楓楊葉提取物抑制金黃色葡萄球菌的機(jī)制研究

邢夢(mèng)雨 夏道宗 田崇梅 張曉熙 郭璐 趙鑫鈺

浙江中醫(yī)藥大學(xué) 杭州 310053

楓楊（Pterocarya stenoptera，P.stenoptera）為胡桃科楓楊屬植物，味辛、溫，有小毒，具有消腫止痛、解熱殺蟲(chóng)的功效，其葉與樹(shù)皮在民間常用作傳統(tǒng)外用中藥，主治濕疹、過(guò)敏性皮炎以及各類真菌性皮膚病和細(xì)菌性膿瘡[1]。研究證實(shí)，楓楊的各部位對(duì)多種細(xì)菌如大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、鏈格孢菌、卡拉雙球菌等均有抑制作用[2-4]。其中，金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，S.aureus） 是一種廣泛存在于自然界中的高致病性常見(jiàn)菌，能夠引起食物中毒、腦膜炎、心內(nèi)膜炎和術(shù)后傷口感染等多種感染性疾病[5-6]。目前關(guān)于楓楊對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌機(jī)制的相關(guān)研究較少，本研究擬以楓楊葉為對(duì)象，采用紙片擴(kuò)散法篩選楓楊葉不同溶劑提取物的抑菌效果，并系統(tǒng)研究抑菌規(guī)律及相關(guān)作用機(jī)制，以期為開(kāi)發(fā)新型安全高效的植物源性抗菌劑以及對(duì)楓楊葉的深入利用與加工提供參考。

1 材料和方法

1.1 菌株 金黃色葡萄球菌菌株（ATCC 25923）由浙江中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院提供，實(shí)驗(yàn)所用為第3代，活化于LB培養(yǎng)基。LB培養(yǎng)基由胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化鈉5g、無(wú)菌雙蒸水1 000mL配制，調(diào)整 pH 為 7.2～7.4。

1.2 藥品和試劑 楓楊葉采摘于錢塘江畔，經(jīng)浙江中醫(yī)藥大學(xué)陳孔榮副教授鑒定為胡桃科楓楊屬植物楓楊的樹(shù)葉。酵母浸膏購(gòu)于廣東環(huán)凱微生物科技有限公司（批號(hào)：3206071）；胰蛋白胨、瓊脂粉均購(gòu)于青島高科園海博生物技術(shù)有限公司（批號(hào)：20180220、20180503）；DL5000DNA Marker 購(gòu) 于TaKaRa公司（批號(hào)：A1901A）；二甲基亞砜（dimethyl sulfoxide,DMSO） 購(gòu)于 BioFroxx公司 (批號(hào)：EZ1609C224)；氨芐青霉素鈉與鹽酸四環(huán)素購(gòu)于上海生工公司（批號(hào)：E425KA8318、E410KA8176）；LIVE/DEAD BacLight Bacter ial Viability Kit購(gòu)于Thermo Fisher公司（批號(hào)：1937182）；細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒購(gòu)于北京百泰克生物公司（批號(hào)：DP2001）；溶菌酶購(gòu)于 Sigma公司（批號(hào)：SLBW4358）。

1.3 主要儀器 BSA224S-CW分析天平購(gòu)自賽多利斯科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；Synergy H1多功能微孔板檢測(cè)儀購(gòu)于美國(guó)Bio Tek公司；5427R高速離心機(jī)購(gòu)于德國(guó)Eppendorf公司；SU-8010N型場(chǎng)發(fā)射掃描電子顯微鏡為日本HITACHI公司產(chǎn)品；Ti-S型倒置熒光顯微鏡購(gòu)于日本Nikon公司；GenoSens 1850凝膠成像儀購(gòu)于上海勤翔公司。

1.4 方法

1.4.1 楓楊葉提取物的制備 干燥楓楊葉粉碎過(guò)40目篩，稱取一定質(zhì)量，按1:10比例加入水或90%乙醇，室溫浸泡20min后，60℃熱回流法提取2次，抽濾，合并濾液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至適量，冷凍干燥制成凍干粉，置干燥器內(nèi)保藏待用。

