兒科臨床抗菌藥物耐藥性研究

陳曉艷

（荊門市第一人民醫(yī)院南院兒科3病區(qū) 湖北 荊門 448000）

引言

隨著廣譜抗菌藥物的廣泛使用，細菌耐藥問題隨之而來，給臨床抗感染治療帶來嚴峻挑戰(zhàn)，這使得監(jiān)測臨床分離菌株的分布及耐藥性變遷變得尤為重要。近年來，細菌耐藥率隨抗菌藥物的廣泛使用逐漸升高，甚至出現(xiàn)多重耐藥菌、超級細菌、泛耐藥菌等，細菌耐藥的問題已成為全球性的公共醫(yī)療問題。

1 材料

菌株來源收集2009年1月至2018年12月某第一醫(yī)院兒科病房患者臨床送檢標本所分離細菌，對同一患者分離的重復(fù)菌株只用首次分離菌。質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923、糞腸球菌ATCC29212、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603、肺炎鏈球菌ATCC49619和流感嗜血桿菌ATCC49247。抗菌藥物氨芐西林、哌拉西林、阿莫西林/克拉維酸、頭孢哌酮/舒巴坦、氨芐西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢噻肟、頭孢吡肟、頭孢西丁、氨曲南、亞胺培南、美羅培南、阿米卡星、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、甲氧芐氨嘧啶一磺胺甲噁唑、多黏菌素、米諾環(huán)素、四環(huán)素、紅霉素、利福平、萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺。藥敏實驗用MH瓊脂培養(yǎng)基。

2 實驗方法

菌種鑒定和藥敏試驗按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》的常規(guī)方法進行細菌培養(yǎng)、分離與鑒定，用法國生物梅里埃的產(chǎn)品VITEK2－compact全自動細菌檢測系統(tǒng)以及美國BD－Phoenix100全自動細菌檢測系統(tǒng)及試劑進行藥敏試驗，按照美國實驗室標準化監(jiān)測所(CLSI)2015版標準，對藥物敏感結(jié)果進行分析。其中頭孢哌酮/舒巴坦及米諾環(huán)素用Kirby－Bauer法測量抑菌環(huán)直徑，頭孢哌酮/舒巴坦參考頭孢哌酮折點標準進行分析。質(zhì)控菌株為金葡菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853。β內(nèi)酰胺酶檢測用頭孢硝噻吩試驗定性檢測β內(nèi)酰胺酶，按CLSI推薦的紙片法篩選和酶抑制劑增強確認試驗檢測大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌和奇異變形菌中產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶(ES-BLs)菌株。耐萬古霉素腸球菌(VRE)檢測經(jīng)儀器法藥敏試驗測定結(jié)果為非敏感株者，用萬古霉素E－test條測定最低抑菌濃度(MIC)值。耐碳青霉烯類腸桿菌科細菌(CRE)對亞胺培南、美羅培南耐藥檢測用紙片擴散法或儀器法檢測，腸桿菌科細菌如果出現(xiàn)亞胺培南和(或)美羅培南不敏感菌株，需要用E－test條檢測其MIC值。泛耐藥株(XDR):指僅對1～2種潛在有抗菌活性的藥物(主要指替加環(huán)素和/或多黏菌素)敏感，對其余抗生素不敏感；多重耐藥株(MDR):指對通常敏感的3類或3類以上抗菌藥物同時呈現(xiàn)耐藥的細菌。

3 統(tǒng)計學處理

采用WHONET5.6統(tǒng)計軟件進行分析，計數(shù)資料用百分率表示。

4 結(jié)果

4.1 腸球菌屬

腸球菌屬對常用抗菌藥均有較高的耐藥率。屎腸球菌對大部分抗菌藥的耐藥性強于糞腸球菌，其中對氨芐西林的耐藥率為80.5%，遠高于糞腸球菌（2.8%）。尚未發(fā)現(xiàn)對替考拉寧、替加環(huán)素、萬古霉素和利奈唑胺耐藥的腸球菌。

4.2 葡萄球菌屬細菌對常用抗菌藥物的耐藥率

10年間金黃色葡萄球菌中，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的平均檢出率為24.1%(52例/216例)，MRSA主要分離自痰標本(25.0%)、血標本(13.5%)；MRCNS(甲氧西林耐藥凝固酶陰性葡萄球菌)的平均檢出率為72.3%(434例/600例)，主要分離自血標本(24.2%)、腦脊液標本(11.8%)。MRSA和MRCNS對大環(huán)內(nèi)酯類、喹諾酮類藥物的耐藥率均顯著高于MSSA(甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌)和MSCNS(甲氧西林敏感凝固酶陰性葡萄球菌)，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，MRSA中有73.1%菌株對甲氧芐啶－磺胺甲噁唑敏感，未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素和利奈唑胺耐藥的葡萄球菌。金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌對臨床常用抗菌藥物耐藥率。

4.3 非發(fā)酵糖革蘭陰性菌

不動桿菌屬中97.9%(508/519)為鮑曼不動桿菌，該菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為80.3%和79.1%，除對替加環(huán)素全部敏感以外，對米諾環(huán)素的敏感率也很高(97.6%)，但對大多數(shù)監(jiān)測抗菌藥物的耐藥率均＞70%；銅綠假單胞菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為29.7%和28.4%，對阿米卡星的敏感率最高，為91.0%。嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌對米諾環(huán)素和左氧氟沙星的敏感率均＞80%。

5 討論

隨著科學技術(shù)的發(fā)展，臨床細菌藥敏試驗方法和檢測儀器更加豐富。隨著廣譜抗菌藥物的廣泛使用，細菌耐藥問題隨之而來，給臨床抗感染治療帶來嚴峻挑戰(zhàn)，這使得監(jiān)測臨床分離菌株的分布及耐藥性變遷變得尤為重要。

綜上所述，兒科病房臨床標本中分離的MRSA、耐碳青霉烯類腸桿菌科細菌(CRE)和耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌(CRAB)檢出率不斷增加，應(yīng)采取行之有效的感染控制措施。