腎細胞癌中MMP-9和VEGF的表達及其臨床診斷價值

李 娟

（撫順礦務(wù)局總醫(yī)院病理科，遼寧 撫順 113008）

腎細胞癌是我國發(fā)病率較高的泌尿系惡性腫瘤，占全部成人惡性腫瘤的2%～3%[1]。細胞的遷移會首先降解細胞外基質(zhì)，而基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）即是用以降解細胞外基質(zhì)的一組蛋白酶，其在腫瘤的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移中的作用受到關(guān)注。血管內(nèi)皮細胞生長因子（VEGF）為高效血管調(diào)控因子。本研究旨在探討腎細胞癌中MMP-9和VEGF的表達及及其臨床診斷價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集2014年5月至2016年5月我院收治的80例腎細胞癌患者，納入標準：①年滿18周歲；②均經(jīng)手術(shù)病理明確診斷；③術(shù)前未行放化療等其他治療。其中男性42例，女性38例，年齡42～76歲，平均（57.75±6.77）歲。

1.2 方法：收集患者的癌組織標本與周圍正常組織標本，所有標本經(jīng)甲醛固定、石蠟包埋，4 μm厚連續(xù)切片，按試劑盒說明書行免疫組化染色、兔抗人多克隆抗體MMP-9、VEGF試劑盒均來源于美國SantaCruz。依次完成脫蠟，修復(fù)，一抗孵育，二抗孵育，DAB顯色等，用PBS代替一抗作為陰性對照。結(jié)果判讀：在200倍顯微鏡下選5個視野，細胞質(zhì)或細胞膜內(nèi)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒（2～3分）表示陽性，計算每個視野中陽性細胞的比例，＜25%計1分，26%～50%計2分，51%～75%計3分，＞75%計4分，將著色得分與陽性細胞比例得分相乘，最后取5個視野的平均值，＞2分為陽性結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法：采用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計分析，進行t或卡方檢驗，檢驗水準α=0.05，P＜0.05具有統(tǒng)計學(xué)差異。

2 結(jié)果

癌組織中MMP-9表達（+）有63例（78.8%）、VEGF表達（+）有53例（66.3%）；癌旁組織中MMP-9表達（+）有11例（13.8%）、VEGF表達（+）有4例（5.0%）；比較具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。相關(guān)性分析顯示，VEGF與MMP-9表達呈正相關(guān)（r=0.633，P＜0.05）。

3 討 論

腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移是一個涉及基質(zhì)降解、腫瘤血管形成等多個步驟的復(fù)雜過程[2]。MMPs是降解細胞外基質(zhì)的主要酶類，一般分為分泌型MMPs與膜型MMPs，既往研究表示，分泌型MMPs表達越強，其降解ECM與基底膜的能力越強，腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移的危險越大[3]。MMP-9即屬于分泌型MMPs，能夠降解Ⅳ型膠原，而Ⅳ型膠原正是組成血管基底膜的重要成分；此外，還能促進新生血管形成，這無疑對腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移起到了推波助瀾的作用。本結(jié)果顯示，腎細胞癌組織中MMP-9的陽性表達比例明顯高于癌旁組織。既往研究表明，TNM分期越高、低分化以及伴隨淋巴轉(zhuǎn)移，MMP-9蛋白陽性表達越高，提示MMP-9蛋白的表達對腫瘤的分化程度、侵襲與轉(zhuǎn)移有影響。

豐富的血管生長是癌細胞轉(zhuǎn)移的先決條件。VEGF可特異性激活內(nèi)皮細胞，參與血管形成的過程，與腫瘤的發(fā)展進程密切相關(guān)。研究表明，VEGF可刺激MMPs和組織因子的產(chǎn)生，誘導(dǎo)凝血酶的生成，使明膠酶原A激活，促進細胞增生；此外，還可提高血漿酶原活化因子的活性，水解細胞外蛋白，刺激毛細血管更多的生成；還能夠使血管內(nèi)皮細胞通透性發(fā)生改變，促進血管的生成。研究表明，VEGF在很多實體瘤中都表達過度[5]。本研究結(jié)果顯示，癌組織中MMP-9表達（+）有63例（78.8%）、VEGF表達（+）有53例（66.3%），明顯高于癌旁組織。經(jīng)相關(guān)性分析顯示，VEGF與MMP-9表達呈正相關(guān)（r=0.633，P＜0.05）。提示，MMP-9、VEGF在腎細胞癌組織中表達上調(diào)，MMP-9、VEGF在腎細胞癌組織中表達上調(diào)，且二者表達呈正相關(guān)，MMP-9與VEGF可能相互協(xié)同或調(diào)節(jié)對腫瘤的分化、侵襲與轉(zhuǎn)移起作用，可作為腎細胞癌診斷的生物學(xué)指標。