• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    切花菊苗期抗寒性評價及相關的分子標記挖掘

    2019-01-09 08:05:06徐婷婷遲天華管志勇房偉民陳發(fā)棣
    核農學報 2019年1期
    關鍵詞:致死溫度切花抗寒

    徐婷婷 馬 杰 遲天華 葉 丹 管志勇 房偉民 陳發(fā)棣 張 飛

    (南京農業(yè)大學園藝學院,江蘇南京 210095)

    低溫是影響植物地理分布和生長發(fā)育的重要環(huán)境限制因子之一。對觀賞植物而言,低溫不僅會影響其生長發(fā)育,嚴重時還會引發(fā)凍害,影響花型、花色等觀賞性狀表達,降低觀賞品質和經濟效益[1]。菊花(Chrysanthemum morifolium)為菊科菊屬多年生宿根花卉,是我國十大傳統(tǒng)名花和世界四大切花之一,觀賞和經濟價值較高,在花卉生產中占有重要的地位。冬季長期低溫使菊花品種開花延遲[2],影響成花品質,特別是在切花菊周年生產中,冬季加溫增加生產成本、污染環(huán)境。因此,迫切需要挖掘利用抗寒基因資源、培育抗寒新品種以解決切花菊冬季高效生產,實現(xiàn)節(jié)本增效。

    目前,關于菊花抗寒性的研究主要集中在評價體系[3-4]、生理機制[5-7]、優(yōu)異基因挖掘[8-11]和種質創(chuàng)新[12-15]等方面,而對菊花抗寒性分子標記的相關研究尚鮮見報道。為明確切花菊抗寒性的遺傳變異,挖掘優(yōu)異抗寒基因資源,本研究利用電導率結合Logistic方程評價了83個切花菊品種苗期葉片的低溫半致死溫度(semi-lethal temperature,LT50),并結合前期報道的分子標記數(shù)據(jù)[16]通過關聯(lián)分析挖掘與抗寒性相關的優(yōu)異等位變異位點,并篩選抗性品種資源,以期為菊花抗寒性的遺傳改良提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    供試材料為83個切花菊品種(表1),均由南京農業(yè)大學中國菊花種質資源保存中心提供。于2017年8月初采取插穗進行扦插,8月下旬定植于南京農業(yè)大學花卉基地湖熟現(xiàn)代農業(yè)示范園,進行常規(guī)管理。

    1.2 低溫處理與相對電導率的測定

    參照郭海林等[17]的方法并略加改進,于苗期采集83個切花菊品種的葉片,每個品種15片,采集葉片的位置和大小基本相同,去離子水漂洗3次,再用去離子水浸潤的紗布包裹葉片后置于試管內,4℃冷藏過夜[18]。次日利用9610型低溫循環(huán)儀(Polyscience公司,美國)進行低溫處理。低溫循環(huán)溫度梯度分別設置為 3、0、-3、-6 和-9℃,處理時間均為 1 h,勻速降溫30 min,每個低溫處理結束后,取出試管于4℃冰箱內解凍,低溫處理結束后將每個低溫處理的葉片分裝于試管,加入25 mL去離子水浸泡15 h,利用DDS-307型電導率測定儀(上海雷磁儀器有限公司)測定葉片煮沸前電導率,沸水浴15 min后冷卻至室溫并測定電導率,按照公式計算各處理的相對電導率(relative electric conductivity,REC):

    每處理3次重復,取平均值。

    1.3 低溫半致死溫度

    利用相對電導率擬合Logistic回歸方程計算低溫半致死溫度LT50(℃)。回歸方程為:

    式中,Y:細胞傷害率;x:低溫處理溫度;K:細胞傷害率的飽和容量;a、b:均為方程參數(shù)。將方程進行線性化處理以此確定a,b值,ln[(K-y)/y]=ln(a-bx),令y=ln[(K-y)/y],則轉化為細胞傷害率(y)與處理溫度(x)的直線方程。參照許瑛等[4]的方法,通過線性化處理和直線回歸的方法求出 a、b值及擬合度(R2),半致死溫度 LT50=In[(1/a)]/b。采用 SPSS v20軟件進行LT50的描述性統(tǒng)計分析和聚類分析。

