mir-329在子宮頸癌中的表達(dá)及作用

薛芳芳 朱莉

子宮頸癌(cervical cancer,CC)簡稱宮頸癌，是常見的婦科腫瘤之一。我國每年約有13.5萬宮頸癌新發(fā)病例，占全球發(fā)病數(shù)量的1/3[1]。高危型人乳頭瘤病毒(Human Papillomavirus，HPV)的持續(xù)感染是宮頸癌常見致病原因，此外，眾多宿主基因的表達(dá)調(diào)控也會影響宮頸癌的發(fā)生發(fā)展[2]。微小RNA(microRNA，miRNA)是內(nèi)源性的短非編碼單鏈RNA(17-22個(gè)核苷酸)，通過5′端(2-7個(gè)堿基對)與靶mRNA的3′端非編碼區(qū)(3′-UTR)序列特異性互補(bǔ)結(jié)合，降解mRNA或抑制mRNA翻譯進(jìn)而調(diào)節(jié)基因的表達(dá)[3]。到目前為止，已有超過1000個(gè)miRNA被預(yù)測存在于人類基因組中，約50%的miRNA基因位于經(jīng)常擴(kuò)增或缺失的薄弱位點(diǎn)和基因組區(qū)域，人類癌癥中常出現(xiàn)此類區(qū)域microRNA的異常表達(dá)[4]。越來越多的研究表明，miRNA表達(dá)異常在腫瘤細(xì)胞增殖、遷移及惡性進(jìn)展中扮演重要角色。最新報(bào)道指出mir-329在宮頸癌組織中表達(dá)異常，可作用于腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志分子CD146、絲裂原活化蛋白激酶MAPK1等宮頸癌相關(guān)靶基因,而發(fā)揮抑癌基因作用?，F(xiàn)就mir-329的生物學(xué)功能及其在宮頸癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲方面的研究現(xiàn)狀進(jìn)行綜述。

一、mir-329的生物學(xué)功能

mir-329是中樞神經(jīng)系統(tǒng)表達(dá)的一種miRNA，定位于染色體14q32.31上。迄今已發(fā)現(xiàn)約12%人類miRNA基因分布在14號染色體該區(qū)域上，此區(qū)域存在不穩(wěn)定脆性，易發(fā)生基因雜合性丟失，是導(dǎo)致惡性腫瘤發(fā)生的危險(xiǎn)因素[5]。mir-329可作為一種腫瘤抑制因子在多種人類腫瘤中發(fā)揮作用，如膠質(zhì)母細(xì)胞瘤[6]、胰腺癌[7]、神經(jīng)母細(xì)胞瘤[8]等，且在上述腫瘤中呈低表達(dá)狀態(tài)。最新研究表明，宮頸癌組織中mir-329的表達(dá)水平明顯低于相鄰正常宮頸組織[9]，這使得研究宮頸癌組織中mir-329的表達(dá)水平與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展具有重要意義。

二、mir-329對宮頸癌細(xì)胞增殖遷移和侵襲能力的影響

腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲是其重要的生物學(xué)特征，其中遷移和侵襲是惡性腫瘤的特性。研究表明，宮頸癌相關(guān)靶基因內(nèi)皮生物標(biāo)志物CD146和絲裂原活化蛋白激酶MAPK1，與宮頸癌細(xì)胞的增殖遷移和侵襲現(xiàn)象具有相關(guān)性。

新生血管的生成對于生理性和病理性的組織細(xì)胞生成都是很重要的環(huán)節(jié)，抑制腫瘤新生血管形成是目前治療惡性腫瘤的重要方法之一[10]。腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中會產(chǎn)生不同的血管生成因子，如血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、腫瘤壞死因子(TNF)等，其中血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2)對血管生成起關(guān)鍵作用。最近研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮生物標(biāo)志物CD146可作為VEGFR-2的共同受體參與血管生成[11]，且在病理性血管生成期間異常上調(diào)的CD146增強(qiáng)了VEGF誘導(dǎo)的SRC激酶家族(SKF)/p38絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)/NF-κB活化的內(nèi)皮反應(yīng)，進(jìn)一步促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞遷移和血管形成[12]。Robert等[13]發(fā)現(xiàn)在宮頸上皮不典型增生(CIN)和宮頸鱗狀細(xì)胞癌(SCC)中，VEGF和VEGFR-2兩種形式都被鑒定表達(dá)，而在正常宮頸上皮中未檢測到上述因子。Cheng等[14]研究表明促進(jìn)腫瘤血管生成的重要黏附分子CD146在宮頸癌細(xì)胞中呈高表達(dá)狀態(tài)，Wang等[15]通過Western印跡分析和熒光素酶測定方法驗(yàn)證了CD146為mir-329的直接靶基因，同時(shí)在mir-329模擬物轉(zhuǎn)染后的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中抑制血管上過度表達(dá)的CD146，發(fā)現(xiàn)病理性血管生成的小鼠模型中顯著減弱了新血管的形成，該結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)CD146在血管生成中的表達(dá)受mir-329調(diào)控。綜上所述，mir-329通過靶向CD146而抑制新生血管的形成，從而在宮頸癌中發(fā)揮抑癌基因作用。

