灰裂腹魚全人工繁殖技術(shù)初報(bào)

姜雨杰，趙樹海 ，肖 文，黃志旁

（1.大理大學(xué)東喜瑪拉雅研究院，云南大理 671003；2.中國三江并流區(qū)域生物多樣性協(xié)同創(chuàng)新中心，云南大理 671003；3.大理州漁業(yè)工作站，云南大理 671000）

灰裂腹魚（Schizothorax griseusPellegrin）系鯉科（Cyprinidae）裂腹魚屬（Schizothorax）弓魚亞屬高原淡水魚類，又名面魚〔1〕，主要分布于云貴高原的瀾滄江與烏江水系，棲息于峽谷或流速較高的河流，為冷水性底層魚類。其肉質(zhì)細(xì)嫩，味道鮮美，歷史上曾是滇西地區(qū)重要的經(jīng)濟(jì)魚類〔2〕，為洱海中特色性魚類“弓魚”的4個近緣種之一〔2-3〕，具有較高的經(jīng)濟(jì)價值。然而，近年來由于水電工程、過度采挖河砂、各種來源水污染加劇、外來物種入侵等原因，滇西地區(qū)的灰裂腹魚種群資源量銳減，大理洱海中裂腹魚類已基本絕跡〔3-4〕，進(jìn)行人工繁殖、保護(hù)滇西地區(qū)裂腹魚資源已迫在眉睫。目前，國內(nèi)外僅見有關(guān)灰裂腹魚的自然分布、資源調(diào)查等方面的研究報(bào)道〔5〕，尚未見有關(guān)其他方面的研究報(bào)道。因此，對裂腹魚種質(zhì)資源的保護(hù)與開發(fā)利用潛力巨大，市場前景廣闊〔6〕。本研究團(tuán)隊(duì)自2012年開始從事滇西地區(qū)灰裂腹魚種質(zhì)資源研究與增殖工作，在瀾滄江水系洱海流域的漾濞江、西洱河等地采集到灰裂腹魚親魚數(shù)十尾，并于次年成功人工授精繁殖出灰裂腹魚魚苗近萬尾。這批魚苗經(jīng)過5年多的人工內(nèi)塘馴化培育于2017年3月開展了人工催產(chǎn)并獲得成功，孵化出灰裂腹魚平游小苗6萬余尾，取得了灰裂腹魚全人工化繁殖的成功。

1 材料與方法

1.1 親魚培育野生親體采自云南省大理州大理市西洱河、漾濞縣漾濞江（黑惠江）等地，由大理大學(xué)東喜瑪拉雅研究院肖文研究員鑒定為灰裂腹魚（Schizothorax griseusPellegrin）。2012年用該野生親體繁殖培育出灰裂腹魚F1代種魚，經(jīng)5年的人工池塘養(yǎng)殖，F(xiàn)1代種魚個體體質(zhì)量達(dá)到600～1 000 g。親魚培育池面積在30～40 m2，為長方形，長寬比約為2：1，池深1.5 m，水深0.8～1.1 m。培育用水采用無污染的溪水，透明度達(dá)到120 cm以上，pH值7.6，年平均水溫8～23℃。飼料主要投喂人工膨化顆粒，根據(jù)魚體的大小選擇不同蛋白質(zhì)含量和不同大小的顆粒。4～6 cm的魚苗，投喂蛋白質(zhì)含量為36%的膨化顆粒飼料，飼料顆粒直徑0.5 mm；12～15 cm的魚種，投喂蛋白質(zhì)含量為36%的膨化顆粒飼料，顆粒直徑1.0 mm；30 cm以上的魚，投喂蛋白質(zhì)含量為34%、直徑為2.0 mm的膨化顆粒飼料。投喂量大約為魚體體質(zhì)量的3%左右，每天早晚各投喂1次。

1.2 人工催產(chǎn)及授精催產(chǎn)的親體一般選用F1代，如果沒有也可采用野外采集的性成熟個體。親體性成熟的標(biāo)志為：將雌魚魚體翻轉(zhuǎn)腹部向上，能見到腹部膨大有清晰的卵巢輪廓，按壓時柔軟且有彈性。發(fā)情雄魚特征是吻端有類似于胡子狀的白色追星，輕壓腹部后即有白色的精液流出〔7〕。催產(chǎn)采用兩次胸部注射，第一次注射劑量為：雌魚多潘立酮（地歐酮，DOM）5 mg∕kg、促黃體素釋放激素A2（LRH-A2）5 μg∕kg，雄魚劑量減半；第二次注射劑量為：雌魚 DOM 5 mg∕kg、LRH-A2 5 μg∕kg、絨毛膜促性腺激素（HCG）1 000 IU∕kg，雄魚劑量減半。兩次注射時間間隔12 h。催產(chǎn)后放入池中暫養(yǎng)，雌雄混養(yǎng)（1∶2），每池約50尾。發(fā)現(xiàn)有雄魚追逐雌魚的現(xiàn)象后可以拉網(wǎng)檢查是否排卵，之后每隔3 h拉網(wǎng)檢查1次。采用干法人工授精方法進(jìn)行魚卵人工授精，脫黏后孵化。

