部分豬場豬瘟和藍耳病抗體檢測與分析

劉保紅

（河南省鄭州市中牟縣畜牧中心451450）

豬瘟和藍耳病是我國豬場多發(fā)的傳染性疫病，嚴重阻礙我國養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展[1，2]。隨著我國養(yǎng)豬業(yè)不斷向集約化、規(guī)?；较虬l(fā)展，豬的養(yǎng)殖密度越來越高，豬群的購入或外調(diào)頻率逐漸頻繁，導致疫病發(fā)生概率也相應(yīng)提高，目前對于豬瘟、藍耳病等傳染性疫病的防控措施主要以預防為主。對豬群的豬瘟和藍耳病抗體進行監(jiān)測，有利于了解豬場豬瘟和藍耳病疫苗免疫效果和及時調(diào)整免疫程序，對相應(yīng)疾病防控措施的制定有重要的指導意義[3]?；诖耍?017年4～8月應(yīng)用ELISA檢測技術(shù)對中牟縣部分豬場的629份豬血清樣品進行豬瘟和藍耳病抗體水平監(jiān)測，旨在初步了解當?shù)刎i場對豬瘟和藍耳病的防控效果。

1 材料與方法

1.1 相關(guān)定義

豬瘟抗體陽性豬：用豬瘟阻斷ELISA試劑盒檢測為豬瘟抗體陽性的血清對應(yīng)的豬只。

豬藍耳病抗體陽性豬：用藍耳病抗體檢測試劑盒檢測為豬藍耳病抗體陽性的血清對應(yīng)的豬只。

豬瘟抗體合格場：豬瘟抗體陽性率大于等于70%的豬場。豬藍耳病抗體合格場：豬藍耳病抗體合格率大于等于70%的豬場。

1.2 抽樣方案設(shè)計

采用兩階段隨機抽樣結(jié)合便利抽樣方法進行抽樣方案設(shè)計。

第一階段選擇規(guī)模豬場采用便利抽樣方式選擇6個規(guī)模化豬場為研究對象。

第二階段分別計算每個規(guī)模豬場的抽樣數(shù)量。規(guī)模場內(nèi)豬只數(shù)量計算按估計流行率的方法[4]計算，按95%置信水平，預期陽性率90%（豬瘟和藍耳病采用同樣的預期陽性性），7%的可接受誤差，群體數(shù)量均按無窮大，計算公式為，則場群內(nèi)需抽取不少于70只豬的全血。所有豬場按照配額方法隨機選擇仔豬（1～3周齡）、保育豬（4～10周齡）、育肥豬（11～20周齡）和繁殖母豬（＞20周齡）。

1.3 血清樣品

根據(jù)1.2設(shè)計的抽樣方案，最終本次研究獲得來自上述6個規(guī)模豬場的629份豬血清豬場編號分別為A、B、C、D、E和F，各豬場血清樣品數(shù)量分別為80、92、94、76、121和166份，從前腔靜脈采集血液5ml/頭，實驗室常規(guī)方法分離血清，保存于-20℃，待檢。

1.4 主要試劑盒

本次研究所用的豬瘟阻斷ELISA試劑盒 （批號：20161207）和藍耳病抗體檢測試劑盒（批號：20170123）分別購于武漢科前生物科技有限公司和荷蘭Biochek公司。