    1.4 切花菊耐寒性與分子標記關聯(lián)分析

    基于Li等[16]報道的707個 SRAP、SSR、SCoT等分子標記數(shù)據(jù),利用STRCTURE v2.3.3軟件評價83個切花品種進行群體結構(K=2)及各品種的Q值;利用SPAGeDi v1.4軟件進行親緣關系分析,得到親緣關系系數(shù)Kinship矩陣(86.9%品種間親緣關系系數(shù)小于0.1)。在此基礎上,利用TASSLE v5.0軟件中的混合線性模型(mixed linear model,MLM)進行抗寒性(LT50)與分子標記的關聯(lián)分析,同時將群體結構分析中得到的各品種的Q值和親緣關系分析中得到的Kinship矩陣作為協(xié)變量計入模型中,若P<0.01則認為標記位點與目標性狀有顯著關聯(lián)?;陉P聯(lián)分析得到的顯著位點,計算出每個位點等位基因缺失和等位基因存在的LT50均值,用等位基因存在的LT50均值減去等位基因缺失的LT50均值,從而得到每個位點的表型效應值[19-20]。LT50越小,抗寒性越強,并據(jù)此判斷表型效應值為負值的位點為有利等位變異位點。

    2 結果與分析

    2.1 Logistic回歸模型的建立及LT50的確定

    根據(jù)供試材料在不同低溫處理下的相對電導率得到Logistic曲線、Logistic方程及其擬合度和半致死溫度。電解質漏滲率測定結果以切花菊品種Qx151為例(圖1),5 個點對應的溫度分別為 3、0、-3、-6 和-9℃,REC隨著溫度的下降而逐漸上升,其中3~-3℃時,隨著溫度的降低電解質滲出率較快;-3~-6℃時電解質滲出率上升比較緩慢;-6~-9℃時電解質滲出率基本趨于穩(wěn)定,隨著溫度的降低,相對電導率的變化呈明顯的S型曲線,拐點溫度即為半致死溫度。由表1可知,所有供試材料模擬Logistic方程的擬合度均達到顯著水平,LT50的變化范圍為-10.99(Qx-097)~1.86℃(Qx-007)。

    圖1 不同低溫處理后切花菊Qx151離體葉片電導率擬合Logistic方程曲線Fig.1 Logistic equation based on REC from detached leaves of QX151 after different low temperature treatments

    表1 83個切花菊的相對電導率回歸方程及低溫半致死溫度(LT50)Table1 REC logistic equation and LT50of the 83 cut chrysanthemum cultivars

    表1(續(xù))

    表1(續(xù))

    2.2 菊花苗期耐寒性的表型數(shù)據(jù)

    由表2可知,切花菊的 LT50介于-10.99~1.86℃之間,平均值為-4.31℃,變異系數(shù)為79.81%,離散程度較大,說明切花菊品種的耐寒性差異較大。LT50在供試材料中的偏度和峰度分別為-0.68和0.91,絕對值均小于1,表明切花菊苗期耐寒性屬于多基因控制的數(shù)量性狀。

    表2 83個菊花品種苗期耐寒性(低溫半致死溫度)的描述性數(shù)據(jù)Table2 Descriptive statistics for cold tolerance(LT50)of 83 cut chrysanthemum cultivars at seedling stage

    2.3 LT50的聚類分析

    依據(jù)LT50對83個切花菊品種進行聚類分析,由表3可知,83個切花菊品種的抗寒能力分為四類:第一類抗寒型,LT50低于-7.38℃,包括 Ox-011、Ox-114、Ox-054等18個品種,占供試材料的21.67%;第二類中抗寒型,LT50為-6.51~ -4.45℃,包括 Qx-006、Qx-034、QD-005等19個品種,占供試材料的22.89%;第三類低抗寒型,LT50為-4.27~-2.17℃,包括 Ox-030、南農紫唇、Ox-146等27個品種,占供試材料的32.53%;第四類不抗寒型,LT50為-1.78~1.86℃,包括 QD007、南農紅霞、南農玉珠等 19個品種,占供試材料的22.89%。

