羅 瑩 劉連強 張志軍 周永斌王文治 李鳳美
(天津市林業(yè)果樹研究所,天津北辰300380)
菌種是食用菌生產(chǎn)的基礎(chǔ),菌種的好壞直接決定著食用菌栽培的成敗[1-2]。食用菌菌種一般包括母種、原種、栽培種,原種制作是食用菌生產(chǎn)中的重要環(huán)節(jié)。一般原種所使用的培養(yǎng)料多為谷粒(如麥粒、玉米粒等)、木屑、棉籽殼等[4-6]。雖然谷粒菌種具有儲存時間長,菌種萌發(fā)快等優(yōu)點,但菌種制作過程復(fù)雜,對制種人員的操作經(jīng)驗和技能要求都有較高,而且發(fā)菌期間污染率高;以木屑、棉籽殼等為培養(yǎng)料制作的原種,菌種萌發(fā)慢,在接種時須成塊,否則菌種菌絲體斷裂,直接影響三級種的質(zhì)量。以陶粒為主料制備的原種,與普通原種相比制作簡單、菌絲生長速度快、污染率低、菌種質(zhì)量好,而且接種操作便捷,大大提高了菌種的生產(chǎn)效率。為此筆者進行陶粒菌種配方的優(yōu)化及制備技術(shù)研究,以期為陶粒菌種制作應(yīng)用提供理論依據(jù)。
白靈菇菌株白靈菇1號、白靈菇2號均由來自天津市薊州區(qū)栽培戶白靈菇子實體分離所得,天津市林業(yè)果樹研究所保存。
1.2.1 陶粒浸泡液配方
①土豆200 g,葡萄糖20 g,水1000 mL。②葡萄糖2%,蛋白胨0.5%,磷酸二氫鉀0.1%,硫酸鎂0.1%。③自來水。
1.2.2 陶粒原種培養(yǎng)料配方
①陶粒75%,麩皮12%,玉米芯12%,石膏1%。②陶粒75%,麩皮12%,棉籽殼12%,石膏1%。③陶粒75%,麩皮12%,稻殼12%,石膏1%。④陶粒75%,麩皮12%,豆秸12%,石膏1%。⑤陶粒75%,麩皮12%,棉稈12%,石膏1%。
1.3.1 制作浸泡液
按配方配制陶粒浸泡液,常溫保存,備用。
1.3.2 浸泡陶粒
將陶粒放置于不同的泡沫箱。中午11:00加入浸泡液浸泡,浸泡至隔天的9:00取出,瀝水,稱重。
1.3.3 配制原種培養(yǎng)料
培養(yǎng)料配方:陶粒75%,麩皮12%,稻殼12%,石膏1%(浸泡液配方試驗用)。在浸泡后的陶粒中加入稻殼、麩皮、石膏,混勻,調(diào)整培養(yǎng)料含水量,最后裝入菌種瓶。
1.3.4 滅菌接種
采用高壓滅菌的方法,在壓力0.15 MPa,溫度126℃維持3~3.5 h。瓶溫降至25℃時在超凈工作臺上進行接種操作。平均每支試管母種接3~5瓶。
1.3.5 發(fā)菌管理
接種后的原種瓶,置恒溫箱或菌種培養(yǎng)室避光發(fā)菌,前期溫度嚴(yán)格控制在25~28℃,菌絲萌發(fā)后并長滿料面以后溫度控制在22~25℃。發(fā)菌期間及時檢查,并挑出污染的菌種妥善處理。經(jīng)過25~30 d培養(yǎng),菌絲基本長滿瓶。
1.3.6 菌絲生長狀況觀察及測定
菌絲長滿上層料面后開始測量菌絲生長速度,每隔一天觀察菌絲吃料深度、長勢、滿瓶天數(shù)和污染情況。
陶粒本身不含有菌絲生長所需要的營養(yǎng),而陶粒吸收的浸泡液才是提供菌絲生長的營養(yǎng)源;陶粒具有特定的空隙結(jié)構(gòu),浸泡液的黏度,也可能會影響陶粒對浸泡液的吸收。浸泡液配方試驗結(jié)果見表1。
圖1 白靈菇1號原種
圖2 白靈菇2號原種
表1 不同浸泡液浸泡陶粒白靈菇菌種菌絲生長情況
試驗結(jié)果表明,配方1浸泡液中由于含有馬鈴薯提取物比較渾濁,因此影響了陶粒對浸泡液的吸收,陶粒的吸液量較小;而配方2是將營養(yǎng)物質(zhì)完全溶解于水中,浸泡液均勻而澄清,與配方3的水相比,陶粒吸液量相近。由表1可見,配方1浸泡液浸泡陶粒原種菌絲粗壯、濃密、潔白,滿瓶時間短且污染率低??梢娪绊懱樟TN菌絲生長的主要因素是浸泡液的營養(yǎng)物質(zhì),與陶粒的吸液量關(guān)系不大。
陶粒原種培養(yǎng)料中除了陶粒還含有一定比例的其他輔料,這些原料既起到為菌絲提供營養(yǎng)的作用,又具有保水、透氣的作用。
由表2可以看出,5個白靈菇陶粒原種培養(yǎng)料配方中,配方3和配方4白靈菇菌絲長速要比其他配方快。這可能與培養(yǎng)料本身的營養(yǎng)成分含量和顆粒大小有關(guān),配方3的稻殼中含有豐富的微量元素,而配方4的豆秸含有氮元素,都具有促進菌絲生長的作用。
表2 白靈菇陶粒原種培養(yǎng)料配方試驗結(jié)果
配方3和4菌絲粗壯、潔白、濃密,而且滿瓶天數(shù)短,污染率低,是較好的白靈菇陶粒原種配方。配方1和5菌絲較細(xì),說明菌絲活力不足,配方2雖然菌絲粗壯,但是滿瓶天數(shù)較長,說明菌絲生長速度慢,這對于繼續(xù)轉(zhuǎn)接栽培種非常不利。
選取了兩株常用的白靈菇菌株1號和2號制作陶粒原種試驗。白靈菇1、白靈菇2號菌株活化后,分別接種在棉籽殼栽培料、配方3、配方4的陶粒原種培養(yǎng)料上。試驗結(jié)果表明兩株菌株都能在陶粒培養(yǎng)基中正常生長,菌絲長勢相近,生長速度白靈菇1號比白靈菇2號快;同一菌株在3種培養(yǎng)料上的萌發(fā)時間一致的,在陶粒培養(yǎng)基中的菌絲生長速度較快,滿瓶時間比棉籽殼提前7~10 d。
以陶粒作為主要載體制作菌種是一種新的制種方法。陶粒制菌種減少了棉籽殼、木屑的使用,具有環(huán)保、便捷、高效等優(yōu)點。試驗結(jié)果表明,適宜陶粒浸泡液配方是土豆200 g,葡萄糖20 g,加水1000 mL。適宜的陶粒原種栽培料配方是陶粒75%,麩皮12%,稻殼12%,石膏1%(配方3)或陶粒75%,麩皮12%,豆秸12%,石膏1%(配方4)。生產(chǎn)上常用白靈菇菌株1號和2號都能在陶粒培養(yǎng)料中正常生長,且菌絲長勢相近,但白靈菇1號的菌絲生長速度更快。陶粒培養(yǎng)基菌絲滿瓶比棉籽殼提前7~10 d。
試驗結(jié)果對陶粒制作白靈菇菌種具有指導(dǎo)作用。