基于代謝組學(xué)的支氣管哮喘生物標(biāo)志物研究進展

孫益，萬力生，李佳曦，陳爭光

(1.遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)，廣東 珠海 519041；2.深圳市兒童醫(yī)院，廣東 深圳 518026)

支氣管哮喘是一種異質(zhì)性的疾病，本質(zhì)為氣道的慢性炎癥，臨床表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作的喘息、咳嗽、氣促、胸悶以及可逆性的氣流受限[1]。近年來哮喘的發(fā)病率和病死率有逐年增加的趨勢，特別是兒童，全世界目前發(fā)病率約為4.3%～8.6%[2]，至少有3億人罹患此病[3]，我國約有1 000～2 000萬患者[4]。同時，哮喘的治療費用在世界許多國家衛(wèi)生支出所占的比重越來越高。因此，支氣管哮喘嚴(yán)重危害人類身體健康，尤其是兒童，對兒童生理和心理產(chǎn)生極大影響。哮喘不僅僅是一種衛(wèi)生問題，同時也是嚴(yán)重的社會公共問題，引起了各國政府的高度重視，更多的學(xué)者從哮喘的發(fā)病機制出發(fā)，尋找有效、便捷地診斷支氣管哮喘，以及控制和治療支氣管哮喘的方法顯得極為重要。

支氣管哮喘是一種慢性的呼吸道疾病，是非特異性的氣道炎癥，有研究證實，支氣管哮喘是由炎癥細(xì)胞活化后產(chǎn)生一系列的炎性介質(zhì)而引起的氣道高反應(yīng)，而這些炎性介質(zhì)可作為支氣管哮喘的生物標(biāo)志物[5]。Nadi等[6]通過酶聯(lián)免疫吸附法研究90例哮喘患者與健康對照組血漿中可溶性選擇素-L的水平，得出哮喘患者血漿中可溶性選擇素-L水平明顯高于健康對照組，將可溶性選擇素-L與支氣管哮喘的發(fā)病有關(guān)，可作為支氣管哮喘的一種標(biāo)志物。Vercelli[7]通過對小鼠哮喘模型表達譜的芯片分析顯示高濃度的精氨酸酶Ⅰ和精氨酸酶Ⅱ的活性與哮喘的炎性介質(zhì)白細(xì)胞介素-4(IL-4)和白細(xì)胞介素-13(IL-13)表達具有相關(guān)性，從而可以得出精氨酸通路與哮喘的發(fā)病機制有重要關(guān)聯(lián)。Peters-Golden等[8]研究發(fā)現(xiàn)花生四烯酸代謝通路與支氣管哮喘急性發(fā)作有關(guān)，可能為其特異性生物標(biāo)志物。李永霞等[9]通過檢測支氣管哮喘患者急性發(fā)作期與緩解期兩個不同時期血清中的8-異前列腺素 (8-ISO-PG)水平，并分析其水平與第1秒用力呼氣容積占預(yù)計值百分比(FEV1%pred)相關(guān)性，得出哮喘患者急性發(fā)作期血清中的8-ISO-PG明顯升高，經(jīng)過治療后的支氣管哮喘達緩解期，緩解后血清中的8-ISO-PG水平較急性發(fā)作期明顯降低,但與健康組人群相比，水平仍較高。因此可以將8-ISO-PG作為一種標(biāo)志物用于評價哮喘患者的病情嚴(yán)重程度以及隨訪其治療的效果。然而，由于支氣管哮喘表型復(fù)雜，受到環(huán)境因素及遺傳異質(zhì)性的共同影響，傳統(tǒng)的檢驗方法受到一定限制[10]。代謝組學(xué)技術(shù)的發(fā)展以及運用于支氣管哮喘的研究極大的彌補了傳統(tǒng)檢驗方法的缺陷，它不僅僅提高了檢測的準(zhǔn)確性以及靈敏度，還將統(tǒng)計學(xué)分析融合其中，可以在一次的檢測分析中同時查找出多個可能與疾病相關(guān)的生物標(biāo)志物，并分析出主要的生物標(biāo)志物。通過測定不同時期、不同狀態(tài)下機體代謝物質(zhì)的變化可了解機體的整體功能狀態(tài)。

