• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于線粒體基因分析黑頸鶴和灰鶴的遺傳差異

    2018-12-12 09:39:06王野影白志周張明明粟海軍
    生物學(xué)雜志 2018年6期
    關(guān)鍵詞:灰鶴黑頸鶴線粒體

    王野影, 白志周, 熊 勇, 張明明, 粟海軍

    (1. 貴州師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院 植物生理與發(fā)育調(diào)控重點實驗室, 貴陽 550025; 2. 貴州大學(xué)生物多樣性與自然保護(hù)研究中心, 貴陽 550001)

    黑頸鶴(Grusnigricollis)和灰鶴(Grusgrus)隸屬于鶴科(Gruidae),冠鶴亞科(Balearicinae),鶴屬(Grus)。黑頸鶴作為大型飛行涉禽,活動范圍極其廣泛。在中國,黑頸鶴主要在新疆東昆侖-阿爾金山地區(qū)[1]、四川若爾蓋濕地國家級自然保護(hù)區(qū)[2]、貴州草海國家級自然保護(hù)區(qū)[3]、西藏日喀則地區(qū)[4]、云南大山包黑頸鶴自然保護(hù)區(qū)[5]等地繁殖或越冬。灰鶴是大型涉禽,在我國大部分地區(qū)均可看到。黑頸鶴和灰鶴的食性、鳴叫行為、取食范圍[6]、生理指標(biāo)均相近[7],而且經(jīng)筆者觀察,草海黑頸鶴和灰鶴存在混群生活的現(xiàn)象,然而它們的遺傳差異目前不得而知。

    線粒體DNA是細(xì)胞核外的遺傳物質(zhì),是可以在基因組水平上研究的分子標(biāo)記,具有母系遺傳的特點,其分子量小、結(jié)構(gòu)簡單、無內(nèi)含子、種內(nèi)幾乎無重排、進(jìn)化速度快、無組內(nèi)特異性等特點,是研究動物遺傳分化的有力工具[8]。本研究測定了黑頸鶴和灰鶴部分個體的線粒體COI基因,結(jié)合GenBank數(shù)據(jù)庫中的黑頸鶴和灰鶴的線粒體COI基因及基因組序列,對黑頸鶴和灰鶴分別從多個體的COI基因及單個體的線粒體基因組進(jìn)行比較分析,探討其遺傳差異。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    于2016年1月從貴州草海國家級自然保護(hù)區(qū)獲得了8份黑頸鶴糞便和4份灰鶴糞便。糞便樣品均來自于黑頸鶴和灰鶴的覓食地。利用遠(yuǎn)距離觀察法,待黑頸鶴或灰鶴取食離開后,采用無菌手套進(jìn)行糞便收集,收集時為避免樣品重復(fù),收集的糞便間距均大于2 m,全部實驗樣品都浸泡在含無水乙醇的EP管中,冰袋冷藏,立即運回實驗室,并于-20°C冰箱冷凍保存。

    1.2 方法

    1.2.1 DNA提取

    實驗采用糞便基因組DNA 提取試劑盒(Stool Genomic DNA Kit,康為世紀(jì))進(jìn)行糞便的DNA提取,提取方法參閱試劑盒所帶說明書,由于此試劑盒提取的DNA濃度很低,為了提高濃度,在初始時糞便盡量稱取0.3 g,結(jié)束時,加30 μL水溶解DNA,于4℃冰箱保存待用。

    1.2.2 PCR擴(kuò)增及測序

    參考GenBank中鶴屬鳥類的COI序列,使用Primer primier 5.0軟件設(shè)計簡并引物,用于從提取的糞便DNA中擴(kuò)增黑頸鶴和灰鶴的COI基因。引物序列如表1,引物由上海生工生物工程技術(shù)有限公司合成。采用普通PCR進(jìn)行擴(kuò)增,反應(yīng)程序:95℃預(yù)變性3 min;95℃變性30 s,50℃復(fù)性30 s,72℃延伸1 min,重復(fù)30個循環(huán);72℃再延伸8 min。反應(yīng)體系為25 μL,包括:TaqPCR Master Mix (2×,blue dye)12.5 μL,上下游引物各1 μL(10 μmol/L),模板1 μL (10~100 ng/μL),加ddH2O補(bǔ)足。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物直接送此公司進(jìn)行單向測序,測序引物選擇5348F或6085R均可。