1.4.2 菌液的制備 為確保使用相同濃度的菌液，在評(píng)估抗菌活性之前，于600nm處測(cè)定吸光度，OD600=0.5相應(yīng)的菌種濃度為1.0×108CFU·mL-1。將菌種重懸于LB培養(yǎng)基中，使用前稀釋至待用濃度。

1.4.3 抑菌活性篩選 采用紙片擴(kuò)散法篩選楓楊葉不同溶劑提取物的抑菌活性[7]。稱取不同溶劑提取的凍干粉50mg，分別加入含有體積分?jǐn)?shù)5%DMSO的0.85%氯化鈉溶液0.5mL，超聲溶解后以0.22μm的無(wú)菌濾膜濾過(guò)，加入100個(gè)直徑6mm的無(wú)菌濾紙片，平鋪于無(wú)菌平板內(nèi)，37℃烘干備用，每個(gè)紙片含提取物500μg。以含量為20μg/片的鹽酸四環(huán)素與氨芐青霉素鈉紙片作為陽(yáng)性對(duì)照，無(wú)菌雙蒸水作為空白對(duì)照。吸取1.0×108CFU·mL-1的菌液100μL涂布于平板上，以涂布棒涂布均勻，制成含菌平板。將含藥紙片貼于含菌平板表面，37℃培養(yǎng)箱內(nèi)孵育24h，使用游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌圈直徑。

1.4.4 最小抑菌濃度（minimum inhibitory concentration，MIC）與最小殺菌濃度（minimum bactericidal concentration，MBC）的測(cè)定 參照Othman等[8]方法并稍作修改。使用96孔板，將楓楊葉醇提取物以LB培養(yǎng)基對(duì)半稀釋，并將100μL提取物溶液與100μL菌液混合，使提取物終濃度為 31.25～1 000mg·L-1，金黃色葡萄球菌終濃度為1.0×105CFU·mL-1，以鹽酸四環(huán)素與氨芐青霉素鈉1.56～50mg·L-1作為陽(yáng)性對(duì)照。DMSO體積分?jǐn)?shù)最高為5%，已證明對(duì)微生物生長(zhǎng)無(wú)影響。將96孔板密封于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，無(wú)可見(jiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)的孔（OD增量＜0.1）對(duì)應(yīng)的最低提取物濃度即為MIC。將每孔等分試樣涂布在LB固體培養(yǎng)基上，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，確定存活細(xì)菌數(shù)量。存活細(xì)菌數(shù)量至少減少3個(gè)數(shù)量級(jí)，相應(yīng)的最低提取物濃度即為MBC。

1.4.5 抑菌曲線的繪制 采用生長(zhǎng)曲線法測(cè)定楓楊葉醇提取物對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)的影響[9]。將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的金黃色葡萄球菌按照1.0×106CFU·mL-1的濃度接種于含有125mg·L-1（1×MIC）、250mg·L-1（2×MIC）和500mg·L-1（4×MIC）的楓楊葉醇提物及空白培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)。每隔2h取菌懸液測(cè)定其600nm波長(zhǎng)處的吸光度，繪制生長(zhǎng)曲線。

1.4.6 掃描電子顯微鏡觀察菌體形態(tài) 以終濃度250mg·L-1（2×MIC）的楓楊葉醇提取物和0.85%氯化鈉溶液分別于37℃處理金黃色葡萄球菌菌液24h，根據(jù)倪方方等[10]的方法制作掃描電鏡標(biāo)本。將0.85%氯化鈉溶液處理的菌體設(shè)為空白對(duì)照組，以pH=7.2的PBS洗滌并收集空白對(duì)照組和楓楊葉醇提取物處理后的菌體，2.5%戊二醛4℃固定過(guò)夜。將固定的菌體以PBS洗3次，1%鋨酸固定20min。依次經(jīng)50%、75%、90%、100%乙醇和 50%、75%、90%、100%叔丁醇梯度脫水，真空干燥后噴金包覆。使用場(chǎng)發(fā)射掃描電子顯微鏡在1.5kV的加速電壓下檢測(cè)。