1 代謝組學(xué)簡介

代謝組學(xué)是關(guān)于生物體在受到外來刺激后機體各系統(tǒng)產(chǎn)生內(nèi)源性代謝物質(zhì)的變化，包括代謝物的種類、數(shù)量及代謝物質(zhì)的變化規(guī)律。由于小分子代謝物是生物體功能活動的最終表現(xiàn)，可以真實的體現(xiàn)機體在刺激下對外界的應(yīng)答與調(diào)節(jié)，并且表現(xiàn)及時、靈敏、特異性高。因而被視為生物體功能狀態(tài)的“生物表型”[11]。代謝組學(xué)的研究方法常見的有高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(LC-MS)、磁共振同位素檢測技術(shù)(NMR)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)等[12-14]，代謝組學(xué)技術(shù)是一種無靶向性、動態(tài)性研究技術(shù)，產(chǎn)生的內(nèi)源性代謝產(chǎn)物種類多，利用多元的統(tǒng)計學(xué)方法，動態(tài)分析差異性代謝產(chǎn)物[15]。隨著其技術(shù)的不斷進步與優(yōu)化，逐步運用于各個領(lǐng)域的研究。

1.1 代謝組學(xué)技術(shù)運用于支氣管哮喘研究 近年來，國內(nèi)外一些學(xué)者通過采集支氣管哮喘患者的外周血液、尿液、呼氣冷凝液以及肺泡灌洗液來測定哮喘患者的生物標(biāo)志物。通過研究可以發(fā)現(xiàn)支氣管哮喘發(fā)病過程中的代謝標(biāo)志物，對存在的代謝物進行分析，尋找與支氣管哮喘發(fā)病機制相關(guān)的代謝標(biāo)志物，了解其可能的發(fā)病機制，以進一步為支氣管哮喘的治療及預(yù)防提供理論依據(jù)。

1.1.1 代謝組學(xué)血液生物標(biāo)志物研究 血液是人體重要的體液，可反映機體不同時期、不同生理病理狀態(tài)下機體的代謝狀態(tài)。Jung等[16]運用NMR對哮喘患者血漿中的代謝產(chǎn)物進行研究發(fā)現(xiàn)，哮喘患者血漿中的蛋氨酸、精氨酸、谷氨酸、甲酸、乙酸、甲醇、組氨酸、膽堿等物質(zhì)水平與正常健康人群相比發(fā)生了變化，探討了這些代謝物與支氣管哮喘之間的相互關(guān)系，從而得出這些物質(zhì)可能是支氣管哮喘的生物標(biāo)志物。Ried等[17]利用代謝組學(xué)技術(shù)探討支氣管哮喘患者與健康對照組人群血漿中代謝物物質(zhì)的變化，發(fā)現(xiàn)哮喘組患者磷脂酰膽堿濃度較正常組人群降低，而血清中卵磷脂濃度較正常人升高。Ceylan等[18]通過檢測哮喘患者血清中一氧化氮(NO)、精氨酸含量，證實了精氨酸-NO這一代謝通路在哮喘發(fā)病的機制中起著重要的作用。陳馨馨等[19]利用該代謝組學(xué)技術(shù)研究哮喘家兔模型組血清與正常對照組的代謝產(chǎn)物，研究發(fā)現(xiàn)半乳糖醛酸、異檸檬酸含量升高，而6-脫氧吡喃甘露糖、果糖含量較正常對照組降低，明確過敏性哮喘可能存在的標(biāo)志物。

1.1.2 代謝組學(xué)尿液生物標(biāo)志物研究 尿液的收集是無創(chuàng)的，適用于任何年齡階段標(biāo)本的收集與研究，簡便易行。Saude等[20]利用NMR技術(shù)分析支氣管哮喘兒童尿液的代謝產(chǎn)物，通過分析尿液中的代謝物質(zhì)，可以識別出支氣管哮喘兒童，并進一步鑒別穩(wěn)定型哮喘和不穩(wěn)定型哮喘。通過研究這些生物標(biāo)志物的變化，能更好的識別和診斷支氣管哮喘，并根據(jù)代謝標(biāo)志物的不同分析出與支氣管哮喘嚴(yán)重程度有關(guān)的生物標(biāo)志物。Mattarucchi等[21]應(yīng)用LC-MS代謝組學(xué)的方法分析了不同表型支氣管哮喘兒童尿液中的代謝產(chǎn)物變化，探明了不同哮喘表型的代謝組學(xué)本質(zhì)。謝穎等[31]利用GC-MS技術(shù)研究麻黃-杏仁配伍在支氣管哮喘模型尿液中的代謝產(chǎn)物變化，發(fā)現(xiàn)氨基酸代謝、脂肪酸代謝、糖代謝三大通路代謝物質(zhì)均有變化，整體上探討了麻杏配伍對哮喘內(nèi)源性代謝物的影響。