    表3 83個切花菊品種的LT50聚類分析結果及抗寒能力Table3 Clustering result of LT50and cold resistance for 83 cut chrysanthemum cultivars

    2.4 抗寒性相關的分子標記

    基于MLM方法的關聯(lián)分析共計檢測到11個標記位點與品種的耐寒性顯著關聯(lián)(P<0.01),單個關聯(lián)位點的表型效應值為-3.51~0.83,表型變異解釋率為11.37%~18.83%(表4)。 其中,E2M16-1、E2M16-4和E2M16-8的效應值為正,為抗寒性不利位點;其余8個關聯(lián)位點的效應值為負,為抗寒性有利位點。由8個增效位點的箱線圖(圖2)可知,僅位點E7M12-13在P<0.01水平顯著。結合LT50表型數(shù)據(jù),攜帶該位點且抗寒性較好的品種有南農金檸檬、Qx097、QD028、Qx049、Qx153 和 Qx008。

    3 討論

    抗寒性是菊花重要育種目標性狀之一,抗寒基因資源的挖掘和利用是開展抗寒育種的重要前提。Dexfer等[21]首次釆用電導法進行植物抗寒性評價,發(fā)現(xiàn)植物組織受寒害程度越高電導率越大。由于不同物種之間電解質豐度不同,相對電導率比電導率更能準確的表達組織受傷害的程度[22-23]。細胞電解質滲出率為50%時的溫度則為該材料的低溫半致死溫度,將相對電導率結合Logistic方程回歸分析計算LT50已成為評價植物抗寒性的常用方法[24-28]。Kim等[3]通過測定LT50和腳芽生長量鑒定了菊花的抗寒性;許瑛等[4]通過菊花腳芽葉片相對電導率結合LT50評價了菊花在秋冬季不同降溫時期的抗寒性;王翠麗等[29]發(fā)現(xiàn)菊花葉片亞麻酸/(亞油酸和油酸)比值可作為評價秋菊抗寒性的有效指標,且認為不飽和脂肪酸含量結合LT50可快速鑒定抗寒菊花品種。上述研究表明,LT50是菊花抗寒性鑒定評價的重要參考依據(jù)之一。本研究通過LT50評價了83個切花菊品種的抗寒性,發(fā)現(xiàn)LT50離散程度較大(變異系數(shù)為79.81%),并篩選到部分抗寒品種資源,為后續(xù)抗寒育種利用提供了重要親本材料。

    表4 在P<0.01水平下與抗寒性顯著相關的標記Table4 Markers significantly associated with cold tolerance at P<0.01 level

    關聯(lián)分析是開展數(shù)量性狀遺傳研究的重要手段之一[30-32],已成功用于挖掘植物抗寒優(yōu)異基因資源或等位變異。Huang等[33]利用關聯(lián)分析在玉米發(fā)芽期和苗期檢測到40個SNP與10個抗寒性狀相關;Visioni等[34]通過關聯(lián)分析挖掘到2個大麥抗寒相關SNP與已知QTL位點重疊。近年來,關聯(lián)分析在菊花耐澇性[20]、抗蚜性[35]和其他園藝性狀[18,36]優(yōu)異等位變異挖掘中均有相關報道。本研究基于前期報道的707個分子標記[18],利用MLM法挖掘到8個抗寒相關有利位點,其中有1個分子標記位點(E7M12-13)的表型效應值達到顯著水平(P<0.01)。結合LT50表型數(shù)據(jù),發(fā)現(xiàn)攜帶E7M12-13位點且抗寒性較好的品種有南農金檸檬、Qx097、QD028、Qx049、Qx153 和 Qx008,均可作為重要的親本材料加以利用。此外,通過與 Li等[16]研究比較,發(fā)現(xiàn)本研究中有3個抗寒性相關標記位點(E2M16-2、E2M16-1和 E11M23-14)分別與花期、花頸長度和葉緣鋸齒相關。鑒于抗寒性與這些園藝性狀是不同類型的性狀,推測可能是由于連鎖引起的。這為今后通過間接篩選耐寒品種提供了初步證據(jù),同時也為改良菊花耐寒性和其他園藝性狀提供了理論依據(jù)。本研究利用了707個SRAP、SCoT等多態(tài)性分子標記位點,但檢測到的抗寒性相關等位變異位點主要集中在 E2M16、E7M12和 E11M23等 3對SRAP引物組合擴增出的多態(tài)性位點中,說明這些顯性標記位點在抗寒性關聯(lián)分析中有其局限性。因此,在今后研究中應進一步利用基于高通量測序的SNP等分子標記開展相關研究,為高效挖掘菊花耐寒優(yōu)異等位變異及其相關的候選基因奠定重要基礎。

