老年急性心肌梗死患者血漿miRNA-423-5p水平與心室重構及預后的相關性

葉 明 方 燕

(寧波市醫(yī)療中心李惠利醫(yī)院，浙江 寧波 315040)

急性心肌梗死(AMI)為心血管疾病中死亡率不斷增加的主要原因〔1〕。多項研究顯示，AMI后各種嚴重并發(fā)癥的病理生理學基礎均在于心室的重構，心室重構是導致患者心力衰竭及不良預后的主要原因，而心室重構與多種因素有關〔2,3〕。微小RNA(miRNA)是近年來發(fā)現(xiàn)的一組內(nèi)源性高度保守的非編碼單鏈RNA，其在細胞核內(nèi)生成，由20～22個核糖核苷酸所組成，可調(diào)控上游基因的表達及下游蛋白的翻譯過程〔4〕。目前miRNA已經(jīng)成為醫(yī)學研究的熱點之一，近年學者研究顯示，miRNA可能與AMI的發(fā)生發(fā)展密切相關〔5〕。本研究探討老年AMI患者血漿miRNA-423-5p水平與心室重構及預后的相關性。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選擇2015年3月至2016年1月寧波市醫(yī)療中心李惠利醫(yī)院收治的急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者143例作為AMI組，男86例，女57例，年齡60～86〔平均(68.31±3.72)〕歲。此外，選擇同期在院收治的穩(wěn)定型心絞痛(SAP)患者60例作為對照組，男39例，女21例，年齡60～83〔平均(67.92±5.24)〕歲。經(jīng)比較，兩組受試者性別、年齡比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。本研究經(jīng)我院倫理委員會批準。

1.2納入與排除標準 納入標準：①AMI患者均符合《急性心肌梗死診斷和治療指南》中相關診斷標準〔6〕；②AMI患者均在發(fā)病12 h內(nèi)成功接受經(jīng)皮冠狀動脈介入術(PCI)；③患者自愿簽署知情同意書。排除標準：①合并嚴重肝、腎功能障礙、血液疾病、感染、外傷、腦卒中、外傷或其他嚴重疾病者；②近期應用激素患者。

1.3治療及隨訪 AMI患者入院后均按照AMI診療指南給予抗凝、強化降脂、抑制血小板聚集及改善心肌缺血等治療，并給予患者PCI治療。PCI術后給予患者規(guī)范化阿司匹林、氯吡格雷治療，并繼續(xù)使用他汀類降脂藥物、β受體阻滯劑及血管緊張轉(zhuǎn)換酶抑制劑等。患者出院后通過門診、電話等形式隨訪12個月，記錄AMI患者新發(fā)主要心臟不良事件(MACE)發(fā)生情況，包括死亡、缺血性心絞痛發(fā)作、惡性心律失常、再梗死、急性心力衰竭等。

1.4檢測方法

1.4.1血漿miRNA-423-5p檢測及分組 外周血漿miRNA-423-5p表達檢測采用實時熒光定量PCR法(qRT-RCP)進行檢測，提取外周血漿中總RNA，進行反轉(zhuǎn)錄，然后使用qRT-RCP法測定miRNA-423-5p表達水平。每個樣本作3個復孔，并設置陰性對照，陰性對照孔采用RNase-H2O代替。選擇U6A+U6B snRNA作為內(nèi)參。采用受試者工作特征(ROC)曲線分析血漿miRNA-423-5p對AMI診斷價值，并計算最佳閾值，低于最佳閾值者作為低表達組，高于最佳閾值者作為高表達組。

1.4.2心室重構指標檢測 分別于PCI術后7 d及6個月后采用美國Philips iE33型彩色多普勒超聲心動圖儀檢測患者心室重構相關指標，檢測探頭頻率為1.7～3.4 MHz。檢測指標包括左室舒張末期內(nèi)徑(LVEDd)、左室舒張末期容積(LVEDV)、左室收縮末期容積(LVESV)及左室射血分數(shù)(LVEF)。

1.5統(tǒng)計學方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計學軟件進行t及χ2檢驗，采用ROC曲線分析血漿miRNA-423-5p對AMI診斷價值；相關性采用Spearman相關性分析；采用Kaplan-Meier生存曲線分析不同miRNA-423-5p表達患者無新發(fā)MACE生存情況，終點事件為新發(fā)MACE，組間生存曲線比較采用Log-rank檢驗。

2 結(jié) 果

2.1ROC曲線分析血漿miRNA-423-5p對AMI診斷價值 AMI組血漿miRNA-423-5p相對表達量顯著高于對照組(0.57±0.21 vs 0.31±0.19；t=8.272，P<0.05)。ROC曲線分析血漿miRNA-423-5p對AMI診斷價值，ROC曲線下面積為0.836，見圖1。根據(jù)ROC曲線，血漿miRNA-423-5p最佳閾值為0.39，將miRNA-423-5p相對表達量≤0.39的AMI患者86例作為低表達組，將miRNA-423-5p相對表達量>0.39的AMI患者57例作為高表達組。

