■李宇敏 楊美璐 吳峰洋 陳寶江 谷子林 陳賽娟 劉亞娟*
(1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,河北保定071001;2.河北省山區(qū)農(nóng)業(yè)工程技術(shù)研究中心,河北保定071001;3.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)山區(qū)研究所,河北保定071001)
畜禽養(yǎng)殖環(huán)節(jié)中抗生素、激素或化學(xué)藥物的濫用,不僅會(huì)使畜禽產(chǎn)生耐藥性,還可能通過藥物殘留進(jìn)入人類食物鏈,威脅人類健康。隨著消費(fèi)者對(duì)食品安全的日益重視,開展無(wú)抗化養(yǎng)殖是畜禽業(yè)健康發(fā)展的必經(jīng)之路,因而高效、綠色的飼用添加劑研發(fā)成為研究重點(diǎn)。枸杞多糖(LBP)是從枸杞中提取的一種水溶性蛋白多糖,是枸杞子中主要免疫活性成分。據(jù)報(bào)道,LBP能夠清除自由基,提高谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,抑制過氧化反應(yīng)。能夠增強(qiáng)吞噬細(xì)胞功能,促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖,增強(qiáng)補(bǔ)體活性,從而調(diào)節(jié)機(jī)體免疫。此外還具有保護(hù)生殖系統(tǒng)、提高生產(chǎn)性能、調(diào)節(jié)血脂和降血糖等多種功效。有關(guān)LBP對(duì)生長(zhǎng)獺兔營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率及氮代謝等相關(guān)研究未見報(bào)道,本文將就此開展研究,為L(zhǎng)BP在畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
試驗(yàn)選擇體況健康,體重基本一致[(1.35±0.15)kg]的60 d斷乳獺兔,LBP購(gòu)自某生物工程有限公司,棕紅色粉末,純度為50%(UV)。飼養(yǎng)試驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)室分析均在河北農(nóng)業(yè)大學(xué)進(jìn)行。
消化代謝試驗(yàn)采用單因子設(shè)計(jì),64只(公母各半)60 d斷奶獺兔隨機(jī)分為4組(每組16個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)1只)。1組為對(duì)照組,飼喂基礎(chǔ)日糧,2、3、4組為試驗(yàn)組,分別在基礎(chǔ)飼糧的基礎(chǔ)上添加0.1%、0.2%、0.3%的LBP。所有試兔統(tǒng)一管理,相同飼養(yǎng)環(huán)境,自由采食,充足飲水。預(yù)飼期5 d,正試期7 d?;A(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。
表1 基礎(chǔ)飼糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
采用全收糞法進(jìn)行消化試驗(yàn),試驗(yàn)過程中以單只試兔為單位,記錄日采食量,收集全部新鮮糞、尿并稱重。糞便每個(gè)樣品平均分為兩份,一份用10%鹽酸溶液固定揮發(fā)性氮,用于測(cè)定粗蛋白質(zhì),另一份不作處理,用于測(cè)定能量及其他常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)將收集的糞便按重復(fù)充分混勻,65~70℃,48h烘干,回潮24 h后準(zhǔn)確稱重,測(cè)定初水分,然后將風(fēng)干樣品打碎,采用四分法留樣備測(cè)糞中能量及常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量。尿樣每日收集、固氮,試驗(yàn)結(jié)束時(shí),按重復(fù)充分混勻測(cè)定含氮量。
1.4.1 獺兔飼料表觀消化率指標(biāo)測(cè)定
分別采集基礎(chǔ)飼糧、試驗(yàn)飼糧和糞樣,測(cè)定各常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分??偰?GE)采用長(zhǎng)沙友欣YX-ZR天鷹自動(dòng)量熱儀測(cè)定;粗灰分(Ash)含量采用550℃灼燒法(GB/T6438-92)測(cè)定;干物質(zhì)(DM)含量測(cè)定時(shí)先測(cè)出樣品的水分含量(GB/T 6435—86),進(jìn)一步計(jì)算出DM含量;粗蛋白(CP)含量采用Foss Kjeltec8400全自動(dòng)凱氏定氮儀測(cè)定;粗纖維(CF)、中性洗滌纖維(NDF)和酸性洗滌纖維(ADF)含量采用ANKOM A2000i全自動(dòng)纖維分析儀測(cè)定;粗脂肪(EE)含量采用索氏抽提法(GB/T 6433—2006)測(cè)定;鈣(Ca)含量采用高錳酸鉀滴定法(GB/T6436—2002)測(cè)定;磷(P)含量采用鉬黃比色法(GB/T6437—2002)測(cè)定。
