豬衣原體病的診斷與防控措施

于新友，李天芝

(山東綠都生物科技有限公司，山東 濱州 256600)

衣原體是衣原體目衣原體科，可分為2個(gè)屬10多個(gè)種。各種衣原體的致病性不同，能感染豬、牛、羊、兔、鳥(niǎo)類(lèi)等多種動(dòng)物，表現(xiàn)不同癥狀或呈亞臨床經(jīng)過(guò)，某些種也能感染人類(lèi)，是一種人獸共患性病原體。衣原體可在機(jī)體內(nèi)長(zhǎng)期潛伏，其失能性和致死性較強(qiáng)，己被聯(lián)合國(guó)列為潛在的生物戰(zhàn)劑[1]，因此，做好衣原體病的防控工作，具有重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義。豬衣原體病是由衣原體引起的一類(lèi)多種癥狀接觸性傳染病，一般呈慢性經(jīng)過(guò)，某些條件下也會(huì)急性暴發(fā)，表現(xiàn)為急性經(jīng)過(guò)。該病的一般為散發(fā)、呈地方流行性[2]。能引起豬發(fā)病的衣原體主要有鸚鵡熱嗜衣原體[3]、家畜嗜衣原體[4]、流產(chǎn)嗜衣原體[5]、豬衣原體[6]和沙眼衣原體[7]。各日齡、品種的豬均能感染[8]。豬群一旦感染，很難清除，康復(fù)豬群長(zhǎng)期帶毒、排毒。豬衣原體感染可因菌株毒力、豬日齡、體況和外界環(huán)境的變化而呈現(xiàn)不同的癥候群，如肺炎、腸炎、結(jié)膜炎、關(guān)節(jié)炎、睪丸炎、子宮炎等，主要導(dǎo)致仔豬的高死亡率和母豬的繁殖障礙疾病，因發(fā)病率不高，易被忽視，往往給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。1955年，美國(guó)專(zhuān)家Willigam等首次從病豬體內(nèi)分離到豬衣原體，隨后羅馬尼亞、英國(guó)、日本和德國(guó)等均有相關(guān)報(bào)道，目前，該病在全世界范圍廣泛流行。我國(guó)楊宜生等于1982年首次報(bào)道國(guó)內(nèi)豬群中存在此病，隨后從甘肅、湖北、內(nèi)蒙、青海、廣西、河南、四川等地都分離出豬衣原體。近年來(lái)，豬病流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，豬衣原體病在我國(guó)27個(gè)省(市)豬場(chǎng)均存在[9]，呈流行態(tài)勢(shì)。文章主要從豬衣原體病的病原學(xué)、流行病學(xué)、臨床癥狀、病理變化、診斷及防控等幾個(gè)方面進(jìn)行闡述，以期為該病的診斷及防控提供參考。

1 病原學(xué)

衣原體為革蘭氏陰性病原體，能通過(guò)細(xì)菌濾器，不能合成生物能量物質(zhì)ATP，嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生，具有DNA、RNA兩種核酸，能以二分裂方式進(jìn)行增殖，是一類(lèi)大小介于立克次體與病毒之間的微生物。衣原體抵抗力弱，日光照射下最多存活6 d，在外界干燥的條件下可存活5周，在水中可存活 17 d。56℃ 5 min、37℃ 48 h、100℃15 min、紫外線(xiàn)照射30 min可殺滅衣原體。常規(guī)消毒劑如2%來(lái)蘇爾、2%氫氧化鈉溶液、1%鹽酸溶液、75%酒精溶液可在數(shù)分鐘內(nèi)殺滅衣原體。衣原體對(duì)煤酚類(lèi)化合物和石碳酸具有一定的抵抗力。將衣原體感染的雞胚卵黃囊保存-70℃，衣原體至少可存活10年以上。衣原體為專(zhuān)性細(xì)胞內(nèi)寄生，不能用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)，能在6～8日齡雞胚或鴨胚卵黃囊中生長(zhǎng)繁殖，也可用細(xì)胞培養(yǎng)，常用的細(xì)胞有人宮頸癌細(xì)胞(HeLa299)、乳倉(cāng)鼠腎細(xì)胞(BHK-21)、非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero)及小鼠成纖維細(xì)胞(McCoy)。衣原體繁殖過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生兩種大小不同的顆粒，較小的為原生小體，直徑0.2～0.4 μm，球狀、橢圓形或梨形，有胞壁，內(nèi)有核質(zhì)和核蛋白體，姬姆薩染色呈紫色，是成熟的衣原體，為細(xì)胞外形式，無(wú)繁殖能力，但具有高度的感染性，當(dāng)進(jìn)入易感細(xì)胞后，發(fā)育成較大的始體。始體，直徑0.7～1.5 μm，圓形，可繁殖，無(wú)細(xì)胞壁，為細(xì)胞內(nèi)形式，姬姆薩染色呈藍(lán)色，無(wú)感染性。衣原體可分為強(qiáng)毒力和弱毒力菌株兩大類(lèi)，不同菌株致病性不同[10]。衣原體對(duì)四環(huán)素、強(qiáng)力霉素、土霉素、金霉素、紅霉素及螺旋霉素敏感，對(duì)慶大霉素、卡那霉素、新霉素、鏈霉素和磺胺類(lèi)藥不敏感。

