陳如龍 王長水 馬強(qiáng) 何其元 馬益龍 布爾江·哈那啥提
摘要:在肉牛養(yǎng)殖過程中,肉牛可能會患口蹄疫病,其具有很強(qiáng)的傳染性。在對肉牛進(jìn)行口蹄疫免疫時,免疫效果會受到多種因素的影響。所以,在具體的免疫過程中,要根據(jù)牛群及養(yǎng)牛場的實(shí)際情況,合理制定免疫程序,以達(dá)到最好的免疫效果。本文對肉??谔阋卟煌庖叱绦虻拿庖咝ЧM(jìn)行了比較分析。
關(guān)鍵詞:肉??谔阋?免疫程序;免疫效果;比較
牛只的個體差異、免疫間隔時間等都會影響到肉??谔阋叩拿庖咝Ч2⑶?,免疫時采用的程序不同,達(dá)到的免疫效果也會不同。所以,需要通過試驗(yàn)的方式,對不同免疫程序下的免疫效果進(jìn)行對比,以擇優(yōu)選擇最佳的口蹄疫免疫程序。
1試驗(yàn)材料的選擇
1)試驗(yàn)動物:本次試驗(yàn)選擇90頭健康肉牛,年齡在2-6歲,來自于新疆博樂市某規(guī)?;馀pB(yǎng)殖場。
2)疫苗:試驗(yàn)所用的疫苗為O型一亞洲l型-A型三價滅活疫苗。
3)試驗(yàn)所用的抗體檢測儀器主要有以下幾種:酶標(biāo)分析儀;全自動酶標(biāo)洗板機(jī);低速大容量臺式離心機(jī);電熱恒溫培養(yǎng)箱;移液器;立式壓力蒸汽滅菌器;96孔ELISA板、U型96孔抗原抗體反應(yīng)板等。
4)本次試驗(yàn)所用的檢測試劑主要有以下幾種:口蹄疫O型、口蹄疫亞洲l型和口蹄疫A型抗體檢測液。
2試驗(yàn)方法及過程
2.1試驗(yàn)方案
試驗(yàn)的時間從2017年2-12月,將90頭肉牛隨機(jī)分成三組,分別標(biāo)記為A、B、C。A組肉牛在2017年3月20日和9月20日分別注射1次O型一亞洲l型-A型三價滅活疫苗,每頭牛的注射劑量為1mL。B組牛在相同的時間分別注射相同的疫苗,每次注射劑量為2mL。C組牛注射同樣的疫苗,每次2mL,總共注射三次,分別為2017年3月20日、7月20日和11月20日。在注射疫苗后,定期從肉牛身上采集血樣,檢測其中的免疫抗體,并根據(jù)疫苗在不同時間和注射次數(shù)中的抗體水平,繪制出對應(yīng)的免疫抗體消長曲線,從而分析出抗體水平的變化規(guī)律,確定出免疫效果最好的免疫次數(shù),并制定出最具針對性的免疫程序。
2.2采樣方法
在對每個實(shí)驗(yàn)組的肉牛采血時,都是在C組免疫前、后的30d進(jìn)行的,總共采血6次,每頭牛每次的采血量為10mL,在無菌條件下進(jìn)行尾跟采血,將血清分離出來后檢測免疫抗體效價。
2.3檢測方法
在對免疫抗體進(jìn)行檢測的時候,采用ELISA法,取一定量的病毒抗原與被檢測血清進(jìn)仔反應(yīng),反應(yīng)在液相中進(jìn)行。然后,將抗原抗體的復(fù)合體轉(zhuǎn)移到ELISA酶標(biāo)板中,板上包被有口蹄疫特異性抗體。如果病原抗體不能完全被血清抗體所阻斷,那么未被阻斷部分就會被板內(nèi)的抗體所捕獲。再加入豚鼠抗血清,被捕獲的病原抗體會與其中的抗體相結(jié)合,利用兔抗豚鼠lgG酶結(jié)合物,以及底物溶液,就可以顯現(xiàn)出不同的顏色。通過對試驗(yàn)孔顏色、抗原對照孔顏色進(jìn)行對比,就可以判斷結(jié)果。
3試驗(yàn)結(jié)果及分析
根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,在對C組牛群注射第1次??谔阋咭呙绾?,O型口蹄疫、亞洲I型口蹄疫和A型口蹄疫的免疫抗體保護(hù)率基本維持在66%,其他兩組在免疫空白期的抗體保護(hù)率分別為50%和56.67%、46.67%和56.67%、46.67%和53.33%。A組在注射疫苗1個月以后的抗體保護(hù)率超過83%,60d下降到66%,90d的時候下降到46%。A組牛在進(jìn)行第2次免疫后其抗體保護(hù)率更低,試驗(yàn)牛已經(jīng)不具備抵御口蹄疫病毒的能力。B組牛在第1次采血檢查中,抗體保護(hù)率超過96%,90d和150d分別下降為76%和53%,第2次免疫時,牛機(jī)體中的抗體已經(jīng)無法對自身進(jìn)行有效的保護(hù)。C組牛在第1次采血檢測時,其抗體保護(hù)率超過93%,60d時超過60%。在第2次和第3次免疫前的30d,牛機(jī)體內(nèi)的抗體保護(hù)率高于66%,試驗(yàn)牛體內(nèi)的抗體能對自身進(jìn)行有效的保護(hù)。由此可見,C組的免疫效果是最好的,能夠?qū)⑷馀sw內(nèi)的口蹄疫抗體效價長期維持在比較均衡的狀態(tài)。即每年要對牛注射3次疫苗,每頭牛注射2mU次,注射的疫苗為O型一亞洲I型-A型三價滅活疫苗,能夠使肉牛具備長期抵御口蹄疫的能力。
4結(jié)語
綜上所述,在肉牛的養(yǎng)殖過程中,采用不同的肉??谔阋呙庖叱绦?,通常能夠達(dá)到不同的免疫效果,因此,每年對肉牛注射3次口蹄疫疫苗,肌肉注射,注射劑量為2mL/次,能夠達(dá)到比較好的免疫效果,并且肉牛體內(nèi)的口蹄疫抗體能夠常年維持在比較均衡的狀態(tài)。所以,在對肉牛進(jìn)行口蹄疫免疫時,可以選擇此免疫方式,增強(qiáng)肉牛抵御口蹄疫的能力,從而降低肉牛感染口蹄疫的風(fēng)險(xiǎn)。