飼糧中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率計(jì)算公式為:
某營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率(%)=(食入某營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)量-對(duì)應(yīng)糞中某營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)量)/食入某營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)量×100。
被測(cè)飼料中某營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率計(jì)算公式為:D(%)=(A-B)/(F+B)×100
F=(C1×f)/[C1×f+C0×(1-f)]
式中:D——被測(cè)飼料中某營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率(%);
A——試驗(yàn)飼糧中該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率(%);
B——基礎(chǔ)飼糧中該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率(%);
F——被測(cè)飼料提供的該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)占試驗(yàn)飼糧總營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的比例(%);
f——試驗(yàn)飼糧中摻入被測(cè)飼料的比例(%);
C0——基礎(chǔ)飼糧中該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的含量(%);
C1——被測(cè)飼料中該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的含量(%)。
1.4.2 獺兔氮平衡指標(biāo)測(cè)定及計(jì)算
氮吸收量(g/d)=氮攝入量-糞氮排放量
氮沉積量(g/d)=氮攝入量-糞氮排放量-尿氮排放量
氮消化率(%)=氮吸收量/氮攝入量×100氮利用率(%)=氮沉積量/氮攝入量×100氮生物利用率(%)=氮沉積量/氮吸收量×100
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel軟件進(jìn)行初步處理,利用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件ANOVA方法進(jìn)行方差分析,差異顯著時(shí)采用LSD方法進(jìn)行多重比較,試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。
由表2可知,能量表觀消化率和消化能以對(duì)照組最低,試驗(yàn)組均略高于對(duì)照組,其中以0.2%組最高,分別比對(duì)照組高3.95%、3.95%,其中對(duì)照組和0.2%組能量表觀消化率接近差異顯著(P=0.057)。結(jié)果表明,飼糧中添加LBP能提高飼糧能量表觀消化率和消化能。
表2 LBP對(duì)獺兔表觀消化率和消化能的影響
表3 LBP對(duì)獺兔營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響(%)
由表3可知,試驗(yàn)組CP、CF的表觀消化率均高于對(duì)照組,其中CP和CF的表觀消化率以0.2%組最高,分別比對(duì)照組高2.75%、12.16%;EE的表觀消化率以0.3%組最高,比對(duì)照組高1.19%,但差異均不顯著(P>0.05)。NDF的表觀消化率以0.3%組最高,對(duì)照組次之。ADF的表觀消化率以對(duì)照組最低,0.1%組最高,提高了1.22個(gè)百分比。0.1%組P的表觀消化率略高于對(duì)照組,Ca的表觀消化率以0.2%組最高。上述結(jié)果表明,飼糧中添加LBP可提高生長(zhǎng)獺兔的表觀消化率,但差異不顯著(P>0.05)。
由表4可知,試驗(yàn)組攝入氮量均略高于對(duì)照組,說明飼糧中添加LBP可提高生長(zhǎng)獺兔的攝入氮量。以0.3%組中糞氮和尿氮含量最高,分別比對(duì)照組高9.19%、6.82%,但差異均未達(dá)顯著水平(P>0.05)。可消化氮量和氮沉積量試驗(yàn)組均高于對(duì)照組,可消化氮量以0.2%組、0.3%組最高,氮沉積量以0.2%組最高。氮表觀消化率、氮利用率和氮生物利用率以對(duì)照組最低,0.2%組最高,說明飼糧中添加LBP可提高氮的利用率,以添加0.2%效果最佳。