2 流行病學(xué)

能感染豬的衣原體也能感染其他多種哺乳動(dòng)物和鳥(niǎo)類(lèi)，多為人獸共患性病原體。豬衣原病發(fā)病率為5%～95%，一年四季均可發(fā)病，秋冬季節(jié)多發(fā)，各品種和日齡的豬均易感，懷孕母豬和仔豬受到的危害最為嚴(yán)重，初產(chǎn)母豬的流產(chǎn)率為40%～90%，斷奶仔豬的病死率為20%～60%。病豬和帶菌豬是主要傳染源，其他被感染的動(dòng)物如豬場(chǎng)內(nèi)的飛鳥(niǎo)、鼠類(lèi)也能成為傳染源?？伤絺鞑ヒ材艽怪眰鞑?，衣原體通過(guò)眼鼻分泌物、糞尿、乳汁、流產(chǎn)的胎兒、胎衣和羊水等排出體外[11]，污染飼料、飲水及周?chē)h(huán)境，經(jīng)消化道、呼吸道傳染其他豬只，也可經(jīng)過(guò)交配感染健康豬。豬場(chǎng)內(nèi)的蚊、蠅等也能間接傳播該病。初次感染該病的豬場(chǎng)癥狀表現(xiàn)更明顯，損失更嚴(yán)重，感染后母豬、公豬可長(zhǎng)期帶毒，排毒可長(zhǎng)達(dá)1年，很難凈化，因此，持續(xù)的潛伏性傳染是本病的主要流行特征。當(dāng)豬群飼養(yǎng)密度大、通風(fēng)不良、營(yíng)養(yǎng)不良或受到應(yīng)激因素影響時(shí)均能誘發(fā)該病[12]。

3 臨床癥狀

該病的潛伏期為3～11 d。不同豬群感染后表現(xiàn)的臨床表現(xiàn)不同，仔豬感染衣原體后臨床表現(xiàn)多樣，可表現(xiàn)為生長(zhǎng)發(fā)育不良，精神沉郁，食欲不振，體溫升高、顫抖，咳嗽、呼吸困難，鼻孔流出漿液性分泌物。眼結(jié)膜潮紅，角膜混濁，羞明，流淚，眼角有大量分泌物出現(xiàn)，腹瀉，脫水。也可出現(xiàn)一些神經(jīng)癥狀如興奮，尖叫，盲目地沖撞或轉(zhuǎn)圈運(yùn)動(dòng)，倒地，四肢呈劃水狀。還可出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎的一些癥狀如關(guān)節(jié)腫脹、跛行等。

