兒童急性呼吸道感染病毒譜分析

范 雪，樂(lè) 原，李 靜

1錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院，遼寧錦州 121000；2撫順礦務(wù)局總醫(yī)院，遼寧撫順 113000

兒童是呼吸道病毒易感人群，約有80%的急性呼吸道感染是由呼吸道病毒引發(fā)[1]。由于性別、年齡、季節(jié)等因素的影響，呼吸道病毒種類(lèi)存在差異[2-3]，不同病毒的易感人群也不同。呼吸道病毒感染后可以引起呼吸道組織器官病變，國(guó)內(nèi)外常見(jiàn)的7種呼吸道病毒包括呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus，RSV)、腺病毒 (adenovirus，ADV)、流感病毒A型(influenza virus type A，F(xiàn)lu-A)、Flu-B、(paroinfluenza virus type 1，PIV-Ⅰ )、PIV-Ⅱ、PIV-Ⅲ。為了解撫順礦務(wù)局總醫(yī)院兒童急性呼吸道感染病毒譜，開(kāi)展呼吸道病毒性病原實(shí)驗(yàn)室檢查，對(duì)7種常見(jiàn)呼吸道病毒進(jìn)行檢測(cè)分析，進(jìn)一步探討呼吸道病毒感染的相關(guān)因素，為臨床診療病毒性感染提供參考。

對(duì)象和方法

1 對(duì)象 選擇2017年2月- 2018年3月?lián)犴樀V務(wù)局總醫(yī)院兒科門(mén)診及病房收治的急性呼吸道感染患兒860例，年齡0 ～ 14歲，男性345例，女性515例。入組要求：1)年齡＜14歲，病程＜7 d；2)符合急性呼吸道感染診斷，具體參考《褚福堂實(shí)用兒科學(xué)》(第8版)診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；3)每個(gè)患兒不重復(fù)入組。

2 標(biāo)本采集 由專(zhuān)業(yè)臨床醫(yī)生或護(hù)士采集患兒入院當(dāng)天或次日的鼻咽拭子，從患兒的鼻咽部取鼻咽分泌物，具體方法是將鼻咽拭子深入鼻腔3 ～ 4 cm處，并轉(zhuǎn)動(dòng)1周，將樣本置于含0.9%氯化鈉注射液2 ml的無(wú)菌收集管中，立即送到實(shí)驗(yàn)室待檢。

3 病毒抗原檢測(cè) 采用直接免疫熒光法，分別檢測(cè)RSV、ADV、Flu-A、Flu-B、PIV-Ⅰ～Ⅲ7種病毒抗原。呼吸道病毒診斷試劑盒購(gòu)自美國(guó)DHI公司，檢測(cè)步驟及方法嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作，用歐蒙熒光顯微鏡觀察。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件，對(duì)不同季節(jié)、年齡、性別、不同臨床診斷等病毒檢出率進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 呼吸道7種病毒感染的總體檢出情況 860例患兒中，鼻咽分泌物陽(yáng)性病例為273例，總檢出率為31.74%。排在首位是RSV陽(yáng)性174例，檢出率為20.23%；其次為ADV陽(yáng)性45例，檢出率為5.23%；排在第3位的PIV-Ⅲ陽(yáng)性33例，檢出率為3.84%；其余4項(xiàng)Flu-A、Flu-B、PIV-Ⅰ、PIV-Ⅱ的檢出率分別為2.91%、1.28%、2.21%、1.98%。見(jiàn)表1。

2 不同性別呼吸道病毒感染率比較 本組男性患兒345例，病毒檢出率31.30%(108/345)，女性患兒515例，病毒檢出率為32.04%(165/515)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.051，P=0.881)。見(jiàn)表2。

3 不同年齡呼吸道病毒感染率比較 患兒按照年齡分為5組，分別為0 ～ 6個(gè)月組、7個(gè)月～ 1歲組、2 ～ 3歲組、4 ～ 6歲組、7 ～ 14歲組。呼吸道病毒的總檢出率是隨著年齡的增加而逐漸降低的，其中，病毒檢出率最高的是0 ～ 6個(gè)月組，為28.94%；其次為2 ～ 3歲組，為27.11%；7 ～ 14歲組最低，為1.47%。RSV在各年齡組的檢出率均為最高；ADV在1 ～ 3歲組的檢出率較其在其他年齡組高。呼吸道病毒檢出率在不同年齡組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=67.642，P＜0.001)，其中6歲以下年齡組較6歲以上的年齡組高。見(jiàn)表3。