細(xì)胞異常的增殖和凋亡是腫瘤重要的病理學(xué)基礎(chǔ)[16]。研究表明，眾多信號通路參與并影響了腫瘤細(xì)胞的增殖、分化和凋亡，其中，MAPK是普遍存在于真核細(xì)胞中的一種高度保守的絲氨酸(Ser)/蘇氨酸(Thr)蛋白激酶，能將多種細(xì)胞外刺激產(chǎn)生的信號通過級聯(lián)反應(yīng)從細(xì)胞膜傳遞到細(xì)胞核內(nèi)，在細(xì)胞的增殖、分化及凋亡等多種生理和病理過程中發(fā)揮重要作用[17]。MAPKs成員之一MAPK1的表達(dá)與腫瘤關(guān)系密切，是眾所周知的致癌基因，已被證實(shí)在卵巢癌、非小細(xì)胞肺癌等多種人類癌癥中過度表達(dá)[18]。研究顯示，與配對的相鄰正常宮頸組織相比，宮頸癌組織中MAPK1的mRNA表達(dá)水平顯著上調(diào)[19]。Li等[9]采用Spearman相關(guān)分析顯示宮頸癌組織中mir-329與MAPK1的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)，此外，用si-MAPK1敲低HeLa和SiHa細(xì)胞中的MAPK1表達(dá)，結(jié)果顯示MAPK1的下調(diào)明顯抑制HeLa和SiHa細(xì)胞的增殖，其生物作用與mir-329過表達(dá)相似。值得注意的是，MAPK1表達(dá)的恢復(fù)顯著逆轉(zhuǎn)了由mir-329過表達(dá)引起的對HeLa和SiHa細(xì)胞增殖的抑制現(xiàn)象。這些結(jié)果表明，mir-329在宮頸癌中至少部分通過靶向MAPK1發(fā)揮腫瘤抑制作用。因此，mir-329和MAPK1可作為抗腫瘤治療的新型治療靶點(diǎn)進(jìn)行研究。

三、mir-329與宮頸癌患者預(yù)后

宮頸癌每年造成約53萬例新病例和27.5萬例死亡病例，宮頸癌患者的診治療效主要取決于臨床分期[20-2]。據(jù)報(bào)道，被診斷為宮頸癌晚期患者的5年生存率仍不令人滿意，腫瘤轉(zhuǎn)移約占所有與癌癥有關(guān)死亡的90%,是成功治療的主要障礙[22]。因此，宮頸癌進(jìn)展的可靠識別對其臨床治療及預(yù)后有重要意義。越來越多標(biāo)記物被用于預(yù)測宮頸癌的侵襲性研究，有報(bào)道指出miRNA與宮頸癌患者的預(yù)后相關(guān)，如mir-155[23]、mir-664[24]等，這表明miRNA可能是宮頸癌中一個(gè)新的預(yù)后標(biāo)記。Chang等[25]通過RT-PCR方法發(fā)現(xiàn)與正常的宮頸組織相比，宮頸癌組織中mir-329明顯下調(diào)，為了探討mir-329與宮頸癌患者的臨床病理參數(shù)之間的關(guān)聯(lián)，將宮頸癌患者依據(jù)mir-329的平均表達(dá)水平分成高mir-329表達(dá)組和低mir-329表達(dá)組，結(jié)果表明mir-329水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、FIGO分期和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)，而與其他臨床特征(包括年齡、腫瘤大小、組織學(xué)類型和腫瘤分化)之間沒有明顯的相關(guān)性。同時(shí)，Chang等[25]使用Kaplan-Meier方法發(fā)現(xiàn)mir-329表達(dá)水平較低的患者平均存活時(shí)間較mir-329表達(dá)水平較高的患者平均存活時(shí)間短，更重要的是，單變量和多變量Cox回歸分析表明，下調(diào)mir-329可能成為宮頸癌患者的獨(dú)立預(yù)后元素。這是首次在宮頸癌中強(qiáng)調(diào)mir-329的臨床預(yù)后意義，它可能是宮頸癌患者的潛在預(yù)后標(biāo)志物。

四、結(jié)語

綜上所述，mir-329在宮頸癌的發(fā)生發(fā)展及預(yù)測預(yù)后方面有著重要作用。盡管目前mir-329在宮頸癌方面的研究尚處于初步階段，臨床明確的相關(guān)靶基因也很有限。相信隨著后基因組時(shí)期的到來，基因組學(xué)研究的深入和分析方法的改進(jìn)，mir-329有望成為宮頸癌早期診斷及臨床診療的新方向，并為評估宮頸癌患者的臨床預(yù)后提供新的思路和依據(jù)。