    4 結論

    本研究明確了83個切花菊品種的低溫半致死溫度(LT50)介于-10.99~1.86℃之間,變異系數(shù)達79.81%,通過聚類分析將其分為抗寒、中抗寒、低抗寒和不抗寒4種類型;檢測到8個抗寒有利位點,其中E7M12-13的表型效應值達到顯著水平(P<0.01),并篩選到攜帶該有利位點的6個抗寒品種。本研究結果為切花菊抗寒性的遺傳改良和分子標記輔助選擇育種提供了理論依據(jù)。

    猜你喜歡
    致死溫度切花抗寒
    納米銀和1-MCP處理對月季切花的保鮮作用
    抗寒桂花香飄果博會
    蘋果矮化砧木抗寒育種研究進展
    河北果樹(2020年4期)2020-11-26 06:04:28
    取樣部位、時間對植物高溫半致死溫度的影響
    切花生產技術
    番茄黑斑病病原菌的鑒定及生物學特性研究
    3種茜草科植物的抗寒特性
    遼西劍蘭切花生產技術要點
    熱處理松材線蟲在實際生存環(huán)境中的致死溫度
    給豬喂哪些飼料可抗寒
    日韩欧美一区二区三区在线观看| 色综合站精品国产| 成人国产一区最新在线观看| 中文资源天堂在线| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 成人无遮挡网站| 在线永久观看黄色视频| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产激情偷乱视频一区二区| av女优亚洲男人天堂 | 99久久精品国产亚洲精品| 亚洲无线在线观看| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产成人系列免费观看| 男女床上黄色一级片免费看| 天堂动漫精品| 国产一区二区在线av高清观看| 国产男靠女视频免费网站| 白带黄色成豆腐渣| 夜夜躁狠狠躁天天躁| av片东京热男人的天堂| 91久久精品国产一区二区成人 | 黄色成人免费大全| 国产探花在线观看一区二区| 成年免费大片在线观看| 久久精品91无色码中文字幕| 国产午夜精品久久久久久| 丁香欧美五月| 亚洲电影在线观看av| 国产熟女xx| 一本精品99久久精品77| 午夜激情欧美在线| 午夜亚洲福利在线播放| 啦啦啦免费观看视频1| 免费看光身美女| 热99re8久久精品国产| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 亚洲成人久久性| 日本熟妇午夜| 看免费av毛片| 特大巨黑吊av在线直播| 午夜精品在线福利| 我要搜黄色片| 天堂动漫精品| 99re在线观看精品视频| 两个人的视频大全免费| 日本熟妇午夜| 美女被艹到高潮喷水动态| 91麻豆av在线| 麻豆国产av国片精品| 成人午夜高清在线视频| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 午夜福利欧美成人| 午夜福利高清视频| 国产乱人伦免费视频| 亚洲中文日韩欧美视频| 一本精品99久久精品77| 首页视频小说图片口味搜索| 一本一本综合久久| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 哪里可以看免费的av片| 国产不卡一卡二| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 在线观看免费视频日本深夜| 欧美乱码精品一区二区三区| 最新美女视频免费是黄的| 桃色一区二区三区在线观看| 久久午夜亚洲精品久久| 成人午夜高清在线视频| 欧美一区二区国产精品久久精品| 国产精品久久久人人做人人爽| 人人妻人人澡欧美一区二区| 一区二区三区激情视频| 亚洲欧美日韩东京热| 成人欧美大片| 最近最新中文字幕大全电影3| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 俄罗斯特黄特色一大片| 男女床上黄色一级片免费看| 国产不卡一卡二| 午夜福利在线在线| 国产一级毛片七仙女欲春2| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 99久久精品一区二区三区| 色尼玛亚洲综合影院| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 日本一二三区视频观看| 岛国在线免费视频观看| 哪里可以看免费的av片| 色综合亚洲欧美另类图片| 在线视频色国产色| 亚洲专区中文字幕在线| 九九在线视频观看精品| 又黄又爽又免费观看的视频| 人人妻人人看人人澡| 久久久久久久久免费视频了| 欧美中文综合在线视频| 