1.4.7 熒光顯微鏡分析細(xì)胞膜損傷 使用熒光顯微鏡觀察楓楊葉醇提取物對(duì)金黃色葡萄球菌細(xì)胞膜的損傷作用[11]。以0.85%氯化鈉溶液溶解楓楊葉醇提取物，調(diào)整終濃度為125mg·L-1（1×MIC）和500mg·L-1（4×MIC）。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的金黃色葡萄球菌，接種終濃度為1.0×108CFU·mL-1，各組分別于37℃孵育0.5、24h，根據(jù)試劑說(shuō)明書進(jìn)行SYTO9和碘化丙啶（propidium iodide，PI）熒光染色，室溫避光孵育15min后，吸取5μL樣品固定于載玻片上，使用U-RFL-T汞燈作為激發(fā)源，并通過(guò)SYTO9（450～480nm）和PI（510～550nm）兩個(gè)單獨(dú)發(fā)射濾光器收集熒光信號(hào)，200倍熒光顯微鏡下觀察，每組觀察3張涂片，計(jì)算視野中綠色熒光與紅色熒光的強(qiáng)度比RatioG/R。

1.4.8 瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA損傷 金黃色葡萄球菌基因組DNA損傷檢測(cè)參考Yadav等[12]的方法并稍作改動(dòng)。以125mg·L-1（1×MIC）、250mg·L-1（2×MIC）和500mg·L-1（4×MIC）楓楊葉醇提取物處理金黃色葡萄球菌6h后，根據(jù)試劑盒說(shuō)明書提取金黃色葡萄球菌基因組DNA，0.8%瓊脂糖凝膠100V恒壓電泳30min，紫外燈下觀察并拍照記錄。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以±s表示，多組間比較采用單因素方差分析（one-way ANOVA）。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組抑菌活性比較 紙片擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，楓楊葉醇提取物對(duì)金黃色葡萄球菌有抑制作用，而水提取物基本無(wú)抑菌作用。進(jìn)一步結(jié)果顯示，楓楊葉醇提取物 MIC 為 125mg·L-1，MBC 為 1 600mg·L-1；鹽酸四環(huán)素與氨芐青霉素鈉的MIC均＜2mg·L-1，MBC分別為 2～4mg·L-1和 12.5mg·L-1。見(jiàn)表 1。由于楓楊葉醇提取物對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制效果優(yōu)于水提取物，故后續(xù)研究選用醇提取物。

2.2 楓楊葉醇提取物對(duì)金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)的影響 空白對(duì)照組金黃色葡萄球菌培養(yǎng)2h后進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，隨著時(shí)間的推移，細(xì)菌數(shù)量顯著增加；與空白對(duì)照組比較，各楓楊葉醇提取物處理組細(xì)菌進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的時(shí)間延遲，培養(yǎng)至2h時(shí)各組OD600值均低于空白對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。培養(yǎng)至4h開(kāi)始，2×MIC處理組OD600值均低于1×MIC處理組，4×MIC處理組均低于2×MIC和1×MIC處理組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。培養(yǎng)12h后，不同濃度楓楊葉醇提取物處理組菌量較空白對(duì)照組明顯減少（P＜0.01），且均進(jìn)入穩(wěn)定期；而空白對(duì)照組菌量在24h時(shí)仍呈增長(zhǎng)趨勢(shì)。說(shuō)明楓楊葉醇提取物可以明顯抑制金黃色葡萄球菌的增殖，而且抑制作用存在量效關(guān)系。見(jiàn)圖1。

表1 各組抑菌圈與MIC、MBC比較(±s）Tab.1 Comparison of bacteriostatic diameter and MIC,MBC in each group(±s)

