■ 宋新磊 劉國文 李 勇 席鵬彬 林 剛 王 哲*
(1.吉林大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院,吉林長春130012;2.新希望六和飼料股份有限公司,山東青島266100;3.AB Vista亞太有限公司,新加坡329682;4.北京奧特奇生物制品有限公司,北京100600)
金霉素預(yù)混劑(20%含量),金河生物科技股份有限公司生產(chǎn),甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒購自北京普利萊(APPLYGEN)基因技術(shù)有限公司,Trizol、反轉(zhuǎn)錄試劑和熒光定量PCR試劑均購自天根生化科技(北京)有限公司。
試驗周期為42 d。選取360只體重相近[(42±1.0)g]的1日齡AA雛公雞(購自北京華都育種公司提供),隨機分為2個處理,每個處理6個重復(fù),每個重復(fù)30只。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧,基礎(chǔ)日糧為玉米-豆粕型日糧,按照雞飼養(yǎng)標準(NY/T 33-2004)配制,不添加抗生素;試驗組日糧為基礎(chǔ)日糧中添加金霉素(有效含量為50 mg/kg)。配方及營養(yǎng)水平見表1。所有肉雞飼養(yǎng)管理條件一致,自由采食和飲水,按照常規(guī)程序進行免疫接種。
表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
所有試驗肉雞在42 d齡屠宰,屠宰前12 h對整欄試驗雞進行飲食控制,空腹稱重。屠宰前采集血液并分離血清。屠宰后迅速采集腹脂脂肪組織樣品,于-80℃保存,用于后續(xù)實驗室檢測。
空腹稱重時記錄活體重(BW)和采食量(TFI),并計算日采食量(ADFI)和料肉比(FCR)等指標。屠宰后記錄屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、腿肌重和腹脂重,并計算屠體率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。
每個組分別選擇12只個體血清樣品,使用生化試劑盒分別檢測血液中甘油三酯(TG)和膽固醇(CHO)的含量。具體檢測操作按照相應(yīng)試劑盒的說明進行。
每個組分別選擇12只個體的腹脂脂肪組織,使用Trizol試劑提取組織總RNA并檢測提取質(zhì)量。RNA提取質(zhì)量合格后,反轉(zhuǎn)錄生成cDNA作為熒光定量 PCR 的模板。本試驗中 PPARγ、LPL、FABP4、FASN、ACC和CPT-1等基因的表達量被檢測,使用的特異性引物見表2。
表2 熒光定量PCR中使用的特異性引物
使用Excel 2007軟件對原始數(shù)據(jù)進行處理,采用SPSS2.0統(tǒng)計軟件(One-Way ANOVA)進行顯著性分析。試驗結(jié)果用“平均值±標準差”表示,P<0.05作為差異顯著性判斷標準。
雞生長性能的影響
從表3可見,在相同初始體重的基礎(chǔ)上,試驗組(有效含量為50 mg/kg)的最終出欄體重(結(jié)束體重)顯著高于對照組(P<0.05);試驗組的平均日增重、平均日采食量、屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、腿肌重、腹脂重等有所提高,但差異均不顯著(P>0.05);同時,試驗組料肉比低于對照組,但差異不顯著(P>0.05)。
表3 日糧中添加金霉素(有效含量為50 mg/kg)對肉雞生長性能的影響
對于相對重量而言,試驗組飼糧中添加金霉素(終濃度50 mg/kg),肉雞屠體率顯著降低(P<0.05),而腹脂率顯著升高(P<0.05);另外,試驗組的半凈膛率、全凈膛率、腿肌率等略有降低,但差異均不顯著(P>0.05)。
