麒麟竭果殼化學(xué)成分的研究

朱仝飛， 孫慶文， 閆志慧?， 李 萍?

（1.重慶醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，重慶 401331；2.重慶市藥物制劑工程技術(shù)研究中心，重慶 401331；3.貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院，貴州貴陽(yáng) 550025）

麒麟竭Daemonorops draco Bl.為棕櫚科黃藤屬多年生藤本植物，該植物主要分布于東南亞，如印度尼西亞、馬來西亞、中國(guó)臺(tái)灣等國(guó)家或地區(qū)。麒麟竭的果殼外表面能夠分泌出一種紅色樹脂，將果殼與紅色樹脂分離，收集紅色樹脂部分，該紅色樹脂即被命名為血竭，其味甘、溫、咸、平，具有止血收斂、活血化瘀、促進(jìn)組織復(fù)原等功效，為一種名貴的中藥材。現(xiàn)代研究表明，血竭具有抗菌、抗病毒[1-2］、 抗腫瘤[3-4］、 止血、 活血[5-6］等作用。

長(zhǎng)期以來，國(guó)內(nèi)對(duì)麒麟竭中的化學(xué)成分主要集中在對(duì)血竭中血竭素的穩(wěn)定性或提取工藝的研究[7-10］，從中分離出的化合物大多為黃酮類及萜類化合物[11-14］。通常情況下，將去除紅色樹脂后的麒麟竭果殼當(dāng)作廢料棄去，而其中的化學(xué)成分更未有過系統(tǒng)的研究。為全面考察麒麟竭的有效成分，本研究對(duì)去除紅色樹脂后的麒麟竭果殼進(jìn)行化學(xué)成分分離與鑒定，從中分離得到10個(gè)化合物，所有化合物均為從中首次分離得到。以期為明確麒麟竭的活性成分，進(jìn)一步拓展其藥用價(jià)值提供了理論依據(jù)。

1 儀器與試劑

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 （德國(guó) IKA公司）；Bruker AVANCE-400型核磁共振光譜儀 （瑞士Bruker公司）；ZF-Z型三用紫外檢測(cè)儀 （上海市安亭電子儀器廠）；柱層析硅膠 （青島海洋化工廠）；制備型薄層硅膠F254（德國(guó)Merck公司）；Sephadex LH-20（美國(guó)Amersham Pharmacia Biotech公司）；化學(xué)試劑均為分析純。

藥材購(gòu)買自重慶慧遠(yuǎn)藥業(yè)有限公司，經(jīng)貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院孫慶文教授鑒定為麒麟竭Daemonorops draco Bl.的果殼，樣品標(biāo)本保存于重慶醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校標(biāo)本館，標(biāo)本編號(hào)20161220。

2 提取與分離

麒麟竭的干燥果殼5.0 kg，用6 L甲醇超聲500 W條件下提取3次，每次2 h，提取液減壓濃縮回收溶劑，得浸膏0.72 kg（收率14.4%）。浸膏混懸于適量蒸餾水中，依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇進(jìn)行萃取，減壓濃縮回收溶劑后，得石油醚浸膏52 g，取20 g，加二氯甲烷-丙酮 （2∶1）溶液溶解，經(jīng)硅膠柱色譜，石油醚-丙酮 （30∶1～5∶1） 梯度洗脫，得7組流份Fr.1～7。

Fr.1（7.3 g）經(jīng)硅膠柱色譜及反復(fù)重結(jié)晶，得化合物 1（33.6 mg）、 2（19.8 mg）； Fr.3（3.5 g）經(jīng)硅膠柱色譜經(jīng)石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得6組亞流分 Fr.3-1～3-6，F(xiàn)r.3-3（201.3 mg）經(jīng)Sephadex LH-20、制備薄層色譜，得化合物 3（8.8 mg）、 4 （10.7 mg）、 5 （13.2 mg）； Fr.5（1.2 g）經(jīng)硅膠柱色譜，二氯甲烷-丙酮梯度洗脫，得5個(gè)亞流分Fr.5-1～5-5，F(xiàn)r.5-3（104.2 mg） 經(jīng)Sephadex LH-20、制備薄層色譜，得化合物6（8.2 mg）、 7 （11.5 mg）； Fr.6 （4.7 g） 經(jīng)硅膠柱色譜，二氯甲烷-甲醇梯度洗脫，得5個(gè)亞流分Fr.6-1～6-5， Fr.6-1（62.7 mg） 經(jīng) Sephadex LH-20、 反復(fù)重結(jié)晶，得化合物 8（8.2 mg）；Fr.6-3（95.8 mg）經(jīng)Sephadex LH-20、反復(fù)重結(jié)晶，得化合物 9（17.2 mg）、 10 （21.7 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色針晶 （甲醇），易溶于三氯甲烷，且Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽(yáng)性，表明該化合物可能為甾體化合物。進(jìn)一步將樣品與β-谷甾醇標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行薄層色譜分析，兩者在3種展開劑色譜行為下Rf值及顯色行為完全一致，兩者混合后熔點(diǎn)不下降，因此鑒定為β-谷甾醇。