表1 各組抑菌圈與MIC、MBC比較(±s）Tab.1 Comparison of bacteriostatic diameter and MIC,MBC in each group(±s)

注：每個(gè)樣本重復(fù)3次；（-）表示沒(méi)有檢測(cè)Note:Each treatment repeated three times;(-)represented no tested

指標(biāo) 水提取物 醇提取物 鹽酸四環(huán)素 氨芐青霉素鈉抑菌圈直徑（mm）MIC(mg·L-1)MBC(mg·L-1)13.94±0.23＜2 12.5 0 - -9.34±0.46 125 1 600 14.85±0.14＜2 2～4

2.3 各組金黃色葡萄球菌菌體顯微形態(tài)的觀察 掃描電鏡觀察顯示，空白對(duì)照組金黃色葡萄球菌菌體飽滿，形態(tài)完整。而楓楊葉醇提取物處理24h后，大部分菌體變形、塌陷，甚至發(fā)生表面溶解，形態(tài)完整性遭到了明顯破壞。由此說(shuō)明，楓楊葉醇提取物對(duì)金黃色葡萄球菌菌體結(jié)構(gòu)具有較強(qiáng)的破壞作用。見(jiàn)圖2。

圖1 楓楊葉醇提取物對(duì)金黃色葡萄球菌增殖的影響Fig.1 Effect of P.stenoptera leaves alcohol extract on the growth of S.aureus

2.4 楓楊葉醇提取物對(duì)金黃色葡萄球菌細(xì)胞膜完整性的影響 SYTO9能夠穿透完整的細(xì)胞膜，與核酸結(jié)合并呈現(xiàn)強(qiáng)烈的綠色熒光，而PI進(jìn)入膜受損的細(xì)胞，呈現(xiàn)紅色熒光，SYTO9和PI共存時(shí)則會(huì)出現(xiàn)黃色熒光，提示細(xì)胞膜破壞程度較輕[13]?？瞻讓?duì)照組0.5h時(shí)可見(jiàn)大面積綠色熒光，說(shuō)明空白對(duì)照組金黃色葡萄球菌細(xì)胞膜未發(fā)生明顯損傷。處理24h后，紅色熒光略有增加，但綠色熒光仍明顯強(qiáng)于紅色，與0.5h空白對(duì)照組比較，RatioG/R差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），說(shuō)明隨著處理時(shí)間的增加，空白對(duì)照組中僅有少部分細(xì)菌死亡。

圖2 金黃色葡萄球菌場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡照片（22 000×）Fig.2 Field emission scanning electron microscope of S.aureus(22 000×)

1×MIC楓楊葉醇提取物處理0.5h后，與同時(shí)期空白對(duì)照組比較，紅色熒光增加，綠色熒光仍強(qiáng)于紅色，說(shuō)明菌體細(xì)胞膜未出現(xiàn)明顯損傷，RatioG/R差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。處理24h后則出現(xiàn)黃色熒光，與24h空白對(duì)照組比較，RatioG/R差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），說(shuō)明菌體細(xì)胞膜發(fā)生損傷。4×MIC 楓楊葉醇提取物處理0.5h，黃色熒光顏色加深同時(shí)出現(xiàn)更多的紅色熒光，與0.5h空白對(duì)照組比較，RatioG/R差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），說(shuō)明更多的菌體細(xì)胞膜發(fā)生損傷。處理24h后，菌體細(xì)胞幾乎完全死亡，與24h空白對(duì)照組比較，RatioG/R差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），說(shuō)明發(fā)生廣泛的細(xì)胞膜損傷。見(jiàn)表2、圖3。

2.5 楓楊葉醇提取物對(duì)金黃色葡萄球菌基因組DNA的影響 與空白對(duì)照組比較，2×MIC、4×MIC楓楊葉醇提取物作用后，金黃色葡萄球菌基因組DNA電泳條帶變暗，可能由于楓楊葉醇提取物與DNA結(jié)合，從而競(jìng)爭(zhēng)性抑制了核酸染料與DNA的結(jié)合，使DNA的電泳條帶變暗；而電泳遷移增加，說(shuō)明基因組DNA片段化明顯，對(duì)基因組DNA造成的損傷也更嚴(yán)重。見(jiàn)圖4。