母豬感染衣原體后多呈隱性經(jīng)過(guò)，自身不表現(xiàn)出明顯的臨床表現(xiàn)，只是在懷孕后期突發(fā)生流產(chǎn)、早產(chǎn)、產(chǎn)死胎或弱仔，流產(chǎn)胎兒水腫和出血，胎衣暗紅色，有水泡，有臭味，弱仔一般個(gè)頭較小，體弱，頭部、腹下及四肢皮膚呈彌漫性出血，拱奶無(wú)力，多在出生后2 d死亡。初產(chǎn)母豬發(fā)病率高，可達(dá)90%。一般愈后良好，一般不會(huì)發(fā)生不育和再次流產(chǎn)，但如果發(fā)生分娩后胎衣滯留，有可能導(dǎo)致細(xì)菌繼發(fā)感染，形成子宮內(nèi)膜炎；治療不及時(shí)，母豬可能會(huì)死亡。少數(shù)流產(chǎn)母豬也可出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎、眼結(jié)膜炎。

公豬感染衣原體后精神沉郁、食欲不振、體溫升高，臨床表現(xiàn)為尿道炎、睪丸炎、附睪炎[13]、腹股溝淋巴結(jié)腫大、精液量少、精液帶有血絲、品質(zhì)下降，以致受配母豬的受胎率下降，即使受孕，流產(chǎn)死胎率明顯升高。有時(shí)也可表現(xiàn)為肺炎、關(guān)節(jié)炎。有的公豬只是隱性帶毒，并不表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀。

4 病理變化

仔豬的病理變化主要為肺臟腫大，質(zhì)地變硬，有出血點(diǎn)或出血斑，肺泡膨脹不全，并含有大量的滲出液，氣管、支氣管有大量黏液性分泌物。關(guān)節(jié)周?chē)M織水腫、出血，關(guān)節(jié)腔內(nèi)大量纖維素性滲出液，含有黃色絮狀物。腸系膜淋巴結(jié)充血、水腫，腸道黏膜出血，內(nèi)容物稀薄如水，有的紅染。肝脾腫大，出血。腎臟腫大有出血點(diǎn)，呈土黃色。腦膜充血、水腫，腦脊液增多，渾濁。肝臟腫大，有時(shí)與腸道粘連，發(fā)生纖維素性腹膜炎。母豬子宮內(nèi)膜水腫、出血，有不規(guī)則的壞死灶，流產(chǎn)胎兒水腫，頭頂和四肢呈彌漫性出血，心臟和肺臟常有漿膜下點(diǎn)狀出血，肝臟充血。公豬腹股溝淋巴結(jié)腫大，睪丸腫脹、變硬，輸精管出血、陰莖水腫、出血或壞死，尿道上皮脫落、壞死。

5 診斷

根據(jù)流行情況、臨床癥狀及病理變化可做出初步診斷，該病應(yīng)與一些引起繁殖障礙的疫病如豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、流行性乙型腦炎、豬細(xì)小病毒感染、豬偽狂犬病、豬流感、布魯氏菌病、鉤端螺旋體病、弓形蟲(chóng)病、附紅細(xì)胞體病以及其他病原和霉菌毒素所致的流產(chǎn)和繁殖障礙進(jìn)行區(qū)別，還應(yīng)注意與因飼養(yǎng)管理不良和營(yíng)養(yǎng)缺乏引起的非傳染性繁殖障礙進(jìn)行鑒別。發(fā)生呼吸障礙時(shí)，應(yīng)與豬流感、豬巴氏桿菌病、傳染性胸膜肺炎等疾病進(jìn)行區(qū)別。發(fā)生關(guān)節(jié)炎時(shí)，應(yīng)與豬丹毒絲菌、豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌等感染進(jìn)行區(qū)別。發(fā)生腹瀉時(shí)，應(yīng)與大腸桿菌病、傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉等疾病進(jìn)行區(qū)別。