4 呼吸道病毒檢出率與季節(jié)的關(guān)系 按照季節(jié)分為 3 ～ 5月 (春季)、6 ～ 8月(夏季 )、9 ～ 11月(秋季)、12 ～次年2月(冬季)。可以看出，撫順地區(qū)冬季的呼吸道病毒檢出率最高，為50.92%，夏季的檢出率最低為7.69%。RSV在冬季的檢出率(13.49%)最高，夏季的檢出率(0.81%)最低，與PIV-Ⅰ型檢出率的特點(diǎn)相同。ADV在春季的檢出率(2.33%)最高，夏季的檢出率(0.7%)最低，與PIV-Ⅱ型檢出率的特點(diǎn)相同。呼吸道病毒檢出率在不同季節(jié)上有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=115.927，P＜0.001)。其中冬春季節(jié)較多，夏秋季節(jié)較少。見(jiàn)圖1。

表1 860例患兒鼻咽拭子病毒檢出率Tab. 1 Detection rate of nasopharyngeal swab virus in 860 children

表2 不同性別病毒感染陽(yáng)性檢出結(jié)果Tab. 2 Detection of positive virus infection by gender (n)

圖1 不同月份呼吸道病毒檢出情況Fig. 1 Respiratory virus detection in different seasons

5 不同呼吸道感染性疾病病毒檢出率比較 根據(jù)急性呼吸道感染病因的不同，我們將其分為上呼吸道感染、毛細(xì)支氣管炎、急性支氣管炎、支氣管哮喘、肺炎。在273例陽(yáng)性結(jié)果中，上呼吸道感染60例，毛細(xì)支氣管炎48例，急性支氣管炎21例，哮喘2例，肺炎142例(其中支氣管哮喘合并肺炎7例)。排在病毒檢出陽(yáng)性率前3位的依次為毛細(xì)支氣管炎(45.71%)、肺炎(32.87%)、上呼吸道感染(27.40%)，病毒檢出陽(yáng)性率最低的是支氣管哮喘(8.33%)。見(jiàn)表4。

表3 不同年齡呼吸道病毒檢出情況Tab. 3 Detection of respiratory viruses at different ages

6 呼吸道病毒混合感染情況 在860例中，單一感染225例(26.16%)，兩種病毒感染45例(5.23%)，三種病毒感染3例(1.1%)。其中，RSV與其他病毒混合感染最多，占45.83%。

表4 不同呼吸道疾病病毒檢出情況Tab. 4 Detection rate of virus in different respiratory diseases

討 論

急性呼吸道感染是兒童常見(jiàn)病、多發(fā)病，其特點(diǎn)是傳播速度快、傳染性強(qiáng)，常導(dǎo)致兒童住院時(shí)間較長(zhǎng)，甚至引發(fā)死亡，其中病毒感染是最主要的原因之一[5-7]。兒童對(duì)呼吸道病毒普遍易感，且病毒易發(fā)生變異，可以引發(fā)局部及暴發(fā)性流行，因此國(guó)家衛(wèi)生機(jī)構(gòu)將其設(shè)定為重點(diǎn)監(jiān)測(cè)對(duì)象[8]。國(guó)內(nèi)外對(duì)呼吸道感染病原的研究因地域、季節(jié)及年齡的不同存在差異[9]。隨著兒童呼吸道感染抗菌藥物的廣泛使用，呼吸道細(xì)菌感染呈下降趨勢(shì)，而呼吸道病毒感染率則逐漸升高。

通過(guò)對(duì)此次入組的860例急性呼吸道感染患兒的鼻咽分泌物拭子檢測(cè)，呼吸道病毒陽(yáng)性總檢出率為31.74%，與以往無(wú)錫(31.2%)的報(bào)到基本一致[10]，高于杭州(26.3%)[11]、深圳(23.6%)[12]，低于西安(34.8%)[13]、北京(67.4%)[14]。撫順地區(qū)病毒檢出率偏高考慮與本地屬重工業(yè)區(qū)有關(guān)，城市大氣污染較嚴(yán)重，對(duì)兒童呼吸系統(tǒng)有一定的影響，造成反復(fù)呼吸道感染，增加了家庭以及社會(huì)的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。不同地區(qū)的檢出率有差異，可能與各地區(qū)天氣及研究選擇的季節(jié)不同有關(guān)。