表4 LBP對(duì)獺兔氮代謝的影響
飼料價(jià)格以試驗(yàn)期間購(gòu)買原料價(jià)格為標(biāo)準(zhǔn),按實(shí)際添加比例計(jì)算(見表5),對(duì)照組飼糧的成本為1.80元/kg,LBP價(jià)格為60元/kg。試驗(yàn)組分別添加0.1%、0.2%、0.3%LBP,飼料成本分別增加了0.06、0.12、0.18元/kg。結(jié)合前期LBP對(duì)獺兔生產(chǎn)性能的影響研究,LBP能夠提高增重,改善被毛品質(zhì),能夠增加經(jīng)濟(jì)效益,具有添加意義。
表5 飼料成本分析
本次試驗(yàn)結(jié)果表明,獺兔飼糧中添加0.2%LBP,能量表觀消化率提高了3.95%,CP、CF表觀消化率分別提高了2.75%、12.16%。由此可知,日糧中添加適量的LBP可提高生長(zhǎng)獺兔對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率,這可能與枸杞多糖的營(yíng)養(yǎng)成分有關(guān),枸杞子中不僅含有胡蘿卜素、硫胺素、核黃素、煙酸、抗壞血酸等多種維生素以及蘇氨酸、纈氨酸等多種氨基酸,還含有牛磺酸等多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),可以補(bǔ)充和提高飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。同時(shí)有大量試驗(yàn)研究表明,飼料中添加LBP可提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能,可能與LBP提高了動(dòng)物對(duì)飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率有關(guān)。
氮代謝試驗(yàn)是研究動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)增減規(guī)律的必要手段。動(dòng)物食入的氮,一部分沉積用于合成機(jī)體蛋白質(zhì),另一部分成為消化代謝后的廢棄產(chǎn)物隨著糞尿排出體外,構(gòu)成氮的平衡代謝和蛋白質(zhì)的動(dòng)態(tài)平衡體系。糞氮和尿氮是食入氮的兩個(gè)損失部分,糞氮是食入飼糧蛋白質(zhì)經(jīng)過消化道沒有被吸收,這部分受飼糧蛋白質(zhì)水平的影響很大。尿氮是被吸收的氨基酸參加組織代謝,沒有被利用合成體蛋白而脫氨后由尿排出,這部分氮受飼料氨基酸平衡的影響較大。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),隨著攝入氮的增加,糞和尿中的含氮量也在增加,說明動(dòng)物機(jī)體的攝入氮量和糞、尿氮呈正相關(guān)。本試驗(yàn)結(jié)果表明,在飼糧中添加LBP可以提高氮沉積量,試驗(yàn)組氮沉積量提高了0.15~0.27 g/d,差異不顯著(P>0.05)。有相關(guān)文獻(xiàn)顯示,當(dāng)飼糧中蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物比例適宜時(shí),能夠提高動(dòng)物的氮沉積。本試驗(yàn)試驗(yàn)組氮沉積量有所提高可能與LBP提高了動(dòng)物機(jī)體的表觀消化率有關(guān)。孫曉雨等研究發(fā)現(xiàn),口服LBP對(duì)腸道黏膜系統(tǒng)發(fā)揮正向免疫調(diào)節(jié)作用,石玉翔等研究發(fā)現(xiàn),LBP可增加小鼠小腸絨毛上的杯狀細(xì)胞(GC)數(shù)量,從而影響腸黏膜屏障結(jié)構(gòu),增加腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力。同時(shí)陳賽娟等研究發(fā)現(xiàn),在泌乳母兔飼糧中添加LBP可降低血清尿素氮(BUN),BUN含量與日糧中含氮物質(zhì)總量、蛋白質(zhì)的利用率等有關(guān),當(dāng)日糧中含氮物質(zhì)增多或蛋白質(zhì)利用率降低時(shí),均可使BUN含量升高。說明在泌乳母兔日糧中添加LBP可提高蛋白質(zhì)利用率,且不會(huì)對(duì)母兔腎功能造成損害。由于以上各方面的共同影響,有效提高了動(dòng)物機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率,從而提高了氮利用率和氮表觀消化率。與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相同,試驗(yàn)組氮表觀消化率、氮利用率、氮生物利用率均高于基礎(chǔ)組,差異不顯著(P>0.05)。
在飼糧中添加LBP可以不同程度地提高生長(zhǎng)獺兔營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率和氮代謝能力,同時(shí)能夠增加經(jīng)濟(jì)效益,推薦添加量為0.2%。