化合物2：白色固體，ESI-MS m／z：435[M+Na］+。1H-NMR （500 MHz， CDCl3） δ： 5.36 （1H， d，J＝ 5.2 Hz， H-6）， 5.14 （1H， m， H-22）， 5.01（1H，m，H-23），3.53 （1H，m，H-3），1.02 （3H，s， 19-CH3）， 0.82 （3H， t， J＝7.2 Hz， H-29）， 0.71（3H， s， 18-CH3）；13C-NMR （125 MHz， CDCl3） δ：37.2 （C-1）， 31.7 （C-2）， 71.8 （C-3）， 42.3 （C-4）， 140.7 （C-5），121.7 （C-6），31.9 （C-7），31.9（C-8）， 50.2 （C-9）， 36.5 （C-10）， 21.1 （C-11），39.7 （C-12）， 42.2 （C-13）， 55.9 （C-14）， 24.4（C-15）， 28.9 （C-16）， 56.9 （C-17）， 12.0 （C-18）， 19.4 （C-19）， 40.5 （C-20）， 21.2 （C-21），138.3 （C-22）， 129.3 （C-23）， 51.2 （C-24）， 31.9（C-25）， 19.0 （C-26）， 21.1 （C-27）， 25.4 （C-28），12.2（C-29）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn) [15]基本一致，故鑒定為豆甾醇。

化合物3：白色固體，ESI-MS m／z：311[M+Na］+。1H-NMR （500 MHz， CDCl3） δ： 2.22 （1H，brd，J＝13.2 Hz， H-5）， 4.86 （1H， brd， J＝8.0 Hz， H-7α），7.16 （1H， d， J＝8.0 Hz， H-11），7.10（1H， dd， J＝8.0， 1.2 Hz， H-12）， 7.42 （1H， brs，H-14）， 2.87 （1H， sept， J＝ 6.8 Hz， H-15）， 1.24（6H， d， J＝ 6.8 Hz， 16， 17-CH3）， 1.24 （3H， s，19-CH3）， 1.21 （3H， s， 20-CH3）；13C-NMR （125 MHz， CDCl3） δ： 38.0 （C-1）， 20.4 （C-2）， 42.5（C-3）， 71.8 （C-4）， 50.9 （C-5）， 29.1 （C-6），70.9 （C-7）， 137.7 （C-8）， 146.2 （C-9）， 38.8 （C-10），124.5 （C-11），125.3 （C-12），146.5 （C-13），125.9 （C-14）， 33.7 （C-15）， 24.8 （C-16）， 24.1（C-17），23.1（C-19），23.9 （C-20）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn) [16］基本一致，故鑒定為18-降去氫松香酸-4α， 7β-二醇。

化合物 4：無(wú)色針晶 （甲醇），ESI-MS m／z：323 [M+Na］+。1H-NMR （500 MHz， CDCl3） δ： 7.17（1H，d，J＝8.4 Hz，H-11），7.00（1H，brd，J＝8.4 Hz， H-12）， 6.89 （1H， brs， H-14）， 2.82 （1H，sept， J＝7.0 Hz， H-15）， 2.25 （1H， dd， J＝12.6，1.8 Hz， H-5）， 1.22 （6H， d， J＝ 6.9 Hz， H-16，17）， 1.29 （3H， s， H-19）， 1.21 （3H， s， H-20）；13C-NMR （125 MHz， CDCl3） δ： 37.7 （C-1）， 18.3（C-2）， 36.5 （C-3）， 47.2 （C-4）， 44.3 （C-5），21.5 （C-6）， 29.7 （C-7），134.5 （C-8），146.5 （C-9）， 36.6 （C-10）， 123.9 （C-11）， 123.6 （C-12），145.5 （C-13）， 126.7 （C-14）， 33.2 （C-15）， 23.7（C-16）， 23.7 （C-17）， 184.7 （C-18）， 16.0 （C-19），24.9（C-20）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn) [17]基本一致，故鑒定為去氫松香酸。

化合物5：白色固體，ESI-MS m／z：339[M+Na］+。1H-NMR （500 MHz， CDCl3） δ： 7.20 （1H，brs， H-14），7.18 （1H， d， J＝8.4 Hz， H-11），7.13（1H， dd， J＝8.4， 1.6 Hz， H-12）， 4.82 （1H， d，J＝3.2 Hz， H-7β）， 2.87 （1H， sept， J＝6.8 Hz， H-15）， 2.48 （1H， brd， J＝ 12.4 Hz， H-5）， 1.24（6H， d， J＝6.8 Hz， H-16， 17）， 1.27 （3H， s， H-19）， 1.17 （3H， s， H-20）；13C-NMR （125 MHz，CDCl3） δ： 37.6 （C-1）， 18.8 （C-2）， 36.4 （C-3），47.2 （C-4）， 40.0 （C-5）， 31.1 （C-6）， 68.5 （C-7）， 135.8 （C-8）， 146.9 （C-9）， 37.9 （C-10），124.5 （C-11）， 126.9 （C-12）， 146.8 （C-13），128.5 （C-14）， 33.8 （C-15）， 24.3 （C-16）， 24.1（C-17）， 182.5 （C-18）， 16.5 （C-19）， 31.1 （C-20）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn) [17］基本一致，故鑒定為7α-羥基去氫松香酸。

