仔豬機(jī)體的非特異性免疫，還對特異性免疫有一定的促進(jìn)作用。在仔豬35日齡時試驗組（2組、3組、4組）的嗜中性白細(xì)胞數(shù)量均明顯高于20日齡，但是50日齡時又呈下降的趨勢，可能的原因是隨著仔豬的生長，血液中的嗜中性白細(xì)胞通過血液循環(huán)進(jìn)入到機(jī)體的各個組織中，導(dǎo)致外周血中的嗜中性白細(xì)胞數(shù)量有了一定程度的下降。

3.2 黃芪多糖對仔豬體液免疫功能的影響

通過間接血凝試劑盒對仔豬豬瘟抗體水平的檢測能夠分析黃芪多糖對仔豬體液免疫功能的影響。根據(jù)試驗結(jié)果可知，在試驗開始時，各組仔豬的豬瘟抗體水平差異不顯著，在35日齡和50日齡時，添加了黃芪多糖的試驗組仔豬豬瘟抗體水平顯著高于對照組，并且豬瘟抗體水平隨著黃芪多糖添加量的增加而上升，說明黃芪多糖能夠促進(jìn)仔豬的體液免疫功能。

3.3 黃芪多糖對細(xì)胞免疫功能的影響

通過淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗可以研究黃芪多糖對仔豬細(xì)胞免疫功能的影響，T淋巴細(xì)胞在機(jī)體細(xì)胞免疫中起著關(guān)鍵性作用。當(dāng)其受到PHA（植物血凝素）等因素刺激，能夠被激活，轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，當(dāng)機(jī)體被病原侵襲時，淋巴母細(xì)胞能夠轉(zhuǎn)化為致敏T淋巴細(xì)胞，參與到機(jī)體的細(xì)胞免疫中，因此，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率越高說明仔豬的免疫功能越強(qiáng)[2]。通過本試驗可以發(fā)現(xiàn)，在試驗開始時，各組仔豬的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率差異不顯著，在仔豬35日齡和50日齡時，添加了黃芪多糖的試驗組3組和4組的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率顯著高于空白對照組，但是2組仔豬的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率與對照組之間差異不顯著；說明黃芪多糖在一定的應(yīng)用劑量范圍內(nèi)，能夠提高仔豬淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率，進(jìn)而增強(qiáng)仔豬的細(xì)胞免疫功能，提高免疫力。

3.4 黃芪多糖對仔豬生長性能的影響

黃芪多糖對促進(jìn)仔豬營養(yǎng)物質(zhì)的吸收有積極的作用，能夠有效提高日增重，提高飼料利用率。主要是因為黃芪多糖能夠提高仔豬回腸消化率，進(jìn)而達(dá)到促進(jìn)生長發(fā)育的目的。由本次試驗可知，在試驗開始時，各組仔豬的平均體重沒有顯著差異，在試驗結(jié)束后，3組仔豬和4組仔豬的日增重相比較1組和2組仔豬顯著提高。說明一定應(yīng)用量的黃芪多糖能夠提高仔豬的日增重[3]。