1.1.3 代謝組學(xué)呼氣冷凝液生物標(biāo)志物研究 近年來，學(xué)者們廣泛運用代謝組學(xué)技術(shù)研究支氣管哮喘呼氣冷凝液中代謝物質(zhì)的變化，具有簡便、無創(chuàng)安全、可重復(fù)等優(yōu)點[22]。Carraro等[23]通過代謝組學(xué)的質(zhì)譜分析對非重癥哮喘患兒與重癥哮喘患兒的呼氣冷凝液中的代謝物質(zhì)進行分析，得出維甲酸、維生素D、腺苷等物質(zhì)與哮喘的嚴(yán)重程度相關(guān)。而通過對比分析哮喘患兒與正常健康兒童的呼氣冷凝液的代謝產(chǎn)物，發(fā)現(xiàn)哮喘患兒呼氣冷凝液中乙?；?、NO、氧化物的含量明顯升高，與健康兒童比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義[24]。Sinha等[25]研究學(xué)者利用NMR技術(shù)分析支氣管哮喘患者于正常組呼氣冷凝液中代謝物質(zhì)的變化，發(fā)現(xiàn)銨離子水平哮喘患者較正常對照組降低，得出支氣管哮喘可能存在的生物標(biāo)志物。

1.1.4 代謝組學(xué)肺泡灌洗液生物標(biāo)志物研究 隨著纖維支氣管鏡技術(shù)的逐漸發(fā)展，肺泡灌洗液中代謝物質(zhì)的變化能更直觀的反映支氣管哮喘發(fā)病機制。Ho等[26]利用代謝組學(xué)技術(shù)測定哮喘模型小鼠肺泡灌洗液中代謝物質(zhì)的變化，發(fā)現(xiàn)了哮喘模型組中蘋果酸、乳酸、膽堿及肌酐含量升高，而甘油二酯、磷脂酰膽堿、甘油三酯含量降低，從而明確這些代謝產(chǎn)物與氣道炎癥發(fā)生相關(guān)，可以區(qū)分哮喘組與正常組。陳馨馨等[27]利用該組學(xué)技術(shù)研究哮喘家兔模型組肺泡灌洗液代謝物質(zhì)如天冬氨酸、甘氨酸、十四酸、半乳糖含量較正常組高。并探討了仙味保金方在治療后這些代謝產(chǎn)物的變化趨勢，為中藥治療過敏性哮喘提供依據(jù)。

由以上研究可知，應(yīng)用代謝組學(xué)技術(shù)能篩選出支氣管哮喘發(fā)病機制中可能存在的生物標(biāo)志物，并分析出可能的存在的代謝通路，包括氨基酸代謝、脂質(zhì)代謝以及能量代謝。而精氨酸-NO、花生四烯酸-白三烯與哮喘的發(fā)病具有顯著相關(guān)性,因此可以推測精氨酸-NO、花生四烯酸-白三烯兩大代謝通路可能與哮喘的發(fā)病有著密切的關(guān)系。這些研究都更好的提示與支氣管哮喘發(fā)病機制相關(guān)的生物標(biāo)志物，更為清晰的探索哮喘發(fā)生的病理生理機制，在理論上為哮喘的進一步診斷和治療提供依據(jù)。

1.2 代謝組學(xué)技術(shù)運用于支氣管哮喘證侯的研究

代謝組學(xué)改變了傳統(tǒng)的檢驗方法，不是以單一的標(biāo)志物來研究某種疾病，而是研究可能存在的代謝物，這便和中醫(yī)學(xué)的“整體觀”相結(jié)合。而生物體是動態(tài)活動的，其內(nèi)在代謝物在外界刺激下也是動態(tài)變化的，這便使得代謝組學(xué)與中醫(yī)“動態(tài)觀”不謀而合。代謝組學(xué)技術(shù)和方法，從代謝網(wǎng)絡(luò)變化的角度探究證候客觀化、標(biāo)準(zhǔn)化提供了支持。已有大量研究證實，不同中醫(yī)證候其代謝產(chǎn)物譜存在著顯著差異[28]，使“證候”得到客觀、定性、定量的描述，從而促進中醫(yī)證候本質(zhì)的研究。

