郭利霄 申亞君 侯芳潔
摘 要:動(dòng)物藥是我國中藥的重要組成部分。由于生態(tài)環(huán)境被破壞,造成動(dòng)物野生資源在逐漸減少。同時(shí),目前養(yǎng)殖技術(shù)不成熟,使得動(dòng)物藥價(jià)格昂貴,市場上偽品較多、品種混亂現(xiàn)象嚴(yán)重。該研究對(duì)近年來常見動(dòng)物藥進(jìn)行了整理歸類,將其分為環(huán)節(jié)動(dòng)物、哺乳動(dòng)物、脊椎動(dòng)物、節(jié)肢動(dòng)物等4大類藥品,為動(dòng)物藥的鑒別研究提供參考。
關(guān)鍵詞:動(dòng)物藥;混淆品
中圖分類號(hào) R282.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A文章編號(hào) 1007-7731(2019)24-0082-07
Abstract: Animal medicine is an important part of traditional Chinese medicine in China,which has a long history of medication,and its curative effect has been recognized by clinicians. Due to the gradual destruction of the ecological environment,the gradual reduction of wild animal resources and immature breeding technology,the price of animal medicine is expensive,there are many fake products in the market,and the variety confusion is serious. In this study,we mainly sort out some common confusion products of animal drugs in recent years to provide basis for the identification of animal drugs.
Key words:Chinese herbal medicine for animal medicine;Confusable species
中藥按其屬性分為植物藥、動(dòng)物藥、礦物藥3類[1]。我國動(dòng)物藥應(yīng)用廣泛,種類較多,早在《神農(nóng)本草經(jīng)》就有關(guān)于動(dòng)物藥的記載,歷代本草記載動(dòng)物藥有600余種,其功效也是植物藥所不能替代的[2]。2015年版《中國藥典》收載了動(dòng)物藥、動(dòng)物藥的提取物、含動(dòng)物藥的復(fù)方制劑,占全部收載品種的18%[3]。由于動(dòng)物藥價(jià)格昂高貴、資源短缺,導(dǎo)致市場上混淆品眾多。在利益的驅(qū)使下,一些不法商販將其同科屬的近緣物種摻入正品中進(jìn)行出售,兩者外形較為相似,不易鑒別;此外,市場上還有增重、染色、塑料制品偽制等現(xiàn)象存在,擾亂市場秩序,嚴(yán)重威脅人們的身體健康。本研究按原動(dòng)物來源進(jìn)行整理,將動(dòng)物藥分為環(huán)節(jié)動(dòng)物、哺乳動(dòng)物、脊椎動(dòng)物、節(jié)肢動(dòng)物4大類,以期為動(dòng)物的鑒別研究提供參考
1 環(huán)節(jié)動(dòng)物