本研究發(fā)現(xiàn)，呼吸道病毒的總檢出率隨著年齡的增加而逐漸降低，不同年齡的病毒檢出率不同，0 ～ 6個(gè)月組的病毒檢出率最高(28.94%)，提示該階段患兒為呼吸道病毒的易感人群，與自身抵抗力較低有關(guān)。1 ～ 3歲的病毒檢出率排在第2位(27.11%)，可能與該階段患兒由于范圍擴(kuò)大，出現(xiàn)交叉感染的概率增加。另外，患兒的免疫力隨著年齡的增長(zhǎng)不斷增強(qiáng)，可能導(dǎo)致年齡越大的患兒，病毒陽(yáng)性檢出率越低。本研究發(fā)現(xiàn)RSV在呼吸道病毒感染者中檢出率最高，這一結(jié)果與國(guó)內(nèi)外大部分地區(qū)相同[15-16]，尤其是0 ～ 6個(gè)月的患兒，其檢出率為47.62%，與安徽地區(qū)感染特點(diǎn)一致[17]。RSV是RNA病毒，具有很強(qiáng)的傳染性，體內(nèi)的抗體不能預(yù)防感染的發(fā)生，加上其呼吸道特異性及非特異性免疫均較差，故感染主要發(fā)生于嬰幼兒。冬季是此病毒感染的高發(fā)季節(jié)，病毒檢出率最高，為50.92%；夏季的檢出率最低，為7.69%；與上海市的變化趨勢(shì)一致[18]。RSV是撫順地區(qū)各個(gè)季節(jié)最主要的呼吸道病毒，在冬季(13.49%)的檢出率最高，PIV-Ⅰ也是在冬季的檢出率最高，ADV、Flu-A和PIV-Ⅱ在春季的檢出率最高，F(xiàn)lu-B和PIV-Ⅲ在秋季(0.58%)的檢出率最高。流感病毒呈全年散發(fā)，以春冬季節(jié)為主，F(xiàn)lu-A主要集中在春季，F(xiàn)lu-B主要集中在秋季，副流感病毒在各個(gè)季節(jié)均可檢出，在冬季檢出率相對(duì)較高，應(yīng)注意強(qiáng)化有關(guān)疫苗的接種問(wèn)題。

將急性呼吸道感染分為上呼吸道感染、毛細(xì)支氣管炎、急性支氣管炎、支氣管哮喘、肺炎。在273例陽(yáng)性結(jié)果中，根據(jù)病毒檢出率的不同，排在病毒檢出陽(yáng)性率前3位的依次為毛細(xì)支氣管炎(45.71%)、肺炎(32.87%)、上呼吸道感染(27.40%)。其中，毛細(xì)支氣管炎的病毒檢出率最高，且主要以RSV(72.38%)所占比例最大，提示RSV是導(dǎo)致毛細(xì)支氣管炎的主要病原體，與Miller等[19]對(duì)455例門(mén)診及住院毛細(xì)支氣管炎患兒進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果相近。上呼吸道感染最主要的病原是Flu-A，與浙江[20]報(bào)道相近?；旌细腥局饕l(fā)生在嬰兒階段，可能與嬰兒的免疫功能不健全、干擾機(jī)制未建立有關(guān)，其中以RSV合并感染最多，占45.83%，與北京地區(qū)[15]的報(bào)道基本一致。

本研究了解了撫順地區(qū)兒童呼吸道疾病的病毒病原譜構(gòu)成及呼吸道病毒流行規(guī)律，進(jìn)一步探討呼吸道病毒感染的相關(guān)因素，為臨床上診療呼吸道病毒感染提供科學(xué)支持，彌補(bǔ)醫(yī)生經(jīng)驗(yàn)性診斷和治療的缺陷，減少濫用抗生素的概率。本研究的不足之處在于未能將鼻病毒、冠狀病毒、偏肺病毒等加入到病毒檢測(cè)譜中，結(jié)果存在一定的局限性；不能全面反映本地兒童急性呼吸道感染的病毒譜，僅對(duì)7種常見(jiàn)呼吸道病毒進(jìn)行分析。我們將繼續(xù)深入對(duì)本地區(qū)的呼吸道病毒流行特點(diǎn)進(jìn)行研究。