李威等[29]在利用NMR技術(shù)研究支氣管哮喘中醫(yī)的“同病異質(zhì)”時發(fā)現(xiàn)，腎虛瘀痰型哮喘患者血漿中甘氨酸、丙酮酸升高，亮氨酸、異亮氨酸、丙氨酸、纈氨酸、酪氨酸、乳酸、糖蛋白、丙酮、1-甲基組氨酸降低，這些代謝產(chǎn)物可能與哮喘發(fā)生相關(guān)，進一步為證候的劃分提供依據(jù)。吳澤明等[30]通過LC-MS技術(shù)開展維醫(yī)異常黑膽質(zhì)證哮喘患者的血清代謝組學(xué)研究，分離出 15個可能異常的生物標(biāo)志物，得出這些代謝物質(zhì)與異常黑膽汁型哮喘的發(fā)生相關(guān)，為維醫(yī)治療支氣管哮喘建立基礎(chǔ)。

運用代謝組學(xué)技術(shù)研究中醫(yī)證侯，不僅找出可能與支氣管哮喘發(fā)病機制相關(guān)的代謝物質(zhì)，也可運用中醫(yī)藥在治療支氣管哮喘的前后對其內(nèi)在的代謝物進行測定，以研究其生物標(biāo)志物的變化，探索不同證侯支氣管哮喘可能存在的代謝通路。張啟云等[31]運用LC-MS技術(shù)研究不同麻杏石甘湯在哮喘模型大鼠血漿中運用后引起的內(nèi)源性代謝物質(zhì)的變化及其整體狀態(tài)的影響,得出可能的代謝物質(zhì)為9,10-DHOME、花生四烯酸、前列環(huán)素(PGI2)中，這些代謝物質(zhì)的變化可能是麻杏石甘湯對邪熱壅肺證哮喘治療作用的生物標(biāo)志物，花生四烯酸通路與支氣管哮喘存在密切聯(lián)系。蓋江華等[32]利用代謝組學(xué)的NMR技術(shù)研究外寒內(nèi)飲組小鼠與正常對照組小鼠尿液中代謝物質(zhì)的變化規(guī)律，得出模型組小鼠中代謝物質(zhì)如?；撬?、胍基乙酸、肌酸酐、三甲胺、尿囊素導(dǎo)尿管物質(zhì)的含量較正常組小鼠均有升高，甘氨酸、琥珀酸、2-酮戊二酸(2-OG)、乳酸、甲基煙堿等代謝物含量則降低，而這些物質(zhì)都與能量消耗和代謝有關(guān)。宋紅等[33]利用磁共振技術(shù)探討益腎喘寧湯治療支氣管哮喘腎氣虛證的可能作用機制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)腎氣虛證組支氣管哮喘大鼠血清中參與三羧酸循環(huán)及脂質(zhì)代謝的代謝物質(zhì)如丙酮酸、乙酰乙酸含量較正常組差異有統(tǒng)計學(xué)意義，而益氣喘寧湯治療組大鼠血清中的脂類物質(zhì)明顯低于腎氣虛證組，從而得出益氣喘寧湯通過促進機體的脂類代謝途徑，改善機體能量缺乏狀態(tài)。謝穎等[34]利用GC-MS技術(shù)研究麻黃-杏仁配伍在支氣管哮喘模型尿液中的代謝產(chǎn)物變化，發(fā)現(xiàn)氨基酸代謝、脂肪酸代謝、糖代謝三大通路代謝物質(zhì)均有變化，整體上探討了麻杏配伍對哮喘內(nèi)源性代謝物的影響。陶嘉磊等[35]利用代謝組學(xué)的LC-MS技術(shù)分析支氣管哮喘患兒痰熱阻肺證與非痰熱阻肺組處于急性發(fā)作期時尿液的代謝物質(zhì)變化，發(fā)現(xiàn)支氣管哮喘急性發(fā)作期不同證候之間存在特別的生物標(biāo)志物以及其基礎(chǔ)的代謝通路。通過這些研究表明采用代謝組學(xué)方法研究哮喘中醫(yī)證候的量化、客觀化的可行性，為支氣管哮喘中醫(yī)證侯的識別、治療提供理論基礎(chǔ)。