    表1 黑頸鶴和灰鶴COI基因引物設(shè)計序列

    1.2.3 序列分析

    首先使用BioEdit v7.0.5(http://www.mbio.ncsu.edu/bioedit/page2.html)對測序所得峰圖文件進(jìn)行檢驗,保證使用的序列均為單峰。結(jié)合從GenBank數(shù)據(jù)庫中下載的黑頸鶴和灰鶴的COI序列,整理成一個Fasta文件。后使用MEGA7.0[9]軟件對此文件進(jìn)行堿基組成(Base composition)及遺傳距離分析:采用p-距離法重復(fù)1000次,分析黑頸鶴和灰鶴的種間遺傳距離;采用Kimura 2-參數(shù)模型重復(fù)1000次,分別分析黑頸鶴和灰鶴的種內(nèi)遺傳距離;對黑頸鶴和灰鶴的線粒體基因組進(jìn)行核苷酸組成,蛋白編碼基因核苷酸組成的比較分析。使用DnaSPv6[10]軟件進(jìn)行黑頸鶴和灰鶴的COI的變異位點 (Variable sites)、簡約信息位點 (Parsimony informative sites)、單倍型及單倍型多樣性的分析,對線粒體基因組各段基因進(jìn)行變異位點分析及比例計算。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 序列組成分析

    本實驗共獲得黑頸鶴COI基因8條,灰鶴COI基因4條,從GenBank數(shù)據(jù)庫下載黑頸鶴COI基因3條、線粒體基因組序列1條(FJ769851.1),灰鶴COI基因5條、線粒體基因組序列1條(FJ769849.1),序列詳細(xì)信息參見表2。從表2中的采集地可以看出,黑頸鶴和灰鶴的COI基因序列可能來自不同種群(遷徙鳥類,無法確定)。手動將參差不齊的序列取齊,共獲得COI基因序列片段長度637 bp,其中,黑頸鶴序列中 A+T 含量為 51.20%,G+C 含量為 48.80%;而灰鶴序列中 A+T 含量為 51.80%,G+C 含量為 48.20%;說明二者的COI序列轉(zhuǎn)換與顛換的發(fā)生率近似,而這種存在AT偏好性的現(xiàn)象也同樣發(fā)生在其他脊椎動物中[14]。利用DnaSPv6軟件分析發(fā)現(xiàn),黑頸鶴的變異位點和簡約信息位點均為0,單倍型為1,單倍型多樣性為0,核苷酸多樣性為0,說明COI基因并不適用于黑頸鶴種群間的差異分析;灰鶴的變異位點為1,簡約信息位點為0,單倍型為2,單倍型多樣性為0.032 47,核苷酸多樣性為0.000 39,說明灰鶴種群間的COI基因有輕微變異,但此基因仍不適用于灰鶴種群內(nèi)的遺傳差異分析。然而,黑頸鶴和灰鶴COI序列間的變異位點為11個,簡約信息位點為10,所以COI適用于作為黑頸鶴和灰鶴種間分析的分子標(biāo)記。基于11只黑頸鶴和9只灰鶴的COI基因,共計20條序列,計算的種間遺傳距離為0.016;黑頸鶴和灰鶴的種內(nèi)遺傳距離均為0,說明黑頸鶴和灰鶴的種內(nèi)交流頻繁且變異小。

    表2黑頸鶴和灰鶴的COI基因和線粒體基因組的GenBank檢索號及序列來源

    2.2 比較線粒體基因組分析

    黑頸鶴的線粒體基因組序列長度為16 646 bp,灰鶴的為16 649 bp,包含13個蛋白編碼基因,22個tRNA基因,2個rRNA基因和一個控制區(qū)。通過對兩種鶴的線粒體基因組基因組成和各基因的變異位點及其所占比例(表3)發(fā)現(xiàn):兩種鶴的線粒體基因排列順序均與鳥類典型的線粒體基因排列順序一致[15];除16SrRNA基因片段長度有2 bp的差異外,其余基因均等長。各基因中變異位點所占比例高于線粒體基因組變異位點比例(0.020 31)的基因有控制區(qū)ND1(0.020 70)、ND2 (0.024 98)、tRNATyr(0.028 17)、ATP8(0.028 74)、ATP6(0.026 32)、ND3(0.025 57)、ND4(0.021 93)、tRNASer(0.030 30)、ND5(0.030 85)、Cytb(0.028 00)、CR(0.046 28)和ND6(0.024 90)。其中,CR、tRNASer、tRNATyr、Cytb的變異位點比例較高,但tRNASer和tRNATyr片段較短,所含信息量較少,不足以提供足夠的信息位點,因此,本研究認(rèn)為CR和Cytb可作為區(qū)分黑頸鶴和灰鶴的分子標(biāo)記。