由圖1可以看出,日糧中添加金霉素(有效含量為50 mg/kg),飼喂42 d后,較之對照組,試驗組肉雞血液中甘油三酯(TG)和膽固醇(CHO)的含量顯著升高(P<0.05);此外,日糧中添加金霉素(有效含量為50 mg/kg),可以提高肉雞平均日采食量,但無顯著差異(P<0.05)(見圖2)。
圖3結(jié)果表明,較之對照組,金霉素(有效含量為50 mg/kg)添加組個體腹脂組織中相關(guān)脂肪合成和脂肪酸轉(zhuǎn)運的PPARγ、LPL和FABP4基因的mRNA表達量顯著升高(P<0.05或P<0.01);然而,相關(guān)脂肪酸合成和脂肪酸分解的FASN、ACC、CPT-1基因的mRNA表達量在兩個組間沒有顯著差異。
圖1 日糧中添加金霉素(有效含量為50 mg/kg)42 d后肉雞血液生化指標的影響
圖2 日糧中添加金霉素(有效含量為50 mg/kg)對肉雞日均采食量的影響
圖3 日糧中添加金霉素(有效含量為50 mg/kg)對肉雞脂肪代謝相關(guān)基因表達的影響
金霉素通過抑制環(huán)境中的病原微生物、降低腸壁厚度和促進營養(yǎng)吸收等作用機理促進肉仔雞的生長(張日俊等,1998),而在畜禽養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中具有廣泛的應(yīng)用。但是肉雞通過采食飼料服用的金霉素,有較高比例以原形式隨排泄物排放至環(huán)境中,且不易被降解,而存在著較大環(huán)境風(fēng)險(王冉等,2009)。為了避免長期飼喂而引發(fā)的畜禽產(chǎn)品中藥物殘留、機體抗藥性以及排放污染等問題,本試驗探討了在飼糧中添加金霉素對肉雞生長性能以及腹脂沉積等方面的影響,為肉雞養(yǎng)殖生產(chǎn)中金霉素等抗生素的替代使用與控制提供理論基礎(chǔ)和數(shù)據(jù)支持。
本試驗結(jié)果也發(fā)現(xiàn)了金霉素具有促生長的效果,但與以上的研究結(jié)果不完全一致:飼糧中添加金霉素(有效含量為50 mg/kg),可以顯著提高肉雞的活體重(P<0.05);具有提高屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、腿肌重等生產(chǎn)性能的趨勢,但沒有達到顯著差異的水平(P>0.05)。對于肉雞的相對重量指標,尤其是屠體率,飼喂金霉素(有效含量為50 mg/kg)后具有顯著的降低效應(yīng)(P<0.05)。
腹脂是肉雞養(yǎng)屠宰中低價值的副產(chǎn)品,過多的腹脂產(chǎn)生會造成肉雞養(yǎng)殖經(jīng)濟效益的降低,同時造成環(huán)境污染。值得注意的是,本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),飼糧中添加金霉素(有效含量為50 mg/kg),能夠增加肉雞腹脂的沉積,并且顯著提高肉雞腹脂率,造成了屠宰性能的下降。為了進一步證實這一結(jié)果,本試驗從生化和分子水平上分別檢測了血液中甘油三酯和膽固醇含量、脂肪代謝相關(guān)基因的表達量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)金霉素(有效含量為50 mg/kg)添加組個體的血液中,甘油三酯和膽固醇的含量顯著增加(P<0.05),同時腹脂組織中相關(guān)脂肪合成的PPARγ、LPL和FABP4等基因(Liu等,2017;Cui等,2018)的表達量顯著上調(diào)(P<0.05或P<0.01),與腹脂重增加具有一致的規(guī)律。證實了金霉素(有效含量為50 mg/kg)促進肉雞腹脂沉積的這一結(jié)論,其原因可能是由于金霉素(有效含量為50 mg/kg)促進了采食量的增加,誘導(dǎo)腹脂組織中PPARγ、LPL和FABP4等基因的表達,進而促進了脂肪沉積的增加。
飼糧中添加金霉素(有效含量為50 mg/kg)能夠促進肉雞的生長,顯著提高肉雞的活體重、腹脂率,降低了屠體率;對于促生長性能而言,金霉素在促進畜禽生長的同時,也具有屠宰性能低、產(chǎn)生過多腹脂造成經(jīng)濟效益降低等負面影響。