要確診的話(huà)需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查，常用的試驗(yàn)室檢查方法鏡檢、有病原分離鑒定、間接血凝試驗(yàn)(IHA)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、分子生物學(xué)檢測(cè)方法等。需首先采集病死豬的肝臟、脊髓液或流產(chǎn)胎兒的內(nèi)臟組織，做觸片或涂片，干燥、甲醇固定10 min，再用姬姆薩染色液染色30～60 min，蒸餾水沖洗，晾干，鏡檢。油鏡下可見(jiàn)被染成紫色或藍(lán)色的小體，紫色的是原體，藍(lán)色的是始體?？捎眯∈?、雞胚或細(xì)胞等進(jìn)行衣原體的分離，選取的病料樣品可以是肺臟、脾臟、關(guān)節(jié)液、腦脊液、胎盤(pán)等。對(duì)嚴(yán)重污染的病料一般用小鼠分離，病料處理后腹腔接種3～4周齡小鼠，0.5 mL/只，接種后4～10 d撲殺，剖檢小鼠可見(jiàn)脾臟腫大，腹腔內(nèi)有纖維素性滲出物，取肝、脾等做成觸片，鏡檢可見(jiàn)大量純凈的衣原體。雞胚分離衣原體時(shí)可選用6～7日齡雞胚，卵黃囊接種鏈霉素處理的病料樣品，0.3 mL/胚，初次分離時(shí)可能不致死雞胚，需盲傳2～3代，一般雞胚于接種后3～10 d死亡，無(wú)菌取雞胚卵黃囊膜涂片，若鏡檢發(fā)現(xiàn)有大量衣原體原生小體則可確定。衣原體雖然可用細(xì)胞分離，但分離率一般不如雞胚分離效果好，因衣原體對(duì)細(xì)胞的吸附力較弱，可在培養(yǎng)基中添加一定比二乙氨基乙基葡聚糖以增加衣原體對(duì)細(xì)胞的吸附力[14]，提高分離效率。IHA是豬血清中衣原體抗體檢測(cè)最常用的方法，該法采用純的衣原體致敏綿羊紅細(xì)胞，敏感性高、特異性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)便，不需要專(zhuān)門(mén)的儀器設(shè)備，適合基層應(yīng)用，目前已有商品化的試劑盒。但這種方法也存在一定的問(wèn)題，重復(fù)性差，可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。目前也有商品化的ELISA檢測(cè)試劑盒用于衣原體血清抗體檢測(cè)，如以色列Biogal公司的ImmunoComb診斷試盒，但價(jià)格較貴。分子生物學(xué)檢測(cè)方法是檢測(cè)衣原體病原的方法，常用有PCR、熒光定量PCR方法等，但因衣原體種類(lèi)繁多，檢測(cè)時(shí)可能因引物序列與病原不匹配造成漏檢，檢測(cè)時(shí)采用新鮮的病料樣品如肺、肝、脾臟、關(guān)節(jié)液、腦脊液、精液、喉拭子、陰道拭子。最好采用多種方法檢測(cè)，進(jìn)行綜合判斷，以提高檢測(cè)的準(zhǔn)確行，有針對(duì)性的采取相應(yīng)的措施，避免豬場(chǎng)造成大的損失。

6 防控措施

1)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，飼喂全價(jià)優(yōu)質(zhì)配合飼料，提高豬群免疫力；豬舍保持適宜的溫度、濕度，豬群飼養(yǎng)密度合理，加強(qiáng)通風(fēng)，減少豬群應(yīng)激。豬舍保持清潔衛(wèi)生，糞便與污物要經(jīng)過(guò)消毒后堆積發(fā)酵處理，并每周兩次對(duì)通道消毒、產(chǎn)房消毒、圈舍消毒、場(chǎng)區(qū)環(huán)境消毒進(jìn)行防控。

2)堅(jiān)持自繁自養(yǎng)，全進(jìn)全出的飼養(yǎng)模式，盡量減少引種，禁止從衣原體疫區(qū)引種，引種時(shí)要隔離飼養(yǎng)半個(gè)月，并進(jìn)行檢疫，確定無(wú)衣原體感染或隱性感染后，方可并入大群飼養(yǎng)。豬場(chǎng)內(nèi)要?dú)缥?、蠅、鼠等，防止飛鳥(niǎo)等動(dòng)物(如貓、野鼠、狗、野鳥(niǎo)、家禽、牛、羊等)進(jìn)出養(yǎng)殖場(chǎng)?？刂迫藛T進(jìn)出，非本場(chǎng)飼養(yǎng)人員禁止進(jìn)人豬場(chǎng)，人員進(jìn)入豬場(chǎng)要進(jìn)行嚴(yán)格消毒，并更換鞋、工作服。對(duì)種豬要定期檢疫，確診健康無(wú)疫后方可配種。對(duì)發(fā)病豬隔離飼養(yǎng)，豬舍周?chē)?、過(guò)道用3%氫氧化鈉消毒。每天1次，連續(xù)消毒7 d。淘汰發(fā)病及感染豬，尤其是隱性感染種公豬。最大限度地減少應(yīng)激因素。加強(qiáng)產(chǎn)房衛(wèi)生工作，以防新生仔豬感染該病。對(duì)病死豬及流產(chǎn)的胎兒、胎衣以及排泄物和污染物，應(yīng)采取焚毀、深埋等無(wú)害化處理，同時(shí)用2%來(lái)蘇爾或2%氫氧化鈉等有效消毒劑進(jìn)行嚴(yán)格消毒，加強(qiáng)產(chǎn)房衛(wèi)生工作，以防新生仔豬感染本病。

