藏藥芫根提取物對(duì)小鼠抗缺氧能力的研究

馮秋紅 青海帝瑪爾藏藥科技開發(fā)有限公司

芫根(Brassica rapa L.)，即蕪菁、蔓菁，是一種于十字花科蕓薹屬草本植物蕪菁的干燥塊根，芫根中含有多種氨基酸、脂肪酸和多糖等，具有抗缺氧、抗輻射、提高免疫力等活性。本實(shí)驗(yàn)于常壓缺氧條件下，采用芫根水提取物對(duì)小鼠抗缺氧能力進(jìn)行分析，探討芫根的抗缺氧性。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：雄性清潔級(jí)昆明小鼠60只，體質(zhì)量18-20g，購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（滬）2003-0003。

實(shí)驗(yàn)溶液配制：芫根水提取液制備：稱取適量新鮮芫根，清洗干凈后采用熱回流水提法提取3次芫根原汁，過濾定容后，置入冷凍干燥機(jī)內(nèi)冷凍干燥，獲取芫根干粉。適量芫根粉與不同劑量超純水配制為10g/kg、15g/kg、20g/kg三種低劑量、中劑量、高劑量芫根水溶液，置入4℃冰箱中保存待用。同樣配置程序配置40g/kg濃度的紅景天溶液，4℃冰箱中保存待用。鹽酸普萘洛爾溶液：10倍人體推薦劑量配置為0.03g/kg濃度的水溶液。

1.2 方法

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處理：60只小鼠分為6組，分別為正常對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、紅景天對(duì)照組、芫根提取物低劑量組、芫根提取物中劑量組、芫根提取物高劑量組，每組各10只，各組小鼠日齡、體質(zhì)量等一般資料均無(wú)明顯差異(P＞0.05)。正常組向小鼠胃內(nèi)灌0.15mL/10g劑量的超純水；陽(yáng)性對(duì)照組向小鼠胃內(nèi)灌0.03g/kg劑量的鹽酸普萘洛爾水溶液；紅景天對(duì)照組向小鼠胃內(nèi)灌40g/kg劑量的紅景天水溶液；芫根低、中、高劑量組則分別向沁鼠胃內(nèi)灌10g/kg、15g/kg、20g/kg的芫根水提取物水溶液。各組小鼠分別灌藥1d、3d、1周、2周、1個(gè)月。

常壓抗缺氧實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)參照2003年版《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》中的功能學(xué)評(píng)價(jià)檢驗(yàn)方法進(jìn)行檢驗(yàn)，最后1次灌藥60min后，各組小鼠均用500mL凡士林溶液廣口瓶中，瓶?jī)?nèi)均預(yù)置10g鈉石灰，便于吸收溶液中的二氧化碳與水，1只小鼠1只瓶，加蓋并計(jì)時(shí)，小鼠最后一次呼吸時(shí)間作為統(tǒng)計(jì)指標(biāo)，觀察并記錄小鼠存活時(shí)間。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS20.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)結(jié)果采用（ ）表示，t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

灌藥1d時(shí)，與正常對(duì)照組相比，正常對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、紅景天對(duì)照組、芫根提取物低劑量組、芫根提取物低劑量組、芫根提取物低劑量 組 的 存 活 時(shí) 間 分 別 為 (120.37±1.43)(135.29±24.71)(119.04±4.22)(131.38±10.95)(135.74±12.53)(148.18±13.32)min，芫根低、中、高劑量組小鼠存活時(shí)間均顯著延長(zhǎng)(P＜0.05)；

灌藥 3d 后，各組存活時(shí)間分別為 (100.83±1.52)( 110.31±2.75)(109.64±8.03)(138.59±5.46)(117.21±24.55)(95.82±7.49)min，與 正 常對(duì)照組相比，芫根低、中劑量組小鼠存活時(shí)間顯著延長(zhǎng)(P＜0.05)，芫根高劑量組小鼠存活時(shí)間則顯著縮短(P＜0.05)；

灌藥 1周后，各組存活時(shí)間分別為 (81.93±20.58)(77.57±5.23)(139.44±27.92)(100.51±4.17)(94.32±3.61)(88.48±4.59)min，與正常對(duì)照組比較，芫根低、中、高劑量組小鼠存活時(shí)間均顯著延長(zhǎng)(P＜0.05)；

灌藥 2 周后，各組存活時(shí)間分別為 (80.21±16.43)(69.83±4.67)(106.29±15.72)(70.15±2.83)(88.19±3.51)(81.32±16.32)min，與正常對(duì)照組比較，芫根低劑量組小鼠存活時(shí)間顯著延長(zhǎng)(P＜0.05)，中劑量組則顯著縮短(P＜0.05)，高劑量組無(wú)明顯差異(P＞0.05)；

灌藥 1個(gè)月后，各組存活時(shí)間分別為 (70.54±4.62)(85.43±10.28)(100.39±26.74)(80.41±7.95)(83.18±3.76)(70.34±16.56)min，與正常對(duì)照組比較，芫根低、中劑量組小鼠存活時(shí)間顯著延長(zhǎng)(P＜0.05)，高劑量組無(wú)明顯差異(P＞0.05)。

3 討論

缺氧是多種疾病發(fā)生與發(fā)展的重要因素，當(dāng)機(jī)體缺氧時(shí)，會(huì)增加自由基含量，降低機(jī)體自由基清除量。篩選自由清除活性藥物，并分析其活性成分，能夠?yàn)榭谷毖跛幬锏拈_發(fā)提供重要依據(jù)。

芫根是一種藏區(qū)常見的多用途售票，具有悠久的栽培歷史與確切的抗缺氧活性。本研究通過不同劑量、不同時(shí)效的對(duì)比分析顯示，芫根水溶液劑量為15g/kg時(shí)，各灌藥時(shí)間的小鼠模型存活時(shí)間較正常對(duì)照組均有顯著延長(zhǎng)(P＜0.05)。王宇等的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，常壓抗缺氧模型小鼠在不同藥品模型下，HE常規(guī)染色后，腦組織會(huì)顯示出明顯不同的情況，尤其以海馬神經(jīng)元細(xì)胞表現(xiàn)出顯著的不同，而多糖劑量則是影響小鼠存活時(shí)間的重要因素，本研究采用基于大數(shù)據(jù)的人工智能分析藏藥提取物化合物構(gòu)效關(guān)系軟件，通過ANN-QSAR算法得出，多糖是芫根抗缺氧活性的重要成分，芫根中多糖成分的存在，使其能夠發(fā)揮較紅景天提取更為快速而持久的抗缺氧性能，是快速補(bǔ)充機(jī)體能量，增強(qiáng)機(jī)體耐受力的重要成分。

綜上分析，一定劑量的芫根提取物能夠顯著延長(zhǎng)小鼠在常壓缺氧條件下的存活時(shí)間，其抗缺氧活性有一定時(shí)效性、劑量依賴性。