日本黄色片子视频| 女警被强在线播放| 两性夫妻黄色片| 夜夜爽天天搞| 午夜亚洲福利在线播放| 九九热线精品视视频播放| 亚洲18禁久久av| 国产精品一及| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 欧美av亚洲av综合av国产av| 精品电影一区二区在线| 亚洲专区国产一区二区| 免费看光身美女| 欧美日韩国产亚洲二区| 真人做人爱边吃奶动态| 看免费av毛片| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产精品永久免费网站| 色av中文字幕| 狂野欧美激情性xxxx| 在线看三级毛片| 可以在线观看的亚洲视频| 成年人黄色毛片网站| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产成人精品久久二区二区91| 我要搜黄色片| 久久中文字幕人妻熟女| 国产高清激情床上av| 日韩欧美 国产精品| 国产探花在线观看一区二区| 久久热在线av| 制服人妻中文乱码| 午夜成年电影在线免费观看| 老司机福利观看| 国产v大片淫在线免费观看| 欧美丝袜亚洲另类 | 欧美一区二区国产精品久久精品| 久久精品影院6| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 1024香蕉在线观看| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 国产成人系列免费观看| 婷婷精品国产亚洲av在线| 久久久久久九九精品二区国产| 色哟哟哟哟哟哟| 亚洲电影在线观看av| 国产亚洲av高清不卡| 国产精品1区2区在线观看.| 不卡av一区二区三区| 香蕉久久夜色| 91在线观看av| 成人精品一区二区免费| 一级毛片精品| 久久久精品大字幕| 国产精品一区二区免费欧美| 亚洲天堂国产精品一区在线| 久久午夜综合久久蜜桃| 中文字幕最新亚洲高清| 国产aⅴ精品一区二区三区波| www.熟女人妻精品国产| 日本在线视频免费播放| 欧美国产日韩亚洲一区| 国产高清videossex| 午夜久久久久精精品| 亚洲天堂国产精品一区在线| 最近最新中文字幕大全电影3| 九色国产91popny在线| 亚洲人成网站高清观看| 久久久久精品国产欧美久久久| 在线播放国产精品三级| 最近最新中文字幕大全电影3| 黑人欧美特级aaaaaa片| 淫妇啪啪啪对白视频| 99精品在免费线老司机午夜| 国产伦精品一区二区三区四那| 91老司机精品| 亚洲在线自拍视频| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 美女被艹到高潮喷水动态| 中文字幕高清在线视频| 国产亚洲精品一区二区www| 日韩国内少妇激情av| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 国产精品98久久久久久宅男小说| 熟女电影av网| 老汉色∧v一级毛片| 18禁观看日本| 婷婷精品国产亚洲av在线| 亚洲国产精品sss在线观看| av欧美777| 精品乱码久久久久久99久播| 哪里可以看免费的av片| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 免费观看人在逋| 欧美黑人巨大hd| 一本一本综合久久| 午夜激情福利司机影院| 又爽又黄无遮挡网站| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产欧美日韩精品一区二区| 人人妻人人看人人澡| 不卡av一区二区三区| 日本成人三级电影网站| 国产午夜福利久久久久久| 久久精品人妻少妇| 亚洲国产精品999在线| avwww免费| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 亚洲国产欧美人成| 国产黄色小视频在线观看| 欧美黑人巨大hd| 精品欧美国产一区二区三| 午夜激情欧美在线| 亚洲欧美精品综合久久99| 欧美大码av| 国产探花在线观看一区二区| 91九色精品人成在线观看| 婷婷亚洲欧美| 身体一侧抽搐| 国产男靠女视频免费网站| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲黑人精品在线| svipshipincom国产片| 国产精品亚洲一级av第二区| 1024香蕉在线观看| 一夜夜www| 性色avwww在线观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| cao死你这个sao货| 麻豆av在线久日| 日韩欧美免费精品| 国模一区二区三区四区视频 | 国产视频一区二区在线看| 91字幕亚洲| 搡老岳熟女国产| www国产在线视频色| 午夜激情福利司机影院| 亚洲av电影不卡..