表2 各組SYTO9與PI染色熒光強(qiáng)度比較（±s）Tab.2 Comparson of fluorescence intensity ratio of SYTO9 and PI staining in each group(±s)

表2 各組SYTO9與PI染色熒光強(qiáng)度比較（±s）Tab.2 Comparson of fluorescence intensity ratio of SYTO9 and PI staining in each group(±s)

注：與同時(shí)期空白對(duì)照組比較，**P＜0.01Note:Compared with blank control group of the same period,**P＜0.01

組別1×MIC處理組4×MIC處理組空白對(duì)照組RatioG/R 0.5h 24h 3.13±0.14 2.05±0.08**3.35±0.11 2.36±0.07**0.44±0.03**3.25±0.11

圖3 各組金黃色葡萄球菌熒光顯微照片（200×）Fig.3 Epifluorescence micrograph of S.aureus in each group(200×)

3 討論

金黃色葡萄球菌是一種高致病性革蘭陽(yáng)性球菌，能夠引起全身及局部化膿性感染，是肺炎、心包炎、腸炎、金黃色葡萄球菌敗血癥等感染性疾病的重要病原體[14]。研究已證實(shí)楓楊的各部位均具有廣譜抗菌作用，且楓楊葉來(lái)源方便、價(jià)格低廉，因此深入研究開(kāi)發(fā)相關(guān)的植物源性抗菌劑具有較高的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。近年來(lái)，楓楊抗微生物活性研究屢見(jiàn)報(bào)道，但大多集中于抑菌效果研究，而對(duì)相關(guān)作用機(jī)制的研究相對(duì)較少。本研究以金黃色葡萄球菌為對(duì)象，探討了楓楊葉不同溶劑提取物的抗菌活性以及相關(guān)的作用機(jī)制。

圖4 楓楊葉醇提取物對(duì)金黃色葡萄球菌基因組DNA的影響Fig.4 Effect of P.stenoptera leaves alcohol extract on genomic DNA of S.aureus

文獻(xiàn)報(bào)道，楓楊屬植物含有醌類、萜類、甾體、黃酮類等成分[15]，其中萘醌類是發(fā)揮抑菌作用的主要成分[16]。萘醌類含有苯環(huán)，分子量較大，大多具有非極性官能團(tuán)，在乙醇中溶解度更好，這是醇提取物具有較高抑菌活性的基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)也證實(shí)，楓楊葉醇提取物較水提取物能更好地抑制金黃色葡萄球菌的增殖，這與潘為高等[2]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。楓楊葉醇提取物抑菌活性更高，故后續(xù)選用醇提取物繼續(xù)研究，結(jié)果表明，楓楊葉醇提取物 MIC 為 125mg·L-1，MBC＞1 600mg·L-1。陽(yáng)性對(duì)照藥鹽酸四環(huán)素與氨芐青霉素的MIC均小于2mg·L-1，鹽酸四環(huán)素 MBC 為 2～4mg·L-1，氨芐青霉素MBC為12.5mg·L-1，提示楓楊葉醇提取物同四環(huán)素、氨芐青霉素均能有效抑制金黃色葡萄球菌的增殖，而且其效果具有劑量和時(shí)間依賴性。