化合物6：白色粉末，ESI-MS m／z：334[M+Na］+。1H-NMR （500 MHz， CDCl3） δ： 3.88 （1H，m， H-2α），5.19 （1H，brs，H-14），5.72（1H，dd，J＝17.2，10.4 Hz，H-15），4.96 （1H，dd，J＝10.4，2.0 Hz， H-16）， 4.91 （1H， dd， J＝17.2， 2.0 Hz，H-16）， 0.99 （3H， s， 17-CH3）， 1.24 （3H， s， 19-CH3）， 0.82 （3H， s， 20-CH3）；13C-NMR （125 MHz，CDCl3） δ： 47.7 （C-1）， 64.9 （C-2）， 45.6 （C-3），48.7 （C-4）， 48.6 （C-5）， 35.7 （C-6）， 24.3 （C-7）， 137.0 （C-8），51.7 （C-9），39.6 （C-10），19.3（C-11）， 35.3 （C-12）， 38.9 （C-13）， 129.4 （C-14）， 147.4 （C-15）， 113.2 （C-16）， 29.6 （C-17），183.1 （C-18）， 18.1 （C-19）， 16.2 （C-20）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn) [16］基本一致，故鑒定為2β-羥基海松酸。

化合物7：無(wú)色針晶，ESI-MS m／z：175[M+Na］+。1H-NMR （500 MHz， CDCl3） δ： 9.83 （1H， s，-CHO）， 7.44 （1H， dd， J＝ 6.1， 1.9 Hz， H-5），7.42 （1H，d，J＝1.9 Hz，H-3），7.04 （1H， d， J＝6.1 Hz， H-6）， 3.96 （3H， s， -OCH3）；13C-NMR（125 MHz， CDCl3） δ： 190.4 （-CHO）， 151.8 （C-2）， 147.3 （C-1）， 130.1 （C-3）， 127.7 （C-6），114.5 （C-5）， 108.9 （C-4）， 56.3 （-OCH3）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn) [18］基本一致，故鑒定為香草醛。

化合物8：無(wú)色針晶，ESI-MS m／z：311[M+Na］+。1H-NMR （ DMSO-d6， 500 MHz） δ： 6.68（1H， d， J＝8.0 Hz， H-5′），6.59 （1H， dd， J＝8.0，1.6 Hz， H-6′）， 6.72 （1H， d， J＝ 1.6 Hz， H-2′），5.68 （1H，d，J＝2.0 Hz，H-6），5.88 （1H， d， J＝2.0 Hz， H-8）， 4.47 （1H， d， J＝ 7.2 Hz， H-2），3.81（1H，m，H-3），2.65（1H，dd，J＝16.0，7.2 Hz， H-4）， 2.35 （1H， dd， J＝ 16.0， 8.0 Hz， H-4）；13C-NMR （DMSO-d6， 125 MHz） δ： 80.9 （C-2）， 66.3 （C-3）， 27.8 （C-4）， 155.3 （C-5）， 95.1（C-6）， 156.4 （C-7）， 93.8 （C-8）， 156.1 （C-9），99.0 （C-10）， 130.6 （C-1′）， 115.0 （C-2′）， 144.8（C-3′）， 144.8 （C-4′）， 114.5 （C-5′）， 118.4 （C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn) [19］基本一致，故鑒定該為兒茶素。

化合物9：白色針晶。ESI-MS m／z：145[M+Na］+。1H-NMR （ DMSO-d6， 500 MHz） δ： 9.79（1H， s， H-1）， 7.76 （2H， d， J＝9.0 Hz， H-3， 7），6.94 （2H， d， J ＝ 9.0 Hz， H-4， 6）；13C-NMR（DMSO-d6， 125 MHz） δ： 189.6 （C-1）， 162.5 （C-5）， 131.8 （C-3， 7）， 129.2 （C-2）， 115.8 （C-4，6）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn) [20］基本一致，故鑒定為對(duì)羥基苯甲醛。

化合物10：白色粉末，易溶于甲醇。Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽(yáng)性，與已知胡蘿卜苷標(biāo)準(zhǔn)品共薄層，在3種展開劑色譜行為下Rf值及顯色行為完全一致，兩者混合后熔點(diǎn)不下降，故鑒定為胡蘿卜苷。