在线观看| 久久久精品大字幕| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 日韩免费av在线播放| 最新中文字幕久久久久 | 亚洲精品久久国产高清桃花| 一进一出抽搐动态| www.精华液| 久久久久久久久中文| 亚洲色图av天堂| 久久精品人妻少妇| 草草在线视频免费看| 露出奶头的视频| 最近最新免费中文字幕在线| 熟女人妻精品中文字幕| 国产精品久久电影中文字幕| 99热精品在线国产| 网址你懂的国产日韩在线| 男人舔女人的私密视频| av欧美777| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 中国美女看黄片| 免费在线观看亚洲国产| 制服人妻中文乱码| 国产精品99久久久久久久久| 国产一区二区三区视频了| 91av网一区二区| 麻豆国产97在线/欧美| 亚洲精华国产精华精| 国内精品久久久久久久电影| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 国产精品亚洲美女久久久| 国产一区二区三区视频了| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 国产精品久久视频播放| 男女那种视频在线观看| 日本黄色视频三级网站网址| 国产精品av视频在线免费观看| 国产精品日韩av在线免费观看| 一级作爱视频免费观看| 一级毛片精品| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲国产精品sss在线观看| 亚洲精品美女久久av网站| 久久久久久久精品吃奶| 精品一区二区三区四区五区乱码| 最近最新中文字幕大全电影3| 天天一区二区日本电影三级| 日韩人妻高清精品专区| 黄片小视频在线播放| 欧美成人性av电影在线观看| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 男女那种视频在线观看| 国产精品国产高清国产av| 国产三级中文精品| 欧美黑人欧美精品刺激| 欧美zozozo另类| 国产视频内射| 精品国内亚洲2022精品成人| av天堂中文字幕网| 久久久国产欧美日韩av| 国产三级黄色录像| 国产亚洲精品久久久com| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 国产亚洲精品一区二区www| 一区二区三区高清视频在线| 色吧在线观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产视频内射| 丁香六月欧美| 欧美日韩黄片免| 1024香蕉在线观看| 91久久精品国产一区二区成人 | 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 久99久视频精品免费| 久久久精品大字幕| 在线观看免费视频日本深夜| 少妇丰满av| 精品免费久久久久久久清纯| 老司机午夜十八禁免费视频| 脱女人内裤的视频| 亚洲成人免费电影在线观看| 色噜噜av男人的天堂激情| 日本免费a在线| 欧美色欧美亚洲另类二区| 亚洲 欧美一区二区三区| 中文亚洲av片在线观看爽| 国产精品av视频在线免费观看| 51午夜福利影视在线观看| 欧美黄色淫秽网站| 欧美高清成人免费视频www| 日韩免费av在线播放| 免费高清视频大片| 青草久久国产| 真实男女啪啪啪动态图| 国产精品亚洲一级av第二区| 国产精品av视频在线免费观看| 岛国在线免费视频观看| 久久久国产成人精品二区| 中文资源天堂在线| av中文乱码字幕在线| 90打野战视频偷拍视频| 国产成人aa在线观看| 国产av麻豆久久久久久久| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 一边摸一边抽搐一进一小说| 久久伊人香网站| 亚洲专区国产一区二区| 婷婷六月久久综合丁香| 天天躁日日操中文字幕| 色av中文字幕| 手机成人av网站| 亚洲片人在线观看| 日本 欧美在线| 黄色丝袜av网址大全| 国产毛片a区久久久久| 男女下面进入的视频免费午夜| 国产成人精品久久二区二区91| 精品日产1卡2卡| www日本在线高清视频| 欧美在线黄色| а√天堂www在线а√下载| 精品久久蜜臀av无| 亚洲国产精品合色在线| 色噜噜av男人的天堂激情| 欧美在线一区亚洲| 中出人妻视频一区二区| 国产精品乱码一区二三区的特点| 