核酸探針和PCR技術(shù)在食品檢驗中的運用

□ 孔秋月 安順市食品藥品檢驗所

食品安全是保障人們生活品質(zhì)的關(guān)鍵與基礎(chǔ)。通過科學(xué)的方式重視食品安全質(zhì)量檢查，可以在根本上提升食品檢測質(zhì)量，保障各項信息數(shù)據(jù)的精準(zhǔn)性[1]。

1 核酸探針在食品檢驗中的運用

1.1 核酸探針的概念

核酸探針技術(shù)是一種基于核算分子鏈的特異性進行病毒基因識別的技術(shù)手段。通過在不同的核酸鏈中，對兩個存在互補關(guān)系的堿基序列的有效配對分析，產(chǎn)生分子雜交鏈。在實踐中主要通過同位素標(biāo)記以及生物素標(biāo)記方式探針標(biāo)記堿基序列。

1.2 核酸探針的制備

基因探針通過直接檢驗分析的方式了解位置樣品分析序列，可以確定探針基因以及相關(guān)被檢驗的基因信息是否同源。進行核酸探針制備過程中要重視以下兩點。

第一，通過選擇應(yīng)用的物交叉反應(yīng)中較為顯著的核算片段。第二，確定標(biāo)記物?，F(xiàn)階段較為常見的主要就是通過32p、125I、35S幾種同位素。

1.3 核酸探針在食品檢驗中的運用

核酸探針根據(jù)不同劃分方式確定其具體的類型。在實踐中要合理地利用核算探針基礎(chǔ)理念。通過將核算探針進行基因檢驗有著廣泛的應(yīng)用范圍。在基因工程中利用多數(shù)基因鏈的特異性進行分析，可以有效地檢驗具體狀況。進行基因分析通過核酸分子鑒定分析其具體的雜交過程，則可以剔除有害物質(zhì)。

1.3.1 飲用水安全質(zhì)量監(jiān)測

核酸探針技術(shù)可以應(yīng)用于飲用水的日常監(jiān)測中，如果不進行飲用水的凈化處理直接飲用就會導(dǎo)致病毒、細菌以及蠕蟲等物質(zhì)進入人體內(nèi)，導(dǎo)致人體受到各種安全威脅。重視飲用水安全質(zhì)量監(jiān)測分析，通過核酸探針技術(shù)根據(jù)數(shù)據(jù)分析水中微生物的特點，及時有效地鑒別其存在的有害成分，可以提升檢驗質(zhì)量。

1.3.2 水產(chǎn)品安全質(zhì)量監(jiān)測

隨著人們生活水平的提升，海產(chǎn)品逐漸進入人們的日常生活中，海產(chǎn)品具有更高的營養(yǎng)價值，食品安全也更有保障。通過核酸探針技術(shù)進行水產(chǎn)品檢驗，可以及時發(fā)發(fā)現(xiàn)對人體有害的物質(zhì)，在源頭上合理控制。

2 PCR技術(shù)在食品檢驗中的應(yīng)用

2.1 PCR技術(shù)的概念

PCR技術(shù)屬于基因體外擴增技術(shù)。在檢驗中利用體外擴增特定的雙鏈DNA片段進行處理，其有著較為顯著的擴增速度。DNA雙鏈在實踐中進行受熱處理就會變換為兩個單鏈，通過加入人工合成，與靶DNA目的序列進行兩端的互補，將核苷酸平片段作為引物，根據(jù)規(guī)范要求進行變性處理、退火處理、延伸循環(huán)處理的方式則可以達到大量擴增DNA的目的。DNA分子鏈在擴增處理中，靶DNA則會隨著擴層處理出現(xiàn)幾何級數(shù)增加的狀態(tài)。以擴增循環(huán)次數(shù)為基礎(chǔ)增加DNA，酶分子則就會隨著運動而被消耗，一次擴增處理，其靶DNA就會擴增到近百萬倍。

2.2 PCR技術(shù)在食品檢驗中的應(yīng)用

PCR技術(shù)具有反應(yīng)迅速的優(yōu)勢，有著較強的特異性，生物靈敏性極高，通過此種特征進行食品檢驗可以分析以下幾種病原體。

2.2.1 單核細胞增多李氏桿菌

此種類型的病原體在傳統(tǒng)檢測中主要通過分離鑒定技術(shù)檢驗。通過2～4 w進行克隆，效率較低。利用PCR技術(shù)進行檢驗則可以提升速率。在檢驗中，對食品李氏桿菌溶液進行處理，可以在12 h內(nèi)獲得結(jié)果。此種技術(shù)手段不僅有效地提升了食品檢驗的工作效率與質(zhì)量，也可以有效地檢測出樣本上5～50個細菌。

2.2.2 金黃色葡萄球菌

金黃色葡萄球菌腸毒素如果進入人體中就會導(dǎo)致食物中毒等問題。金黃色葡萄球菌進入人體中會誘發(fā)中毒體休克綜合癥，通過PCR技術(shù)進行金黃色葡萄球菌的檢驗，可以在短時間內(nèi)檢驗毒素，具有良好的特異性以及靈敏性性特征，有效地提升了食物內(nèi)部病毒檢驗的效率。

在檢驗中通過EMA進行金葡萄菌培養(yǎng)物提取模板的設(shè)置，然后將nuc基因作為靶向基因進行PCR反應(yīng)，進行EMA濃度以及曝光時間優(yōu)化，在金黃色葡萄球菌為2×106CFU/mL的時候發(fā)現(xiàn)其可以抑制殺菌DNA擴增。然后可以在含有1%的金黃色葡萄球菌混合懸液中制備的DNA中可擴增出目的片段。

2.2.3 沙門氏菌

沙門氏菌進入人體會導(dǎo)致腹瀉等癥狀。利用PCR技術(shù)檢驗，基于克隆基因特異性序列方式，通過改良熱解裂的方式提取沙門氏菌基因組DNA。對比實驗分析，進行敏感性以及所用引物特異性分析，可以快速地檢驗標(biāo)記食品中存在的沙門氏菌，應(yīng)用此種技術(shù)進行檢驗精準(zhǔn)率高達100%。在實踐中為了提升檢驗結(jié)果，就要根據(jù)規(guī)范要求在實驗條件之下進行有效處理，避免因為污染等因素影響檢驗靈敏度。

3 結(jié)語

重視食品安全檢測分析，可以在根本上保障食品安全性。根據(jù)國家要求，通過科學(xué)的方式進行食品安全檢測分析，合理利用核酸探針以及PCR技術(shù)進行食品監(jiān)測分析，可以在源頭上合理的控制，避免不合格的產(chǎn)品進入市場中，進而構(gòu)建一個良好的市場環(huán)境。