1.3 人工孵化受精卵在孵化槽內(nèi)以流水方式進(jìn)行孵化。孵化槽規(guī)格為長120 cm、寬35 cm、深30 cm；水溫控制在（16±0.5）℃，溶解氧6.5 mg∕L以上，pH為7.5；水流速度控制在0.03 m∕s；平均孵化時間150 h，最早120 h。受精卵采集完成后稱重，同時取5 g卵計(jì)數(shù)，從而推算出卵的數(shù)量；孵化出的魚苗采用稱重法測算。魚卵孵化過程中要及時挑出死卵，防止水霉著生。

1.4 魚苗培育剛孵化的魚苗要首先在60 L的長方形玻璃槽中進(jìn)行培育。出膜后6～8 h，卵黃吸收完成，幼苗能短暫地?zé)o方向地間歇游動，開始投喂活體草履蟲；10 d后可以改投全人工制作的蛋白質(zhì)含量為36%的膨化飼料粉末、輪蟲及其他配合飼料，每天3～5次，投喂量以每次10 min內(nèi)吃完為標(biāo)準(zhǔn)；魚苗長大到2.5 cm以后移到10 m3的正方形流水池中培育，繼續(xù)投喂蛋白質(zhì)含量為36%的飼料粉末。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 親魚培育試驗(yàn)中的催產(chǎn)親體為F1代灰裂腹魚，雌魚5齡，最小個體850 g，最大個體1 050 g；雄魚5齡以上，體重400 g左右。5齡的親魚95%左右個體達(dá)性成熟，本次繁殖試驗(yàn)選用的催產(chǎn)親體為平均體質(zhì)量達(dá)到900 g左右的雌魚，選用標(biāo)準(zhǔn)為生長速度快、身體健康、線條流暢、無傷病或畸形現(xiàn)象。

2.2 催產(chǎn)及孵化灰裂腹魚為一次性產(chǎn)卵，每年2～4月份為其繁殖盛期〔8-9〕。2017年3月10日至3月15日，對成熟度不同的親魚分別進(jìn)行了兩批人工催產(chǎn)試驗(yàn)。催產(chǎn)期間，水溫平均16℃，效應(yīng)時間約為70 h左右。見表1。

表1 灰裂腹魚人工催產(chǎn)及孵化情況

2.3 魚苗培育情況剛出膜的F2代幼苗全長0.8～1.0 cm，卵黃囊較大，魚苗平臥于箱底，尾部常微微顫動。出膜后7～9 d，卵黃囊吸收完畢，幼魚能間歇性游動，全長達(dá)到1.2～1.5 cm。至2017年5月中旬，經(jīng)過2個月的培育，成活6萬尾F2代幼苗，成活率為88.2%；最大體長達(dá)到4.5 cm，平均體長為4 cm。見圖1。

3 討論

研究表明人工繁殖的灰裂腹魚F1代魚苗可以通過人工培育的方法，在池塘養(yǎng)殖環(huán)境下正常生長、性腺發(fā)育成熟并成功繁殖出F2代?；伊迅刽~受精卵的孵化以14～17℃時最為理想，池水中性，孵化槽內(nèi)水流速在0.02～0.05 m∕s，水交換量約每天10次?；伊迅刽~性成熟較遲，通常3齡雄性及4齡雌性的個體開始成熟繁殖，繁殖力低，一般4齡雌魚的懷卵量為0.5萬?！?.8萬?！?〕?；伊迅刽~為一次性產(chǎn)卵，根據(jù)地區(qū)氣候環(huán)境差異產(chǎn)卵時間有所不同。大理州漾濞江流域?qū)俸庸刃蜌夂?，晝夜溫差大，冬季氣溫較高，因此，通常每年2～3月即為灰裂腹魚產(chǎn)卵繁殖盛期，也是進(jìn)行人工繁殖的最佳時期；4月以后，卵巢逐漸退化，不宜再進(jìn)行人工繁殖工作。與多數(shù)裂腹魚類相似〔7-10〕，灰裂腹魚受精卵形態(tài)較大，吸水后可達(dá)2 mm左右，因此其胚胎發(fā)育的時間相對較長，在水溫16℃的條件下，從受精卵發(fā)育成仔魚至少需要160 h以上，其間很多環(huán)境因素均可影響受精卵的孵化效果，掌握不當(dāng)，極易造成受精卵的大面積死亡，因此，需要密切留意水溫、水質(zhì)、水流速度等狀況，才能提高受精卵的孵化率。鑒于本研究工作僅在瀾滄江水系洱海流域的漾濞江段完成，所總結(jié)的相關(guān)技術(shù)與方法能否完全適合其他地區(qū)人工繁殖該種魚類尚有待進(jìn)一步研究。