2 展望

兒童支氣管哮喘是兒科最常見的慢性呼吸道疾病，長期反復(fù)發(fā)作對患兒的身心健康產(chǎn)生嚴(yán)重影響，隨著其發(fā)病率的逐年增加，已經(jīng)越來越多的引起社會關(guān)注?！吨嗅t(yī)兒科學(xué)》將兒童支氣管哮喘急性發(fā)作期分為四大證型，分別為風(fēng)寒束肺證、痰熱阻肺證、外寒內(nèi)熱證、肺實腎虛證[36]。對于兒童支氣管哮喘急性發(fā)作期不同證候生物標(biāo)志物研究較少，利用代謝組學(xué)技術(shù)研究支氣管哮喘，篩選出的各證候生物標(biāo)志物種類較多，特異性的生物標(biāo)志物不明確，因此如何利用代謝組學(xué)技術(shù)找出各證候特異性的標(biāo)志物以及支氣管哮喘急性發(fā)作期與緩解期其內(nèi)在生物標(biāo)志物顯得尤為重要，為研究中醫(yī)藥治療不同證候兒童支氣管哮喘提供理論依據(jù)。

[1] The Global Strategy for Asthma Management and Prevention.Global Initiative for Asthma(GINA),2015[EB/OL].[2016-01-03].http://www.ginasthma.org/documents/4.

[2] TO T,STANOJEVIC S,MOORES G,et al.Global asthma prevalence in adults:findings from the cross-sectional world health survey[J].BMC Public Health,2012,12(1):204.

[3] MASOLI M,FABIAN D,HOLT S,et a1.The global burden of asthma:executive summary of the GIAN Dissemination Committee Report[J].Allergy,2004,59(5):469-478.

[4] 萬力生，溫鵬強，陳爭光，等.天灸療法對支氣管哮喘患兒血清中IL-4,IL-6和TGF-α的影響[J].時珍國醫(yī)國藥,2016,27(4):888-890.

[5] 山內(nèi)廣平,趙廣東.氣道炎癥標(biāo)記物測定[J].日本醫(yī)學(xué)介紹,2002,23(3):122-123.

[6] NADI E,HAJILOOI M,PAJOUHAN S,et al.Soluble L-Selectin as an Independent Biomarker of Bronchial Asthma[J].J Clin Lab Anal,2015,29(3):191-197.

[7] VERCELLI D.Arginase:marker,effector,or candidate gene for asthma[J].J Clin Invest,2003,111(12):1815-1817.

[8] PETERS-GOLDEN M,HENDERSON WR Jr.Leukotrienes[J].N Engl J Med,2007,357(18):1841-1854.

[9] 李永霞,陳敏,鐘紅,等.支氣管哮喘患者血清中8-異前列腺素水平研究[J].中國呼吸與危重監(jiān)護雜志,2010,9(6):598-601.

[10] WHEELOCK CE,GOSS VM,BALGOMA D,et al.Application of 'omics technologies to biomarker discovery in inflammatory lung diseases[J].European Respiratory Journal,2013(3):802-825.

[11] NICHOLSON JK,LINDON JC,HOLMES E.'Metabonomics':understanding the metabolic responses of living systems to pathophysiological stimuli via multivariate statistical analysis of biological NMR spectroscopic data[J].Xenobiotica,1999,29(11):1181-1189.

[12] SMOLINSKA A,BLANCHET L,BUYDENS LM,et al.NMR and pattern recognition methods in metabolomics:from data acquisition to biomarker discovery:a review[J].Anal Chim Acta,2012,750:82-97.

[13] PACCHIAROTTA T,NEVEDOMSKAYA E,CARRASCO-PANCORBO A,et al.Evaluation of GC-APCI/MS and GC-FID as a complementary platform[J].J Biomol Tech,2010,21(4):205-213.

[14] DETTMER K,ARONOV PA,HAMMOCK BD.Mass spectrometry-based metabolomics[J].Mass Spectrom Rev,2007,26(1):51-78.

[15] TRYGG J,HOLMES E,LUNDSTEDT T.Chemometrics in metabonomics[J].J Proteome Res,2007,6(2):469-479.

[16] JUNG J,KIM SH,LEE HS,et al.Serum metabolomics reveals pathways and biomarkers associated with asthma pathogenesis[J].Clin Exp Allergy,2013,43(4):425-433.