    表3 黑頸鶴和灰鶴線粒體基因組比較

    3 討論

    3.1 遺傳差異分析

    遺傳多樣性是物種保持進(jìn)化潛能的基礎(chǔ)[16],研究物種的遺傳多樣性對瀕危物種的保護(hù)、保護(hù)等級及優(yōu)先保護(hù)單元的確定具有極為重要的意義。其中,遺傳變異作為保護(hù)遺傳學(xué)研究的重要內(nèi)容,從一定程度上可反映遺傳多樣性。本研究中,黑頸鶴COI基因的核苷酸多樣性和單倍型多樣性均為0,灰鶴COI基因的核苷酸多樣性和單倍型多樣性比黑頸鶴偏高,兩種鶴的遺傳多樣性都處于極低水平,各種群均未出現(xiàn)遺傳分化,說明需要對這兩種鶴加大保護(hù)力度,以降低滅絕風(fēng)險。

    3.2 分子標(biāo)記選擇

    合適的分子標(biāo)記在物種鑒定、種群遺傳學(xué)和系統(tǒng)進(jìn)化研究中至關(guān)重要[17]。在黑頸鶴和灰鶴的線粒體全基因組的37個基因中有12個基因的變異位點所占比例高于全線粒體基因組,說明除線粒體基因組外,還有其他基因可作為黑頸鶴和灰鶴系統(tǒng)發(fā)育位置的分子標(biāo)記。COI作為分子標(biāo)記常用于昆蟲的分子系統(tǒng)學(xué)中,鳥類分類學(xué)研究中應(yīng)用較少,被認(rèn)為適用于分析科內(nèi)屬間的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系[18],在本研究中COI基因的變異位點所占比例僅為0.009 66,僅高于12SrRNA(0.008 26)、COII(0.007 31)和幾個變異位點所占比例為0的tRNA基因,但仍可以區(qū)分黑頸鶴和灰鶴??刂茀^(qū)CR又稱D-loop區(qū),由于所受選擇壓力較小,進(jìn)化速率相對較快,被認(rèn)為是線粒體基因組中堿基替換和長度變異最大的區(qū)域[19],黑頸鶴和灰鶴的CR基因均符合這一規(guī)律。Cytb基因被廣泛應(yīng)用于鳥類系統(tǒng)學(xué)研究中,在黑頸鶴和灰鶴的蛋白編碼基因中,Cytb的變異位點所占比例僅次于CR。在今后的研究中可考慮將這兩個基因作為潛在的分子標(biāo)記用于有效區(qū)分黑頸鶴和灰鶴,而且研究已證實CR可用于區(qū)分灰鶴、丹頂鶴和白頭鶴的不同種群[20],Cytb是否可用于區(qū)分其它鶴屬鳥類、鶴類種群還需進(jìn)行深入分析。

