口蹄疫OA型疫苗安全試驗及抗體效價檢測

烏林花，何新梅，薩仁，莫日根別力格，張鈞德

（內(nèi)蒙古阿拉善左旗動物疫病預(yù)防控制中心，阿拉善 750300）

0 引言

根據(jù)重大動物疫病集中強(qiáng)制免疫要求，在大范圍集中免疫前先進(jìn)行小范圍安全性試驗。2018年秋季訂購的口蹄疫OA型疫苗首次在阿左旗使用，阿左旗動物疫病預(yù)防控制中心選擇農(nóng)區(qū)、牧區(qū)各1個點(diǎn)，進(jìn)行安全性試驗和抗體效價檢測。

1 材料

1.1 口蹄疫OA型二價滅活疫苗

批準(zhǔn)文號：獸醫(yī)生字2018004；生產(chǎn)批號：2018004；生產(chǎn)日期：2018004；有效期至2019年8月；規(guī)格：100 mL/瓶；保護(hù)期4～6個月；生產(chǎn)廠家：新疆天康畜牧生物股份有限公司。

1.2 腎上腺素注射液

批準(zhǔn)文號：獸藥字（2014）070011221；生產(chǎn)批號：170412；生產(chǎn)日期：20170412；有效期至2019年3月；規(guī)格：1 mL/只；生產(chǎn)廠家：吉林省華牧動物保健品有限公司。

1.3 診斷試劑

口蹄疫病毒O型抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒，批號：20180807101-1，有效期2019年2月6日；口蹄疫病毒A型抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒，批號：20180709103-1。中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)。

1.4 保定器械

帆布保定圍欄和免疫活動保定欄各1組。

1.5 試驗動物

農(nóng)區(qū)選自巴潤別立鎮(zhèn)滿達(dá)種羊場的阿杜繁殖母羊和羔羊，牧區(qū)選擇吉蘭泰鎮(zhèn)西尼呼都格嘎查散養(yǎng)的牛羊。

1.6 其它

金屬10 mL注射器2具，型號為LZT-Q的獸醫(yī)可調(diào)連續(xù)注射器4具，12號1.5 cm針頭4盒，尖嘴鉗1把，防護(hù)用品若干套。

2 方法

口蹄疫OA型二價滅活疫苗羊采取頸部肌肉注射每只1 mL，牛采取臀部肌肉注射每頭2 mL。

3 注射器的選擇

10 mL金屬注射器太小，裝藥繁瑣；20 mL金屬注射器太大，手握不??；帶長管的連續(xù)注射器容易產(chǎn)生氣泡、有空針；手槍式連續(xù)注射器太重，無法注射0.5 mL，且容易出問題；疫苗瓶安裝在連續(xù)注射器上的，空氣不通暢時無法注射。選擇多種連續(xù)注射器和金屬注射器，分別抽取1瓶100 mL藥液，向100 mL量杯中注射，最后確定10 mL金屬注射器和型號為LZT-Q的獸醫(yī)可調(diào)連續(xù)注射器，精確度最高[1]。

4 試驗時間與氣溫

2018年9月5～7日進(jìn)行疫苗注射，當(dāng)天氣溫10～23 ℃。采血選擇在注苗21 d后的9月27～29日，巴潤別立鎮(zhèn)滿達(dá)種羊場10 mL金屬注射器注射的和連續(xù)注射器注射的各采集血樣30份，共60份；吉蘭泰西尼呼都格采集部分散養(yǎng)戶的牛和羊每戶采血30份左右，8戶共210份血樣[2]。

5 疫苗儲藏及運(yùn)輸

疫苗置于冷藏箱中，里面有冰袋，溫度3～7 ℃，疫苗隨用隨取。

6 試驗過程

（1）巴潤別立鎮(zhèn)滿達(dá)種羊場的三圈繁殖母羊和羔羊共注射146只，其中10 mL金屬注射器注射50只羊，羊體噴紅色自噴漆標(biāo)記；連續(xù)注射器注射96只羊，羊體噴綠色自噴漆標(biāo)記。從9∶40開始注射疫苗，10∶26結(jié)束，因圈舍較大，使用活動保定欄保定羊。