巨乳人妻的诱惑在线观看| av视频在线观看入口| 99热这里只有精品一区 | 国产不卡一卡二| 亚洲黑人精品在线| 黄色丝袜av网址大全| 国产精品久久久久久久电影 | 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产成人av激情在线播放| 1000部很黄的大片| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 在线观看舔阴道视频| 久久国产乱子伦精品免费另类| 精品免费久久久久久久清纯| 成人亚洲精品av一区二区| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 免费av毛片视频| 久久午夜亚洲精品久久| 可以在线观看毛片的网站| 久久精品人妻少妇| 偷拍熟女少妇极品色| 精品久久蜜臀av无| 国产精品98久久久久久宅男小说| 1024香蕉在线观看| 99在线视频只有这里精品首页| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 我要搜黄色片| 国产久久久一区二区三区| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 亚洲精品粉嫩美女一区| e午夜精品久久久久久久| 欧美精品啪啪一区二区三区| 黄色女人牲交| 1024手机看黄色片| 色噜噜av男人的天堂激情| 男女视频在线观看网站免费| 制服人妻中文乱码| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产精品精品国产色婷婷| 欧美一级毛片孕妇| 久久香蕉精品热| 国产三级黄色录像| 国产成人欧美在线观看| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 免费高清视频大片| 两人在一起打扑克的视频| 欧美日韩精品网址| 岛国视频午夜一区免费看| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 超碰成人久久| 九九久久精品国产亚洲av麻豆 | 真实男女啪啪啪动态图| 亚洲 国产 在线| 91在线精品国自产拍蜜月 | 九色国产91popny在线| 91字幕亚洲| 亚洲av熟女| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲精品在线观看二区| 夜夜爽天天搞| 日日夜夜操网爽| 一级a爱片免费观看的视频| 99riav亚洲国产免费| 在线国产一区二区在线| 国产真人三级小视频在线观看| 嫁个100分男人电影在线观看| 国产av麻豆久久久久久久| 搡老岳熟女国产| 给我免费播放毛片高清在线观看| netflix在线观看网站| 亚洲美女视频黄频| 熟女人妻精品中文字幕| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 99久久综合精品五月天人人| 好男人电影高清在线观看| 两个人视频免费观看高清| 国产精品一区二区免费欧美| 国产男靠女视频免费网站| 在线观看午夜福利视频| 一区二区三区国产精品乱码| 色噜噜av男人的天堂激情| 麻豆成人午夜福利视频| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 亚洲av美国av| 欧美丝袜亚洲另类 | 国内精品美女久久久久久| 麻豆国产av国片精品| 中文资源天堂在线| 久久精品国产清高在天天线| 久久这里只有精品19| 精品福利观看| 国产精品九九99| 校园春色视频在线观看| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 亚洲七黄色美女视频| 精品国产乱子伦一区二区三区| 欧美av亚洲av综合av国产av| 免费观看的影片在线观看| 亚洲av成人一区二区三| 国产伦精品一区二区三区视频9 | 国产黄a三级三级三级人| 亚洲欧美精品综合久久99| av在线蜜桃| 亚洲av熟女| 免费一级毛片在线播放高清视频| 男女下面进入的视频免费午夜| 欧美日韩一级在线毛片| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 成年女人永久免费观看视频| 色av中文字幕| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 1024手机看黄色片| 日本免费一区二区三区高清不卡| 午夜激情福利司机影院| 日韩成人在线观看一区二区三区| 精品久久蜜臀av无| 欧美在线黄色| www.