1.1 地龍 地龍為鉅蚓科動(dòng)物參環(huán)毛蚓[Pheretima aspergillum(E.Perrier)]、通俗環(huán)毛蚓[Pheretima vu1garis Chen]、威廉環(huán)毛蚓[Pheretima guillelmi(Michaelsen)]或櫛盲環(huán)毛蚓[Pheretima pectinifera Michaelsen]的干燥體[3]。地龍的分類依據(jù)主要是參照蚯蚓的分類鑒別。由于地龍的分類鑒定資料比較零散以及分類體系變動(dòng),藥農(nóng)不能對(duì)地龍?jiān)瓌?dòng)物進(jìn)行準(zhǔn)確的鑒別等原因造成市場上的地龍藥材混亂[4]。唐瑜等[5-6]研究報(bào)道地龍偽品是將?;蛘哐虻哪c子切成條狀,加入黑色的泥漿中攪拌均勻,曬干之后混入正品中進(jìn)行出售。其偽品用水浸泡后展開,表面無剛毛、生殖孔和生殖環(huán)帶。還有另外一種摻偽是向正品地龍中注入泥漿,增加地龍藥材的重量,從中獲得更多利潤。摻偽品多呈圓柱狀,用水浸泡得到泥芯。郭利霄[7]等通過微性狀鑒別的方法,對(duì)市場上所售的地龍進(jìn)行鑒別,其偽品主要包括直隸環(huán)毛蚓[Pheretima tshiliensis(Michaclsen)]、保寧環(huán)毛[蚓Pheretima magna Chen]、壯偉環(huán)毛蚓[Pheretima robusta(E.Perrier)]、白頸環(huán)毛蚓[Pheretima californica(Kinberg)]。孫潔[8]等通過對(duì)45批廣地龍樣品進(jìn)行DNA鑒定,其偽品主要有大腔蚓[Metaphire magna(Chen)]、暗孔遠(yuǎn)盲蚓[Amynthas obscuritoporus(Chen)]2種,大腔蚓主產(chǎn)于海南,暗孔蚓主產(chǎn)于廣西。馬梅[9]等對(duì)地龍及其混淆品白頸腔蚓[Metaphire californica(Kinberg)]、壯偉遠(yuǎn)盲蚓[Amynthas robustus (Perrier)]、日本杜拉蚓[Drawida japonica japonica(Michaelsen)]、秉氏遠(yuǎn)盲蚓]Amynthas carnosus carnosus(Stephenson)]、夏威遠(yuǎn)盲蚓[Amynthas garcilis(Kinberg)]的COI基因和16SrRNA基因進(jìn)行了鑒別。
田娜[10]采用多重位點(diǎn)特異性PCR鑒定了保寧環(huán)毛蚓(M.magna)、豆葉遠(yuǎn)盲蚓(A.phaselus)、暗孔遠(yuǎn)盲蚓(A. octopapillatus)、多肉遠(yuǎn)盲蚓(A. carnosus)、安德愛勝蚓(Eisenia andrei)、枯萎遠(yuǎn)盲蚓(A. emarcidus)、毛利遠(yuǎn)盲蚓(A. morrisi)、皮質(zhì)遠(yuǎn)盲蚓(A. corticis)、優(yōu)雅遠(yuǎn)盲蚓(A. gracilis)、舒脈腔蚓(M. schmardae)、阿美遠(yuǎn)盲蚓(A. amis)、光亮元盲蚓(A. candidus)、加州腔環(huán)蚓(M. californica)、露玻遠(yuǎn)盲蚓(A. tayalis)、葡腺遠(yuǎn)盲蚓(A. uvaglandularis)、棋盤遠(yuǎn)盲蚓(A. tessellatus)、十字遠(yuǎn)盲蚓(A. cruxus)、雙頤腔蚓(M. bucculenta)、透明遠(yuǎn)盲蚓(A. lubricata)、王氏遠(yuǎn)盲蚓(A. wangi)、武林遠(yuǎn)盲蚓(A. wulinensis)、顏氏腔環(huán)蚓(M. yeni)、優(yōu)雅遠(yuǎn)盲蚓(A. gracilis)、友燮遠(yuǎn)盲蚓(A. yushii)、玉質(zhì)遠(yuǎn)盲蚓(A. caballus)、湖北遠(yuǎn)盲蚓(A. hupeiensis)。劉旭朝[11]對(duì)地龍正品及其混淆品進(jìn)行DNA鑒別,其中報(bào)道新偽品有梯形流蚓(Aporrectodea trapezoides)、湖北遠(yuǎn)盲蚓(Amynthas hupeiensis)、天錫杜拉蚓(Drawida gisti)、赤子愛勝蚓(Eisenia fetida)、哈爾濱愛勝蚓(Eisenia harbinensis)、熱河愛勝蚓(Eisenia jeholensis)、諾登愛勝蚓(Eisenia nordenskioldi)、紅色愛勝蚓(Eisenia rosea)、亞洲腔蚓(Metaphire asiatica).