（2）吉蘭泰鎮(zhèn)西尼呼都格嘎查共注射14家3 196只羊、89頭牛，全部使用連續(xù)注射器注射。從上午7∶42開始注射一直到18∶03結(jié)束，因圈舍較小，使用牧戶較小圈舍保定羊，沒有使用活動保定欄。

7 試驗結(jié)果

7.1 安全試驗結(jié)果

免疫注射后24 h內(nèi)通過電話咨詢，西尼呼都格嘎查阿某某家的2只成年羊（1只山羊和1只綿羊），注射疫苗后表現(xiàn)食欲不振、精神萎靡、趴窩不起。注射腎上腺素1 mL后綿羊在當(dāng)天下午恢復(fù)正常，山羊在當(dāng)天晚上又注射1 mL腎上腺素，于第2天恢復(fù)正常。經(jīng)48 h咨詢統(tǒng)計，全部試驗牛羊再無出現(xiàn)副反應(yīng)。此次疫苗安全試驗羊的副反應(yīng)發(fā)生率為0.06%，在正常范圍內(nèi)。牛未發(fā)生副反應(yīng)，牛羊都未死亡。該批口蹄疫疫苗可以在全旗范圍內(nèi)開展集中免疫注射[3]。

7.2 抗體效價檢測結(jié)果

注射口蹄疫OA型二價滅活疫苗，O型抗體效價平均合格率為80.37%，達(dá)到了國家要求的群體合格率70%以上的標(biāo)準(zhǔn)；A型抗體效價平均合格率為56.67%，沒有達(dá)到合格標(biāo)準(zhǔn)，見表1。

8 結(jié)論

（1）出現(xiàn)不良反應(yīng)主要是由于該牧戶以散養(yǎng)為主，羊群很少入圈，突然入圈注射疫苗造成羊只的恐慌，應(yīng)激反應(yīng)導(dǎo)致不良反應(yīng)的發(fā)生。

（2）因牧戶發(fā)現(xiàn)的早，通過電話通知了防疫人員，及時采取了藥物治療而避免了死亡。

（3）口蹄疫OA型二價滅活疫苗屬于一種兩型疫苗，O型抗體效價達(dá)到合格，A型不合格，這樣的結(jié)果具有普遍性。用檢測效價指導(dǎo)防疫只能以O(shè)型為準(zhǔn)。

表1 口蹄疫OA疫苗實驗情況統(tǒng)計表 單位：只,%

（4）環(huán)境氣溫越高，效價越低。防疫人員攜帶的疫苗，時間越長，注射后的效價越低，特別是中午。說明疫苗拿出疫苗庫后，雖然使用疫苗冷藏箱，但是保存效果不好，注射疫苗時，必須使用冷藏箱。

（5）疫苗拿出冷藏箱后2 h以上的，禁止使用。給那某、謝某的羊注射疫苗時，為不浪費(fèi)疫苗，將幾個疫苗瓶剩余的少許疫苗集中在一起注射的，效價不達(dá)標(biāo)。

（6）經(jīng)向疫苗生產(chǎn)場咨詢，針對近期生產(chǎn)的疫苗效價不高問題，答復(fù)是使用的疫苗來自新疆天康，診斷液為蘭州獸研所生產(chǎn)。如果用新疆天康的診斷液檢測天康的疫苗效價會很高，同樣用蘭州獸研所生產(chǎn)的診斷液檢測蘭州的疫苗同樣效價會很高。但是疫苗是招標(biāo)的，診斷液是從入圍企業(yè)中自行采購，普遍使用蘭州獸研所生產(chǎn)的診斷液。