高效液相色譜法在雞蛋中獸藥殘留檢測的應(yīng)用進展

焦安祥,崔凌峰,司 闖,袁璦金,舒利賢,許翔翀

（六盤水市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測中心,貴州六盤水553000）

近年來，隨著生活水平的不斷提高，雞蛋作為高營養(yǎng)食品，在居民的飲食結(jié)構(gòu)和營養(yǎng)需求中占據(jù)重要地位。 近年來，由于養(yǎng)殖業(yè)中用藥的不規(guī)范，導(dǎo)致畜禽產(chǎn)品中獸藥殘留，威脅人體健康，備受社會關(guān)注。 其中大氟沙星、環(huán)丙沙星、沙拉沙星、恩諾沙星等氟喹諾酮類藥物，因菌譜廣、抗菌活性強等特點[1]，深受養(yǎng)殖行業(yè)歡迎。 本文重點圍繞近年發(fā)布的關(guān)于高效液相色譜檢測技術(shù)在上述幾種藥物的檢測方法的文獻， 進行總結(jié)歸納，希望給相關(guān)人員提供一定的參考。

1 檢測方法的探索實踐

2004年，劉媛[2]等建立了高效液相色譜法同時分析雞蛋樣品中4 種氟喹諾酮類藥物殘留量的方法。 該方法以0.1 mol/L 磷酸鹽緩沖液（pH7.0）對雞蛋樣品進行提取，用C18 固相萃取柱進行萃取。檢測條件采用流動相乙腈-0.05 mol/L 磷酸/ 三乙胺緩沖液(pH 2.4)（19:81），熒光檢測器激發(fā)波長280 nm、發(fā)射波長450 nm，流速1.0 ml/min，進樣量20ul。 對不同濃度的沙星混標(biāo)進行檢測，測定結(jié)果為環(huán)丙沙星、恩諾沙星、沙拉沙星的線性范圍分別為2.5—500ug/l， 達諾沙星的線性范圍為0.5—100ug/l。 雞蛋樣品中4 種沙星的加標(biāo)回收率為78.1%—95.7%， 變異系數(shù)為為4.1%—16.2%。 環(huán)丙沙星、恩諾沙星、沙拉沙星的最低檢出限為10ug/kg； 達諾沙星的最低檢出限為2ug/kg。

2006年，農(nóng)業(yè)部頒布了《雞蛋中氟喹諾酮類藥物殘留的測定高效液相色譜法》（農(nóng)業(yè)部781號公告-6-2006）[3]，要求采用C18 固相萃取柱進行萃??； 色譜條件流動相乙腈-0.05 mol/L 磷酸/三乙胺緩沖液(pH 2.4)（19:81），熒光檢測器激發(fā)波長280 nm、發(fā)射波長450 nm，流速1.0 ml/min，進樣量20ul；環(huán)丙沙星、恩諾沙星和沙拉沙星在10-50ug/kg、達氟沙星在2—10μg/kg 添加濃度的回收率為70%-100%，批內(nèi)變異系數(shù)≤10%，批間變異系數(shù)≤15%。

2 檢測方法完善優(yōu)化

科研人員在農(nóng)業(yè)部781 號公告-6-2006 基礎(chǔ)上，不斷完善優(yōu)化。 2016年，姜興華等[4]將標(biāo)準(zhǔn)中色譜條件進行調(diào)整，流動相乙腈-0.05 mol/L 磷酸/三乙胺緩沖液比例調(diào)整為15:85，流速調(diào)整為0.8ml/min，同時測定雞蛋中環(huán)丙沙星、恩諾沙星、沙拉沙星和達氟沙星4 種藥物的殘留量。 結(jié)果為環(huán)丙沙星、 恩諾沙星和沙拉沙星在0.005—0.5 μg/mL、達氟沙星在0.001—0.1μg/mL 濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系, 相關(guān)系數(shù)為0.9998, 加標(biāo)回收率為96.5%-103%, 變異系數(shù)0.83%—1.28%。

2017年，陳小紅等[5]對雞蛋中四種氟喹諾酮類藥物殘留前處理進行優(yōu)化，將提取液磷酸二氫鉀單次（共提取2 次）用量由標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的2ml 增加到10ml， 流動相乙腈－0.05 mol/L 磷酸/ 三乙胺溶液體積比調(diào)整為21:79， 其他色譜條件不變情況下測得環(huán)丙沙星、 恩諾沙星和沙拉沙星在10-50ug/kg、 達氟沙星在2—10 μg/kg 添加濃度的回收率在83.2%-97.3%， 變異系數(shù)在3.6%—8.7%。

3 結(jié)束語

高效液相色譜法作為雞蛋中獸藥殘留十分有效的檢測手段，不同的前處理方法、不同的流動相配比均會對檢測結(jié)果造成影響，想要獲得更高的準(zhǔn)確度和精密度，還需要科研人員進一步優(yōu)化。