1963—1990年的歷版《中國藥典》規(guī)定地龍來源:“為參環(huán)毛蚓[Pheretima aspergillum(Perrier)]和縞蚯蚓[Allolobophoea caliginosa(Savigny) trapezoides (Ant.Deges)]的干燥體。前者習(xí)稱“廣地龍”,后者習(xí)稱“土地龍”[12-16]。1995年之后的歷版《中國藥典》中記載來源均與2015年版《中國藥典》一致。目前對(duì)于地龍的化學(xué)藥用成分的認(rèn)定較為模糊[4,17-22]。不同產(chǎn)地、加工方式、生長年限等對(duì)其質(zhì)量均有影響,應(yīng)通過多種指標(biāo)來定義地龍的來源。
1.2 水蛭 水蛭為水蛭科動(dòng)物螞橫(Whitmania pigra Whitman)、水蛭(Hirudo nipponica Whitman)或柳葉螞蟥Whitmania acranulata Whitman的干燥全體[3]。劉曉帆[23]通過對(duì)水蛭藥材的DNA進(jìn)行鑒別發(fā)現(xiàn)市場上水蛭的偽品主要是湖北牛蛭(Poecilobdella granulosa)和天目山蛭(Haemadipsa tianmushana Song)2種。解學(xué)超[24]研究發(fā)現(xiàn)水蛭存在嚴(yán)重的增重?fù)絺维F(xiàn)象,部分不良商家在水蛭中摻雜硫酸鎂進(jìn)行增重,長期接觸會(huì)引發(fā)呼吸道炎癥,臨床應(yīng)用時(shí),也會(huì)因摻偽增重現(xiàn)象而減少了常規(guī)用量,從而影響療效。也有部分商家用淀粉壓制、外表用不明藍(lán)色染料染色,并制造人工吸盤,水浸后水溶液呈藍(lán)色。還有在水蛭表面刷一層黑色的膠質(zhì)狀物、在體內(nèi)填充異物、加礬、加鹽[25-26]等手段來進(jìn)行增重,謀取利益。金邊螞蟥是醫(yī)蛭科動(dòng)物菲牛蛭(Poecilobdella manillensis)的干燥全體[27],是廣西壯藥,屬于地方標(biāo)準(zhǔn)。經(jīng)常同2015版《中國藥典》收載水蛭來源相混淆。
2 哺乳動(dòng)物
2.1 穿山甲 穿山甲為鯪鯉科動(dòng)物穿山甲(Manis pentadactyla Linnaeus)的鱗甲[3],有研究報(bào)道,可以通過顯微、薄層色譜以及高效液相色譜、DNA鑒別法等對(duì)穿山甲屬動(dòng)物的鱗片進(jìn)行性狀、形態(tài)學(xué)鑒別。結(jié)果顯示,穿山甲的偽品主要有中華穿山甲(M. pentadactyla),馬來穿山甲(M. javanica)、印度穿山甲(M. crassicaudata)、南非穿山甲(M. temminckii)、大穿山甲(M. gigantea)、樹穿山甲(M. tricuspis)、長尾穿山甲(M. tetradactyla)[28-30]。閔靜[31-33]等人的研究表明,穿山甲生品的偽品還有用聚乙烯或者是動(dòng)物骨膠為原料經(jīng)過制作模型壓制而成;羊、豬、牛、的蹄甲經(jīng)過削制制成;砂燙穿山甲后迅速將其投入芒硝、食鹽、明礬、苯甲酸鈉、硫酸鎂、味精的飽和水溶液中進(jìn)行增重;經(jīng)過提取后的穿山甲藥渣再次利用。
2.2 鹿茸 鹿茸為鹿科動(dòng)物梅花鹿(Cervus Nippon Temminck)或馬鹿(Cervus elaphus Linnaeus)的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角[3]。李明月[34]采用PCR技術(shù)對(duì)梅花鹿和新西蘭鹿的鹿茸進(jìn)行了鑒別,其擴(kuò)增出的條帶及其條帶的數(shù)目存在差異。黃瑤[35]等人通過2種電泳方法對(duì)鹿茸、鹿角及其混淆品狍子角、坡鹿角、馴鹿角和駝鹿角進(jìn)行鑒別,其中花鹿茸、馬鹿茸、梅花鹿角、馬鹿角均有4種條帶,而其混淆品只有1條特征條帶。