精华液| 久久99热这里只有精品18| 精品日产1卡2卡| 国产乱人视频| 午夜精品久久久久久毛片777| 午夜福利高清视频| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 久久久久久人人人人人| bbb黄色大片| 亚洲美女黄片视频| 精品日产1卡2卡| 在线永久观看黄色视频| xxx96com| 国产三级黄色录像| 国产伦精品一区二区三区四那| 亚洲精品色激情综合| 精品国产乱子伦一区二区三区| 美女黄网站色视频| 日本一本二区三区精品| 88av欧美| 亚洲人成网站高清观看| 国产精品九九99| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 国产亚洲欧美在线一区二区| 中文字幕av在线有码专区| 一个人免费在线观看的高清视频| 在线观看舔阴道视频| 午夜福利免费观看在线| 国产精品野战在线观看| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 欧美最黄视频在线播放免费| 老汉色av国产亚洲站长工具| 欧美最黄视频在线播放免费| 国产av不卡久久| 欧美高清成人免费视频www| 亚洲五月天丁香| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲国产精品久久男人天堂| 久久久久久大精品| av福利片在线观看| aaaaa片日本免费| 91麻豆精品激情在线观看国产| 9191精品国产免费久久| a在线观看视频网站| 免费看a级黄色片| 久久午夜综合久久蜜桃| 99国产综合亚洲精品| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产97色在线日韩免费| 18禁国产床啪视频网站| 特级一级黄色大片| 国产欧美日韩一区二区精品| 一a级毛片在线观看| 国产伦精品一区二区三区四那| 久久亚洲真实| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 中文字幕最新亚洲高清| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 国产 一区 欧美 日韩| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 999久久久精品免费观看国产| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产av不卡久久| 亚洲色图av天堂| 99热6这里只有精品| 国产精品一及| 99国产精品一区二区三区| 1024手机看黄色片| 国内揄拍国产精品人妻在线| 日韩欧美在线乱码| 桃红色精品国产亚洲av| av国产免费在线观看| 美女被艹到高潮喷水动态| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 在线观看66精品国产| 一本一本综合久久| 久久久久亚洲av毛片大全| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 久久这里只有精品19| 日韩欧美精品v在线| 午夜成年电影在线免费观看| 99热只有精品国产| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 99国产综合亚洲精品| 国产精品国产高清国产av| 亚洲精品久久国产高清桃花| 亚洲一区二区三区色噜噜| 精品无人区乱码1区二区| 美女免费视频网站| 在线播放国产精品三级| 天堂√8在线中文| 搡老熟女国产l中国老女人| av视频在线观看入口| 九九在线视频观看精品| 麻豆成人午夜福利视频| av中文乱码字幕在线| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲av美国av| 日韩欧美在线乱码| 欧美zozozo另类| 欧美三级亚洲精品| 午夜激情欧美在线| 无遮挡黄片免费观看| 高清在线国产一区| 国产黄a三级三级三级人| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 日本 欧美在线| 12—13女人毛片做爰片一| 夜夜夜夜夜久久久久| 99久久精品热视频| 99热这里只有是精品50| 欧美成人性av电影在线观看| 日韩精品青青久久久久久| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 午夜亚洲福利在线播放| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产在线精品亚洲第一网站| 啪啪无遮挡十八禁网站| 午夜福利18|