塞內(nèi)加爾病毒特異性重組分析揭示了塞尼卡病毒聚合酶保真性與病毒重組發(fā)生的相關(guān)性

塞尼卡病毒(SVA)是一種新出現(xiàn)的感染豬并可導(dǎo)致仔豬死亡的病毒。最近的研究顯示，SVA 在豬體內(nèi)可發(fā)生重組，表明了重組在SVA 進(jìn)化過程中的重要性。越來越多的研究表明，病毒聚合酶保真性的改變能顯著降低病毒的毒力，而且病毒聚合酶也是影響病毒重組的主要因素。因此，通過提高病毒聚合酶的保真性獲得重組缺陷病毒株、不但具有重要的理論價(jià)值，作為可使減毒株更加安全的技術(shù)手段、也具有疫苗開發(fā)的應(yīng)用價(jià)值。由于微RNA 病毒科的病毒均具有高度的變異性和復(fù)雜性，通過提升病毒聚合酶的保真性、結(jié)合其它減毒策略，可獲得足夠安全和有效的減毒活疫苗候選毒株。

近期，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所牛羊傳染病研究創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)發(fā)表于《Journal of Virology》的研究報(bào)告揭示了在SVA 聚合酶保真性與病毒重組方面取得新進(jìn)展。該研究利用前期分離的一株SVA SVA/HLJ/CHA/2016 (Arch Virol.2017)，建立了該毒株的反向遺傳系統(tǒng)，在此基礎(chǔ)上構(gòu)建了SVA 報(bào)告病毒。采用有限稀釋法進(jìn)行篩選，成功獲得兩株SVA的重組缺陷毒株SVA-S460L 和SVA-I212V/S460L。利用建立的基于細(xì)胞的重組率檢測系統(tǒng)，檢測發(fā)現(xiàn)這兩株突變病毒的重組率較親本病毒分別下降了5.62 倍和31.62 倍；高通量測序分析也顯示，這兩株SVA 重組缺陷病毒的變異頻率顯著下降、聚合酶保真性明顯升高。重組缺陷SVA 對抗病毒藥物利巴韋林的作用更敏感，進(jìn)一步證明了重組頻率的下降與聚合酶的保真性密切相關(guān)。

該牛羊病團(tuán)隊(duì)，多年來致力于微RNA 病毒人工修飾和減毒的研究，選擇的靶向病毒是口蹄疫病毒和SVA，已取得一系列研究進(jìn)展。前期該團(tuán)隊(duì)利用口蹄疫病毒進(jìn)行的研究發(fā)現(xiàn)，病毒聚合酶的保真性改變導(dǎo)致病毒減毒。本研究證明了SVA 重組的發(fā)生率與變異頻率密切相關(guān)，而病毒的變異頻率是由其RNA 依賴性RNA 聚合酶的保真性決定的。該結(jié)果不但具有基礎(chǔ)病毒學(xué)理論價(jià)值，也為人工構(gòu)建更安全有效的RNA 病毒減毒疫苗開辟了新的途徑。

評述論文來源：Li C, Wang H, Shi J, et al.Senecavirus-specific recombination assays reveal the intimate link between polymerase fidelity and RNA recombination [J].J Virol.2019 Apr 17.pii: JVI.00576-19.DOI:10.1128/JVI.00576-19.