寧波地區(qū)高危型HPV E6/E7mRNA陽性患者的臨床病理特點分析

阮雅君，潘登，祝杭燕

作者單位： 315000寧波，寧波市臨床病理診斷中心

宮頸癌是臨床常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率居婦科惡性腫瘤第3位，病死率位居第4位[1]。幾乎所有的宮頸癌患者都有HPV感染，HPVE6/E7基因可在高度惡性腫瘤和宮頸癌組織中表達，為HPV的致癌基因[2]。目前，美國食品和藥品管理局（FDA）批準的唯一針對高危型HPV E6/E7mRNA的檢測方法，屬于新一代的檢測技術，在國內(nèi)尚處于起步階段[3]。了解區(qū)域性高危型 HPV E6/E7mRNA陽性患者的病理特點，對臨床宮頸篩查方案的選擇以及HPV疫苗在人群中的應用前景評估和預防亞型的判斷都有著重要的意義。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 材料 選擇2016年6－12月在寧波市臨床病理診斷中心檢測HPVE6/E7mRNA的患者共2495例，其中陽性患者571例，有液基薄層細胞學（TCT）檢查者384例，有病理組織學檢查者337例，以上標本來源于寧波市婦女兒童醫(yī)院、寧波各婦幼保健院及5家綜合性三甲醫(yī)院。所有患者均有性生活，且為非妊娠期婦女。

1.2 方法 標本的采集：所有患者取樣均在非月經(jīng)期，采樣前48h內(nèi)無性生活，3 d內(nèi)無陰道內(nèi)用藥。采樣前由醫(yī)師放入窺器，用棉拭子去除黏液和分泌物，將專用的宮頸刷插入宮頸管，吻合宮頸外口，以順時針方向輕微旋轉(zhuǎn)5圈，取出宮頸刷將其放入專用細胞保存瓶內(nèi)刷洗后丟棄。雜交捕獲技術進行高危型 HPV E6/E7mRNA檢測：將采集的樣本轉(zhuǎn)移至專用的細胞裂解液內(nèi)，在PANTHER平臺（美國豪洛捷公司產(chǎn)品Aptima）上利用雜交捕獲技術對高危型 HPV E6/E7mRNA進行分型檢測。14種高危型HPV 包括 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68，檢測結(jié)果由軟件自動進行判讀，根據(jù)ICRLU和相關分析物的S/CO值，S/CO≥1.0時為HPV陽性，反之陰性，但若檢測結(jié)果因其他參數(shù)超出正常預期范圍則被判讀為無效。

1.3 觀察指標 回顧或追蹤分析高危型HPVE6/E7mRNA陽性宮頸病變患者的臨床病理特點，包括高危型HPV E6/E7mRNA的分型結(jié)果、TCT檢查結(jié)果、組織病理檢查結(jié)果及年齡構(gòu)成等。

1.4 統(tǒng)計方法 采用 SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以率表示，采用x2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

高危型HPVE6/E7mRNA陽性患者在TCT檢查為NILM的比率高于TCT檢查結(jié)果異常者；挖空、濕疣及LSIL占比達59.34%；高危型HPV陰性與陽性患者不同年齡組構(gòu)成比差異有統(tǒng)計學意義（x2=359.28，P＜ 0.05）。見表 1。

3 討論

中國醫(yī)學科學院癌癥研究所（CICAMS）和美國克里夫蘭臨床基金會（CCF）的合作項目提示在35～50歲的女性中，HC-2檢出的高危型HPV總感染率為20.8%[4]。本研究顯示2495例患者中有571例HPVE6/E7mRNA檢測為陽性，占22.89%。陽性率增高的主要原因在于部分患者是婦科診療分流及體檢者。HPV陽性病例分別跟TCT與組織活檢的結(jié)果比對，發(fā)現(xiàn)TCT陽性病例占比較低，而組織活檢陽性病例占比較高，客觀的反映了人工 TCT閱片存在敏感性低，尤其是少量或個別細胞的形態(tài)改變易漏診。從數(shù)據(jù)上分析，大都集中于挖空、濕疣變等低級別病變，而且即使再有經(jīng)驗的醫(yī)師，陰道鏡檢查其假陰性率也高達20%～40%[5]。因此，筆者認為HPVE6/E7檢測的敏感性明顯優(yōu)于單純TCT檢查，特異性與組織活檢有較高一致性。HPV檢測中TCT作為分流的宮頸癌聯(lián)合篩查方案值得關注。同時在人工智能領域系統(tǒng)導入HPV檢測結(jié)果及指南要求的臨床處理規(guī)范，組合成符合臨床需求的完整病理 TCT報告（包含TBS診斷類型、HPV檢測結(jié)果及臨床處理意見），打破病理診斷的瓶頸。

表1 高危型HPV E6/E7mRNA陽性和陰性患者的臨床病理特點

高危型HPVE6/E7mRNA陽性患者的年齡18～77歲，平均年齡為41歲，高發(fā)年齡為30～55歲，這與宮頸癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變患者患病年齡分布在3l～50歲符合。中國一項有關多個地區(qū)664例浸潤性癌（630例鱗癌，34例腺癌）和569例 CIN2/3的研究顯示，HPV52和HPV33感染在中國女性中出現(xiàn)頻率很高，這些研究數(shù)據(jù)表明HPV型別的分布存在地域差異[6]。本研究顯示高危型HPV 571例陽性患者中16型陽性有72例，18/45型陽性有38例，其他11型陽性有461例，這也印證了HPV型別分布的地域差異，對于HPV疫苗特別是國產(chǎn)疫苗的研發(fā)有一定的參考意義。