高效液相色譜測定食品中苯甲酸、山梨酸、糖精鈉方法驗證

◎ 吳 婷

（黃石市食品藥品檢驗檢測中心，湖北 黃石 435000）

1 實驗材料

1.1 試劑與儀器設(shè)備

苯甲酸標準物質(zhì)[1.0 mg·mL-1，編號：GBW(E)100006，中國計量科學(xué)研究院]、山梨酸標準物質(zhì)[1.0 mg·mL-1，編號：GBW(E)100007，中國計量科學(xué)研究院]、糖精鈉標準物質(zhì) [1.0 mg·mL-1，編號：GBW(E)100008，中國計量科學(xué)研究院]，電子天平、高速冷凍離心機、島津LC-2030C 3D高效液相色譜儀。

1.2 儀器條件

色譜柱：Venusil C18Plus 4.6 mm×250 mm，5 μm；流動相：甲醇+乙酸銨溶液=10+90，pH為8.5；流速：1 mL·min-1；檢測波長：230 nm；進樣量：10 μL；柱溫：30 ℃。

2 實驗方法

2.1 混合標準溶液配制

精取苯甲酸標準物質(zhì)、山梨酸標準物質(zhì)、糖精鈉標準物質(zhì)各4.000 mL于20 mL容量瓶中，用水定容至刻度線，即得200 μg·mL-1混合標準溶液。用混標溶液逐級稀釋為 100、50、25、12.5、2.5、0.5 μg·mL-1和 0.2 μg·mL-1標準工作液。

2.2 樣品處理

稱粉碎均勻的約2 g樣品于50 mL離心管中，加水約10 mL，超聲振蕩提取20 min，取出后加入2 mL亞鐵氫化鉀溶液，搖勻，再加入2 mL乙酸鋅溶液，加水至刻度，搖勻，離心，吸出上清液，過0.22 μm濾膜待上機。

計算公式：

式中：X為試樣中待測組分的含量，單位g·kg-1；Cl為由標準曲線得出的試樣液中待測物中質(zhì)量濃度，單位mg·L-1；V為試樣定容的體積，單位為mL；1 000為由mg·kg-1轉(zhuǎn)換為g·kg-1的換算因子；m為試樣質(zhì)量，單位為g。

3 結(jié)果與結(jié)論

3.1 標準曲線

測定苯甲酸、山梨酸、糖精鈉在0.2～200 mg·L-1范圍內(nèi)線性良好，苯甲酸回歸方程y=31 991.7x，相關(guān)系數(shù)為0.999 7；山梨酸回歸方程y=60 861.2x，相關(guān)系數(shù)為0.999 8；糖精鈉回歸方程y=21 521.4x，相關(guān)系數(shù)為0.999 7。

3.2 檢出限

苯甲酸在0.25 mg·L-1時，信噪比大于3∶1，檢出限為 0.006 g·kg-1；山梨酸在 0.20 mg·L-1時，信噪比大于3∶1，檢出限為0.005 g·kg-1；糖精鈉在0.50 mg·L-1時，信噪比大于3∶1，檢出限為0.012 5 g·kg-1。

3.3 精密度

將濃度為25 mg·L-1的苯甲酸、山梨酸、糖精鈉混標連續(xù)進樣6次，其結(jié)果見表1，RSD在0.02%～0.10%，精密度良好。

表1 苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的重復(fù)性試驗表

3.4 回收率

準確稱取3個約2 g白酒陰性樣品，樣1加入苯甲酸（1.0 mg·mL-1）、山梨酸（1.0 mg·mL-1）、糖精鈉（1.0 mg·mL-1）0.14 mL，樣2加入苯甲酸（1.0 mg·mL-1）、山 梨 酸（1.0 mg·mL-1）、 糖 精 鈉（1.0 mg·mL-1）0.60mL，樣 3加入苯甲酸（1.0 mg·mL-1）、山梨酸（1.0 mg·mL-1）、糖精鈉（1.0 mg·mL-1）1.00 mL，實驗結(jié)果見表2。苯甲酸加標回收率介于95.8%～100%，山梨酸加標回收率介于89.4%～99.8%，糖精鈉加標回收率介于97.3%～102.7%。回收率較高，均能滿足要求。

表2 回收率實驗結(jié)果表

4 結(jié)論

按照GB 5009.28-2016《食品安全國家標準 食品中苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的測定》測定[1]，苯甲酸、山梨酸、糖精鈉在0.2～200 mg·L-1范圍內(nèi)均線性良好，相關(guān)系數(shù)均≥0.9997。苯甲酸檢出限0.006 g·kg-1，山梨酸檢出限為0.005 g·kg-1，糖精鈉檢出限為0.012 5 g·kg-1，與國家標準中 0.005 g·kg-1有些差別，可能與不同品牌儀器及色譜條件有關(guān)，有待進一步探討[2-3]。苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的重復(fù)性試驗RSD在0.02%～0.10%，精密度良好。加標回收率均在89.4%～102.7%，回收率良好。