2.2miRNA-423-5p不同表達AMI患者PCI術后心室重構指標比較 PCI術后7 d不同表達AMI組患者心室重構指標均無顯著差異(P>0.05)，術后6個月低表達組AMI患者心室重構指標與PCI術后7 d比較無明顯變化(P>0.05)，而高表達組LVEDd、LVEDV、LVESV水平較PCI術后7 d顯著升高(P<0.05)，LVEF顯著降低(P<0.05)，且與高表達組比較，低表達組LEVEDd、LVEDV、LVESV水平明顯降低、LVEF明顯升高(均P<0.05)。見表1。

圖1 ROC曲線分析血漿miRNA-423-5p對AMI診斷價值

組別nLVEDd(mm)術后7 d術后6個月LVEDV(ml)術后7 d術后6個月LVESV(ml)術后7 d術后6個月LVEF(%)術后7 d術后6個月低表達組8650.83±1.2851.02±1.641)121.65±10.94123.18±8.381)55.48±7.8556.17±9.361)48.75±2.2048.12±2.841)t/P值0.847/>0.051.030/>0.050.524/>0.051.626/>0.05高表達組5751.26±1.9254.01±1.67120.74±7.32134.87±9.6454.63±5.9459.84±6.4848.02±1.9346.24±2.03t/P值10.022/<0.0510.826/<0.055.496/<0.055.893/<0.05

與高表達組同時點比較：1)P<0.05

2.3AMI患者miRNA-423-5p水平與心室重構指標的相關性 AMI患者血漿miRNA-423-5p水平與LVEDd、LVEDV及LVESV呈顯著正相關(r=0.417,0.328,0.376,均P<0.05)，與LVEF呈顯著負相關(r=-0.359,P<0.05)。

2.4血漿miRNA-423-5p不同表達組AMI患者隨訪無新發(fā)MACE事件生存率比較 低表達組無新發(fā)MACE事件生存情況顯著優(yōu)于高表達組(χ2=7.260，P=0.007)，見圖2。

圖2 低表達組與高表達組患者無新發(fā)MACE事件生存情況比較

3 討 論

AMI是臨床上常見的一種嚴重威脅人類健康與生命安全的急癥，患者心肌梗死后左室重構對心室功能狀態(tài)及生存預后有著重要影響，成為目前心血管領域研究中的重要內(nèi)容〔7〕。目前臨床AMI診斷的主要血清生物標志物包括肌鈣蛋白、肌紅蛋白及肌酸激酶同工酶等，雖然上述血清生物標志物已經(jīng)在AMI的早期診斷敏感性及特異性上達到一定水平，但研究者對致力于高敏感性及高特異性的新型血清標志物，尤其針對能夠有效反映AMI患者預后的良好血清標志物〔8,9〕。數(shù)十年來發(fā)現(xiàn)的非編碼RNA-MicroRNA(miRNA)與多種疾病的發(fā)生、發(fā)展、預后均有密切的聯(lián)系，miRNA表達不僅有著良好的組織特異性且其在血液中有著較高的穩(wěn)定性，因此學者提出可將miRNA作為理想的生物學指標用于AMI的早期診斷、心室重構及臨床預后分析〔10,11〕。

目前國內(nèi)外研究報道顯示，miRNA-423-5p在急性心力衰竭及AMI患者中均有顯著表達，與心肌的損傷之間具有密切的聯(lián)系，因此認為miRNA-423-5p可能成為AMI診斷及預后判斷的重要生物學指標〔12,13〕。本研究結(jié)果顯示，AMI患者血漿miRNA-423-5p相對表達量顯著高于對照組，診斷價值ROC曲線下面積為0.836。與學者報道結(jié)果相似〔14,15〕，提示血漿miRNA-423-5p水平與AMI密切相關，對AMI臨床診斷具有一定的應用價值，是臨床潛在標志物之一。

本研究分析不同AMI患者血漿miRNA-423-5p表達與治療后心室重構之間的關系，結(jié)果顯示，血漿miRNA-423-5p水平與AMI患者心室重構之間具有密切的聯(lián)系，高表達miRNA-423-5p患者心室重構發(fā)生情況較為嚴重，提示miRNA-423-5p可作為AMI患者PCI術后心室重構預測的一個重要生物學指標〔16,17〕。此外，本文分析臨床預后情況結(jié)果表明miRNA-423-5p表達與不良心血管事件發(fā)生有一定聯(lián)系。學者推測循環(huán)miRNA-423-5p可能來源于缺血壞死心肌細胞的釋放，因此患者外周血miRNA-423-5p表達越高，提示心肌缺血壞死越嚴重且心室重構進展越迅速，從而影響患者臨床預后〔18～20〕。