[17] RIED JS,BAURECHT H,STüCKLER F,et al.Integrative genetic and metabolite profiling analysis suggests altered phosphatidylcholine metabolism in asthma[J].Allergy,2013,68(5):629-636.

[18] CEYLAN E,AKSOY N,GENCER M,et al.Evaluation of oxidative-antioxidative status and the L-arginine-nitric oxide pathway in asthmatic patients[J].Respir Med,2005,99(7):871-876.

[19] 陳馨馨,李友林.仙味保金方治療過敏性支氣管哮喘模型家兔的血清代謝組學(xué)研究[J].中華中醫(yī)藥雜志,2014,29(2):579-581.

[20] SAUDE EJ,SKAPPAK CD,REGUSH S,et al.Metabolomic profiling of asthma:diagnostic utility of urine nuclear magnetic resonance spectroscopy[J].J Allergy Clin Immunol,2011,127(3):757-764.

[21] MATTARUCCHI E,BARALDI E,GUILLOU C.Metabolomics applied to urine samples in childhood asthma;differentiation between asthma phenotypes and identification of relevant metabolites[J].Biomed Chromatogr,2012,26(1):89-94.

[22] 洪玲玲,周賢梅.支氣管哮喘患者呼出氣冷凝液標(biāo)志物研究進展[J].臨床肺科雜志,2011,16(3):420-422.

[23] CARRARO S,GIORDANO G,RENIERO F,et al.Asthma severity in childhood and metabolomic profiling of breath condensate[J].Allergy,2013,68(1):110-117.

[24] CARRARO S,REZZI S,RENIERO F,et al.Metabolomics Applied to Exhaled Breath Condensate in Childhood Asthma[J].American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine,2007,175(10):986-990.

[25] SINHA A,KRISHNAN V,SETHI T,et al.Metabolomic signatures in nuclear magnetic resonance spectra of exhaled breath condensate identify asthma[J].Eur Respir J,2012,39(2):500-502.

[26] HO WE,XU YJ,XU F,et al.Metabolomics reveals altered metabolic pathways in experimental asthma[J].Am J Respir Cell Mol Biol,2013,48(2):204-211.

[27] 陳馨馨,李友林.仙味保金方治療過敏性支氣管哮喘模型家兔的支氣管肺泡灌洗液代謝組學(xué)研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2013,31(10):2098-2100.

[28] 李亞,李素云,李建生,等.支氣管哮喘急性發(fā)作期中醫(yī)證素分布規(guī)律的文獻研究[J].中醫(yī)研究,2010,23(1):74-77.

[29] 李威,巴吐爾·買買提明,吳燕,等.基于代謝組學(xué)分析支氣管哮喘中醫(yī)“同病異證”性研究[J].新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2014,37(6):696-700.

[30] 吳澤明,趙春霞,許國旺,等.基于液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)的維吾爾醫(yī)異常黑膽質(zhì)證哮喘病的血清代謝組學(xué)研究[J].世界科學(xué)技術(shù)(中醫(yī)藥現(xiàn)代化),2009(1):134-141.

[31] 張啟云,李冰濤,李文宏,等.麻杏石甘湯對哮喘豚鼠的血漿代謝組學(xué)研究[J].中藥藥理與臨床,2013,29(1):12-15.

[32] 蓋江華,何麗清,郭鑫.基于核磁共振技術(shù)的小青龍湯證的證本質(zhì)研究[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志,2013,8(3):230-233.

[33] 宋紅,鄭小偉,王穎,等.基于核磁共振技術(shù)的益腎喘寧湯對支氣管哮喘腎氣虛證模型大鼠血清代謝組學(xué)的影響[J].中醫(yī)雜志,2016,57(11):962-965.

[34] 謝穎,湯慶發(fā),宋帥,等.藥對麻黃-杏仁配伍對哮喘大鼠干預(yù)的尿液代謝組學(xué)研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2015,26(4):815-817.

[35] 陶嘉磊,汪受傳,田曼,等.基于LC-MS的小兒哮喘發(fā)作期痰熱阻肺與非痰熱阻肺證代謝標(biāo)記物研究[J].世界中醫(yī)藥,2016,11(9):1674-1678.

[36] 汪受傳,中醫(yī)兒科學(xué)[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社,2012:91-97.