細(xì)菌主要由細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核糖體等組成，其中細(xì)胞膜是細(xì)菌與外界進(jìn)行物質(zhì)能量交換的重要媒介[17]。藥物的抑菌作用主要通過(guò)破壞細(xì)菌細(xì)胞壁及細(xì)胞膜的完整性、抑制蛋白和核酸合成等方面來(lái)實(shí)現(xiàn)[18]。青霉素結(jié)合蛋白是位于細(xì)菌胞質(zhì)膜上的蛋白質(zhì)，大分子量的青霉素結(jié)合蛋白具有轉(zhuǎn)肽酶及轉(zhuǎn)糖基酶活性，參與細(xì)菌細(xì)胞壁的合成；小分子量則具有羧肽酶活性，與細(xì)菌分裂有關(guān)。β-內(nèi)酰胺類抗生素如氨芐青霉素主要作用于菌體內(nèi)的青霉素結(jié)合蛋白,抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成，使菌體失去滲透屏障而膨脹、裂解[19]。四環(huán)素類能增加細(xì)菌細(xì)胞膜通透性，與細(xì)菌胞內(nèi)核糖體30S亞基形成可逆結(jié)合體，抑制蛋白質(zhì)合成，還可通過(guò)結(jié)合線粒體70S亞基，抑制線粒體蛋白質(zhì)的合成，從而起到抗菌效果[20-21]。由于抗生素長(zhǎng)期廣泛用于治療人及動(dòng)物的細(xì)菌感染，導(dǎo)致不斷出現(xiàn)耐藥菌株。植物源性抗菌劑異于傳統(tǒng)抗菌劑的抗菌機(jī)制，已成為近年來(lái)的研究熱點(diǎn)。掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，楓楊葉醇提取物處理24h后，大部分菌體變形，塌陷，甚至發(fā)生表面溶解等現(xiàn)象，形態(tài)完整性遭到了破壞。熒光染色結(jié)果表明楓楊葉醇提取物對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制效應(yīng)可能是通過(guò)破壞菌體細(xì)胞膜的完整性而實(shí)現(xiàn)的，這與本實(shí)驗(yàn)中掃描電鏡觀察結(jié)果一致。

DNA是生物體儲(chǔ)存、復(fù)制和傳遞遺傳信息的物質(zhì)基礎(chǔ)，在遺傳信息傳遞、物質(zhì)合成、生長(zhǎng)發(fā)育等生物過(guò)程中起關(guān)鍵性作用?？咕幬锶襞c菌體DNA作用，會(huì)干擾菌體遺傳指令的傳遞，影響與新陳代謝相關(guān)的物質(zhì)合成，從而起到抑菌作用[22]?；蚪MDNA片段化是細(xì)菌衰亡的標(biāo)志，若發(fā)生DNA裂解，說(shuō)明細(xì)菌細(xì)胞發(fā)生凋亡。許多中藥成分通過(guò)裂解細(xì)菌DNA實(shí)現(xiàn)抗菌活性。Anandhi等[23]發(fā)現(xiàn)，卷果云實(shí)甙和黃酮類化合物處理24h后，大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌均表現(xiàn)出明顯的DNA裂解；Ahsan等[24]和Ya－dav等[25]研究發(fā)現(xiàn)，烏墨葉和種子提取物能損傷枯草芽孢桿菌基因組DNA，從而表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗菌活性。還有研究發(fā)現(xiàn)，殼聚糖通過(guò)裂解菌體DNA從而抑制金黃色葡萄球菌的增殖[26]。本實(shí)驗(yàn)中瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果顯示，楓楊葉醇提取物與金黃色葡萄球菌DNA結(jié)合，損傷甚至裂解DNA，從而達(dá)到抑菌效果。

綜上所述，楓楊葉醇提取物能顯著抑制金黃色葡萄球菌的增殖，其 MIC 為 125mg·L-1，MBC＞1 600mg·L-1。抑菌機(jī)制研究結(jié)果表明，楓楊葉醇提取物能破壞金黃色葡萄球菌菌體形態(tài)，使之發(fā)生變形、塌陷，甚至表面溶解；增加細(xì)胞膜通透性，造成細(xì)菌生理功能紊亂；同時(shí)損傷甚至裂解細(xì)菌DNA，從而發(fā)揮抑菌作用。然而楓楊葉醇提取物對(duì)細(xì)菌作用是否還有其他機(jī)制參與如抑制蛋白合成、破壞細(xì)胞壁等還需要進(jìn)一步研究。