凌勝男[36]采用GeXP多重PCR技術(shù)對(duì)梅花鹿(Cervus Nippon Temminck)、馬鹿(Cervus elaphus Linnaeus)、馴鹿(Rangifer tarandus Linnaeus)、麋鹿(Elaphurus davidianus Milne)、黇鹿(Dama dama Linnaeus)、白唇鹿(Cervus albirostris Przewalski)的鹿毛以及麋鹿肉進(jìn)行鑒別,成功鑒定出6種近緣鹿種。除此之外還有水鹿茸(Cervus unicolor kerr)、駝鹿茸(Alces alces Linnaeus)、海南坡鹿茸(Cervus eldi hainanus Thomas)、爪哇鹿(Cervus timorensis)、豚鹿茸(Cervus porcinus)和人工制品,主要的區(qū)別在茸毛的質(zhì)地和顏色、有無骨化環(huán)、氣味等[37-38]。近年來鹿茸[39]出現(xiàn)了一些雜交品種,其成分與親本的含量稍有差異,但粗蛋白、礦物質(zhì)、氨基酸等成分均優(yōu)于親本。雜交品種出現(xiàn)在一定程度上解決了藥用資源短缺的問題。
2.3 水牛角 水牛角為??苿?dòng)物水牛(Bubablus bubalis Linnaeus)的角[3]。劉朝旭[11,40]采用DNA條形碼鑒別的方法對(duì)水牛角(Bubalus bubalis)、牦牛角(Bos grunniens)、黃牛角(Bos Taurus)、山羊角(Capra hircus)、綿羊角(Ovis aries)進(jìn)行了鑒別。其中牦牛角是水牛角的主要偽品。
2.4 羚羊角 羚羊角為??苿?dòng)物賽加羚羊(Saiga tatarica Linnaeus)的角[3]。王桂梅[41]對(duì)賽加羚羊(Saiga tatarica)、藏羚羊(Pantholops hodgsonii)、普氏羚羊(Procapra gutturosa)、山羊(Capra hircus)、綿羊(Ovis aries)的角質(zhì)層的COI基因進(jìn)行了測序,該方法很好的鑒別了羚羊角及其混淆品。胡曉煒[42]通過GC-MS的方法對(duì)羚羊家及其混淆品山羊角(Caprahircus Linnaeus)、水牛角(Bubalus bubalis Linnaeus)、牦牛角(Poephagus grunniens Linnaeus)、黃羊角(Procanra gutturosa Pallas)中的酯類成分進(jìn)行測定。目前,可以通過棕櫚酸、硬脂酸、油酸3個(gè)成分的比值作為鑒別羚羊角與其混淆品。徐愛仁[43]研究發(fā)現(xiàn),可以利用氣相色譜共有峰之間比值鑒別羚羊角與其混淆品。代麗萍[44]通過性狀鑒別、顯微鑒別、薄層鑒別以及紫外鑒別對(duì)羚羊角及風(fēng)化(柴性)羚羊角進(jìn)行了鑒別,為柴性羚羊角提供了生藥學(xué)鑒定資料。此外,市場上存在將鉛粒灌注與羚羊角中進(jìn)行增重[45]。
2.5 犀牛角 犀牛為脊索動(dòng)物門哺乳綱奇蹄目犀科動(dòng)物。敖艷霖[46]通過光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡、紫外燈照射等對(duì)犀牛角及其混淆品非洲黑犀(Diceros bicornis)、非洲白犀(Ceratotherium simum)、蘇門答臘犀(Didermocerus sumatrensis)、印度犀(Rhinoceros unicornis)、牦牛角(Bocidae)、水牛角(Bubalus bubalis Linnaeus)、水牛角制品、整只牦牛蹄匣制品(Bovidae)、驢蹄匣制品(Equus cabaallus)、羚羊角片(Gazella subgutturosa)、仿犀牛角串珠、塊狀人工材料進(jìn)行鑒別,研究發(fā)現(xiàn),犀牛角的角質(zhì)圓柱形絲狀纖維及其皮部的微觀結(jié)構(gòu)是其獨(dú)有的結(jié)構(gòu)。
3 脊椎動(dòng)物
3.1 蛇類 金錢白花蛇為眼鏡蛇科動(dòng)物銀環(huán)蛇[(Bungarus multicinctus)Blyth]的幼蛇干燥體[3]。其主要偽品為金環(huán)蛇[Bungarus fasciatus (Schneider)]、赤鏈蛇[Dinodon rufozonatum (Cantor)]、水赤鏈蛇(Natria annularis),在通性狀、顯微以及微性狀方面均有差異[47]。金錢白花蛇的偽品赤鏈蛇一般用黑漆染色來冒充正品,在外觀形狀上與正品及其相似[48]。