1.5 檢測方法及判定標準

試驗檢測方法和判定標準均參考試劑盒說明書進行操作和判定。

1.6 數(shù)據(jù)分析

用Excel整理采集到的數(shù)據(jù)，用SPSS23進行統(tǒng)計學卡方檢驗。

2 結(jié)果與分析

2.1 中牟縣部分豬場豬瘟抗體檢測結(jié)果

本次研究共對中牟縣6個豬場的629份血清樣品進行豬瘟抗體檢測，結(jié)果顯示，517份血清樣品檢測為豬瘟抗體陽性，平均陽性率為82.19%，達到了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部高于70.0%的要求，說明受免疫得豬群得到較好保護，但不同豬場豬瘟抗體陽性率絕對值存在一些差異，為66.25%～91.56%，群合格率為83.3%（1/6），從總體統(tǒng)計學檢驗來看差異也不顯著（經(jīng)卡方檢驗，p≥0.05），但A豬場豬瘟抗體陽性率稍低于70.0%，為66.25%；通過分析不同發(fā)育階段豬群豬瘟免疫效果發(fā)現(xiàn)，仔豬、保育豬、育肥豬和繁殖母豬豬瘟抗體陽性率分別為86.55%、69.44%、83.22%和87.0%，總體而言，各階段豬瘟抗體陽性率之間差異不顯著（經(jīng)卡方檢驗，p≥0.05），但從保育豬和育肥豬豬瘟抗體檢測情況看，A場、B場和D場存在一些合格率低于70.0%的情況。

2.2 中牟縣部分豬場藍耳病抗體檢測結(jié)果

通過對中牟縣6個豬場的629份血清樣品進行藍耳病抗體檢測，結(jié)果顯示，584份血清樣品檢測為藍耳病抗體陽性，其平均陽性率為92.85%，說明當?shù)刎i群藍耳病免疫情況較好，豬群能得到較好的保護；不同豬場藍耳病抗體陽性率存在一定差異，但均在85.0%以上，且群合格率為100%，從總體統(tǒng)計學檢驗來看差異也不顯著（經(jīng)卡方檢驗，p≥0.05）；通過分析不同發(fā)育階段豬群藍耳病抗體陽性率差異，與豬瘟抗體陽性率類似，保育豬群抗體陽性率相對較低，為82.63%，而仔豬和育肥豬群抗體陽性率相對較高，分別為89.92%和91.61%，繁殖母豬抗體陽性率最高，為97.30%。但總體來說，各階段豬之間豬瘟抗體陽性率之間差異不顯著（經(jīng)卡方檢驗，p≥0.05）。

3 討論

本次于2017年4～8月對中牟縣部分豬場進行豬瘟和藍耳病抗體水平檢測，旨在通過檢測了解當?shù)刎i場豬瘟和藍耳病的免疫效果，為疫病防控措施的制定提供參考。檢測結(jié)果顯示，被檢測的629份豬血清樣品中分別有519份和584份樣品檢測為豬瘟和藍耳病抗體陽性，平均陽性率分別為82.19%和92.85%，豬瘟和藍耳病抗體合格率均高于國家制定標準（＞70.0%），而通過調(diào)查也發(fā)現(xiàn)，這些規(guī)?；i場場長們對豬瘟和豬藍耳病的免疫比較重視，雖然檢測場數(shù)不是太多，但從側(cè)面也反映出該地區(qū)受免疫豬群維持較高的免疫保護水平。通過分析不同豬場這2種傳染病抗體檢測差異發(fā)現(xiàn)，6個不同豬場豬瘟抗體陽性率分別為66.25%、82.60%、82.98%、72.36%、85.12%和91.56%；藍耳病抗體陽性率分別為85.0%、95.65%、89.36%、88.15%、93.39%和92.77%，只有A豬場豬瘟抗體合格率低于國家制定標準，且該豬場藍耳病抗體合格率也稍低于其他被檢豬場，其原因可能與該豬場飼養(yǎng)水平較低或疫苗免疫程序不規(guī)范有關(guān)；通過分析不同生長發(fā)育階段豬群這2種傳染病血清抗體陽性率發(fā)現(xiàn)均為保育豬階段豬群抗體陽性率較低，分別為69.44%（豬瘟）和82.63%（藍耳?。?，甚至部分豬場保育豬豬瘟血清抗體陽性率不足50.0%，說明此階段豬群可能容易感染豬瘟，應(yīng)加強免疫。值得注意的是，此次研究僅對血清樣品進行抗體檢測，無法區(qū)分是野毒感染或疫苗接種所產(chǎn)生的抗體，需要進一步試驗以確定是否為野毒感染。