3)豬場(chǎng)一旦發(fā)生豬衣原體病，豬場(chǎng)飼養(yǎng)管理人員要注意自身的防護(hù)，如穿工作服、戴口罩和手套，并注意消毒，服用四環(huán)素、強(qiáng)力霉素或環(huán)丙沙星等抗菌藥物，可有效地防治本病的傳染。

4)目前有羊用衣原體疫苗，但沒(méi)有豬用衣原體疫苗，只能采用抗生素進(jìn)行防治，豬群發(fā)病在早期可用四環(huán)素、強(qiáng)力霉素、土霉素、青霉素、紅霉素、麥迪霉素、金霉素、泰樂(lè)菌素、螺旋霉素等多種抗生素治療，為防止抗藥性的出現(xiàn)可采用多種藥物輪換、穿梭使用。因衣原體的細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)及隱性、持續(xù)性感染特點(diǎn)，抗生素治療效果不理想，最好對(duì)該病要早發(fā)現(xiàn)、早治療。對(duì)發(fā)病的新生仔豬，可每千克體重肌肉注射1%土霉素1 mL，每天1次，連續(xù)治療7 d，病重仔豬另加5%葡萄糖溶液20 mL耳靜脈推注加以補(bǔ)液。發(fā)病種豬肌內(nèi)注射10%強(qiáng)力霉素，用量為每千克體重20 mg，每天2次，連用3 d。當(dāng)母豬發(fā)生流產(chǎn)時(shí)用土霉素1 000 g/t拌料，連喂10 d，有很好的效果，治療后恢復(fù)發(fā)情。在豬衣原體流行期間，全群飼料中添加四環(huán)素300 mg/kg，可預(yù)防該病。此外，公母豬配種前1～2周及母豬產(chǎn)前2～3周按0.02%～0.04%的比例將四環(huán)素類(lèi)抗生素混于飼料中，連用1～2周，可提高受胎率，以預(yù)防新生仔豬通過(guò)垂直感染該病，增加活仔數(shù)及降低新生仔豬的病死率。

7 小結(jié)

豬衣原體病是豬的一種重要的接觸性傳染病，在世界范圍廣泛流行，給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，但因其常呈慢性經(jīng)過(guò)，隱性感染較多，且臨床表現(xiàn)多樣，沒(méi)有典型的病變特征，常被忽視。某些能感染豬的衣原體如鸚鵡熱嗜衣原體、流產(chǎn)嗜衣原體和沙眼衣原體也能感染人，因此，豬場(chǎng)工作人員一定加強(qiáng)學(xué)習(xí)，提高對(duì)該病的認(rèn)識(shí)，重視該病，一旦豬場(chǎng)有疑似病例出現(xiàn)，一定要做好自身的防控，避免受到感染。并采用實(shí)驗(yàn)室方法診斷該病，及早確診，盡快采取相應(yīng)的措施，使損失降到最低。目前只有羊衣原體病基因工程亞單位疫苗，尚沒(méi)有正式批準(zhǔn)文號(hào)的豬衣原體滅活疫苗，雖然一些科研單位試制，但一直未申請(qǐng)正式批號(hào)。豬衣原體種類(lèi)繁多，科研人員應(yīng)對(duì)該病做好流行病學(xué)調(diào)查，有針對(duì)性的分離豬衣原體，并研制疫苗，從而更好地做好該病的防控工作。