烏梢蛇為游蛇科動(dòng)物烏梢蛇[Zaocys dhumnades(Cantor)]的干燥體[3]。黃勇[49]對(duì)其6個(gè)科15個(gè)屬進(jìn)行DNA鑒別,其烏梢蛇混淆品包括緬甸蟒(P. bibittatus)、福建竹葉青(T. stejnegeri)、白唇竹葉青蛇(T. albolabris)、原矛頭蝮(P.mucrosquamatus)、尖吻蝮(D. acutus)、百花曙蛇(O. moellendorffi)、灰鼠蛇(P. korros)、滑鼠蛇(P. mucosa)、黃脊游蛇(H. spinalis)、三索頜骨腔蛇(C. radiatus)、虎斑頸槽蛇(R. tigrinus)、眼鏡蛇(N. naja)、眼鏡王蛇[Ophiophagus hannah(Cantor)]、中國沼蛇(O. hannah)、鉛色水蛇(E. plumbea)。另外還有錦蛇屬的黑眉錦蛇(Elaphe tacniura Cope)、紅點(diǎn)錦蛇(Elaphe taeniura Cope)和水蛇屬的中國水蛇[Enhydris chinensis (Gray)][50]。白條錦蛇(Elaphe dione Pallas)也是其偽品之一[51]。
蘄蛇為蝰科動(dòng)物五步蛇[Agkistrodon acutus (Güenther)]的干燥體[3]。蘄蛇的摻偽品及其偽制品主要有死后變質(zhì)的蛇經(jīng)過加工成干燥品;鮮蛇經(jīng)加工后在蛇身皮下?lián)饺腓F物、淀粉、石塊或者明礬水浸泡等來增重;將蘄蛇的蛇皮貼在其它雜蛇的軀骨上進(jìn)行出售,出現(xiàn)“一蛇兩皮”的現(xiàn)象[52]。其主要的偽品有百花錦蛇、眼鏡蛇[Naja naja (Linnaeus)]、銀環(huán)蛇(Bungarus multicinctus Blyth)、金環(huán)蛇[Bungarus fasciatus (Schneider)]、滑鼠蛇(Ptyas mucosa)、烙鐵頭[Trimeresurus mucrosquamatus (Cantor)]、山烙鐵頭(Ttimeresurus monticola Guenther)、中介蝮[Agkistrodon intermedius (Strauch)]、蝰蛇(Voperarusselli siamensis Smith)、草原蝰蛇[Vopera ursini renardi (Christoph)]等一些近緣物種[53-57]。
3.2 龜甲 龜甲為龜科動(dòng)物烏龜[Chinemys reevesii(Gray)]的背甲及腹甲[3]。劉曉帆等[23]采用DNA條形碼技術(shù)鑒別烏龜(Chinemys reevesii)、緬甸陸龜(Indotestudo elongate)、 (Geoemya spengleri)、黃喉擬水龜(Mauremys mutica)、紅耳側(cè)線龜(Trachemys scripta)、花龜(中華花龜)(Mauremys sinensis)、黃緣閉殼龜(Cuora flavomarginata)。盛瑜[58]對(duì)海龜、鱉甲的背甲及腹甲進(jìn)行傅里葉變換紅外光譜分析,結(jié)果表明,這種方法可以準(zhǔn)確區(qū)分鱉甲與其混淆品。此外市場上還有偽品地圖龜甲、中華花龜甲、巴西龜甲,可以通過復(fù)合PCR技術(shù)將這些偽品區(qū)分開[59]。崔麗娜[60]基于種內(nèi)COI序列的4個(gè)變異點(diǎn)對(duì)其它偽品黑頸烏龜(Chinemys nigricans)、黃緣閉殼龜(Cuora flavom arginata)、平胸龜(Platyaternon megaoephalum)進(jìn)行了鑒別。市場上還存在將背甲充其腹甲進(jìn)行出售的現(xiàn)象。
4 節(jié)肢動(dòng)物
4.1 土鱉蟲 土鱉蟲為鱉蠊科昆蟲地鱉(Eupolyphaga sinensis Walker)或冀地鱉[Steleophaga plancyi(Boleny)]的雌蟲干燥體[3]。地鱉是2015年版《中國藥典》收載來源,金邊土鱉[62](Opisthoplatia orientalis Burm.)是《廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》(第二冊(cè))收載。陳偉韜[61]通過薄層色譜和DNA條形碼對(duì)地鱉和金邊地鱉進(jìn)行鑒別,結(jié)果表明,薄層色譜鑒別難以將兩者區(qū)分開來,但DNA條形碼可以準(zhǔn)確的將正品與混淆品區(qū)分開來。鞠康[63]通過微性狀鑒別對(duì)土鱉蟲及其混淆品金邊土鱉、雄性土鱉、雌性土鱉、冀地鱉進(jìn)行鑒別,結(jié)果顯示,土鱉蟲正品與其淆混品在頭部、背部、腹部、足部等有明顯的區(qū)別。
4.2 九香蟲 九香蟲為蝽科昆蟲九香蟲(Aspongopus chinensis Dallas)的干燥體[3]。李莎[64]通過顯微鑒別的方法對(duì)九香蟲及其混淆品小皺蝽(Cyclopelta perva Distana)、黑兜蟲(Aspongopus nigriventris Westwood)、麻皮蝽(Ertjesina fullo Thunberg)、荔蝽(Tessaratoma papillosa Drury)、無刺蝽(Megymenum inerme Herrich-Schaeffer)進(jìn)行鑒別,腹板特征可以作為九香蟲鑒別的依據(jù)。李娟[65]等人通過性狀鑒別鑒定出九香蟲及其常見8種蝽科的混淆品,分別為小皺蝽(Cyclopelta perva Distana)、大皺蝽(Cyclopelta obscura Lepeleter-Serville)、黑兜蟲(Aspongopus nigriventris Westwood)、麻皮蝽(Ertjesina fullo Thunberg)、細(xì)毛蝽(Dolvcoris baccarum Linneus)、荔蝽(Tessaratoma papillosa Drury)、無刺蝽(Megymenum inerme Herrich-Schaeffer)、鋸齒蝽(Megymenum gracilicorne Dallas)。
4.3 蜈蚣 蜈蚣為蜈蚣科動(dòng)物少棘巨蜈蚣[Scolopendra subspinipes mutilans L.Koch)]的干燥體[3]??邓暮蚚66]通過行傳鑒別、微性狀鑒別以及分子鑒別等方法對(duì)少棘蜈蚣、哈氏蜈蚣、多棘蜈蚣[Scolopendra subspinipesmutilas (Newport)]、黑同蜈蚣、墨江蜈蚣(Scolopendra mojiangica Zhang et Chi)、模棘蜈蚣、馬氏蜈蚣進(jìn)行區(qū)分。
5 小結(jié)
2013年和2015年全國中藥材及飲片質(zhì)量抽檢結(jié)果顯示,動(dòng)物藥不合格率較高,并且不和格原因多為摻入偽品[67-68]。動(dòng)物藥的混淆品一般為其同科屬近緣物種,由于其外形特征較為相似給鑒別帶來較大的困難。同時(shí),市場上還存在用塑料制品經(jīng)過特殊加工制成與正品相近的成品。目前可以通過傳統(tǒng)的性狀鑒別、顯微鑒別、理化鑒別以及DNA條形碼技術(shù)等多種方法相結(jié)合,將正品和混淆品區(qū)分開來。除了混淆品之外,增重染色現(xiàn)象同樣存在。由于動(dòng)物藥價(jià)格昂貴,一些不法商販通過各種方式進(jìn)行摻偽造假、以假亂真,嚴(yán)重的影響臨床用藥安全。因此,應(yīng)加大對(duì)其同科屬物種的研究,對(duì)其同科屬近緣物種的毒性作用、化學(xué)成分、藥理作用等進(jìn)行全面分析,通過綜合研究來評(píng)價(jià)該品種的質(zhì)量,一來可以擴(kuò)大藥源,二來提高臨床用藥的有效性和安全性。另外還應(yīng)規(guī)范養(yǎng)殖、加強(qiáng)動(dòng)物藥使用和流通監(jiān)管、建立質(zhì)量追溯制度等來保證用藥安全。
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(責(zé)編:張 麗)