    猜你喜歡
    灰鶴黑頸鶴線粒體
    黑頸鶴大戰(zhàn)惡狼
    棘皮動物線粒體基因組研究進(jìn)展
    海洋通報(2021年1期)2021-07-23 01:55:14
    線粒體自噬與帕金森病的研究進(jìn)展
    歸來吧!精靈(連載六)
    神奇的黑頸鶴
    主 意
    主意
    主意
    主意
    NF-κB介導(dǎo)線粒體依賴的神經(jīng)細(xì)胞凋亡途徑
    九九久久精品国产亚洲av麻豆| 久久中文看片网| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 国产伦理片在线播放av一区 | 亚洲乱码一区二区免费版| 22中文网久久字幕| 此物有八面人人有两片| 久久久久久九九精品二区国产| 国产三级在线视频| 久久人人精品亚洲av| 日韩中字成人| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 男女啪啪激烈高潮av片| 亚洲精品亚洲一区二区| 悠悠久久av| 人人妻人人澡欧美一区二区| 亚洲乱码一区二区免费版| 久久久久久伊人网av| 国产高清激情床上av| 色吧在线观看| 深爱激情五月婷婷| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 一进一出抽搐动态| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 午夜免费激情av| 毛片女人毛片| 亚洲国产色片| 99热这里只有是精品在线观看| 久久人人爽人人片av| 欧美成人免费av一区二区三区| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 日韩视频在线欧美| 久久久久久久久中文| 国产成人freesex在线| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲av二区三区四区| 亚洲第一区二区三区不卡| 男人舔奶头视频| 美女大奶头视频| 热99在线观看视频| 日本免费一区二区三区高清不卡| 看非洲黑人一级黄片| 亚洲av.av天堂| 国产黄a三级三级三级人| 青春草亚洲视频在线观看| 免费人成视频x8x8入口观看| 日韩欧美精品免费久久| 能在线免费观看的黄片| 国产视频内射| 亚洲第一电影网av| 国产色婷婷99| 尾随美女入室| 欧美日韩综合久久久久久| 人体艺术视频欧美日本| 悠悠久久av| 91av网一区二区| 国产成年人精品一区二区| 99在线人妻在线中文字幕| 青春草亚洲视频在线观看| а√天堂www在线а√下载| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 白带黄色成豆腐渣| 久久久久久久久久久免费av| av在线蜜桃| 国语自产精品视频在线第100页| av.在线天堂| 边亲边吃奶的免费视频| 亚洲国产精品sss在线观看| 搡女人真爽免费视频火全软件| 高清日韩中文字幕在线| 国产精品爽爽va在线观看网站| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 成年免费大片在线观看| 日韩视频在线欧美| www.av在线官网国产| 亚洲成人av在线免费| 男女啪啪激烈高潮av片| 亚洲18禁久久av| 欧美在线一区亚洲| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 日本黄色片子视频| 99久久人妻综合| 国产在线精品亚洲第一网站| 尾随美女入室| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 中文欧美无线码| 国产一区二区在线av高清观看| 97热精品久久久久久| 国产精品久久久久久久久免| 国产探花在线观看一区二区| www.av在线官网国产| 日本免费一区二区三区高清不卡| 五月伊人婷婷丁香| 久久精品国产清高在天天线| 一级毛片久久久久久久久女| 最后的刺客免费高清国语| 最近2019中文字幕mv第一页| 韩国av在线不卡| 亚洲国产精品国产精品| 97超碰精品成人国产| 久久久久久久久久久免费av| 两个人的视频大全免费| 少妇丰满av| 久久久精品欧美日韩精品| 男女视频在线观看网站免费| 人妻系列 视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 免费无遮挡裸体视频| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 精品午夜福利在线看| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 国产伦精品一区二区三区四那| 免费观看在线日韩| avwww免费| 乱人视频在线观看| 国产黄片视频在线免费观看| 1024手机看黄色片| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲av不卡在线观看| 麻豆一二三区av精品| 看十八女毛片水多多多| 黄色日韩在线| 日韩欧美 国产精品| 人人妻人人澡欧美一区二区| 亚洲18禁久久av| 狠狠狠狠99中文字幕| 精品人妻熟女av久视频| 成年av动漫网址| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 看十八女毛片水多多多| 最好的美女福利视频网| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产精品久久久久久av不卡| 亚洲国产精品久久男人天堂| 色5月婷婷丁香| 国产三级中文精品| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 国产精品三级大全| 高清毛片免费观看视频网站| 久久精品国产亚洲av天美| 国产伦一二天堂av在线观看| 久久热精品热| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 午夜精品国产一区二区电影 | 免费无遮挡裸体视频| 在线观看一区二区三区| 一区二区三区四区激情视频 | 成人国产麻豆网| 丝袜美腿在线中文| 国产av一区在线观看免费| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| av又黄又爽大尺度在线免费看 | av免费在线看不卡| 日本爱情动作片www.在线观看| 精品一区二区三区视频在线| 国产精品永久免费网站| 欧美人与善性xxx| 久久欧美精品欧美久久欧美| 五月玫瑰六月丁香| 精品久久久久久久末码| 亚洲国产精品久久男人天堂| 一个人看视频在线观看www免费| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 亚洲欧美清纯卡通| 99久久人妻综合| 一级黄色大片毛片| eeuss影院久久| 超碰av人人做人人爽久久| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产成人a区在线观看| 黄色日韩在线| 国产一区二区在线观看日韩| 久久精品影院6| 最后的刺客免费高清国语| 久久久成人免费电影| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产麻豆成人av免费视频| 国产 一区 欧美 日韩| 成年版毛片免费区| 婷婷六月久久综合丁香| 免费搜索国产男女视频| 国产69精品久久久久777片| 少妇的逼水好多| 不卡一级毛片| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 69av精品久久久久久| 99热6这里只有精品| 中文字幕久久专区| 免费无遮挡裸体视频| 精品久久久久久久久亚洲| 69人妻影院| 成年免费大片在线观看| kizo精华| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 热99在线观看视频| 两个人视频免费观看高清| 女人被狂操c到高潮| 免费看光身美女| 日本色播在线视频| 天美传媒精品一区二区| 中出人妻视频一区二区| 国产精品99久久久久久久久| 91av网一区二区| 亚洲av熟女| 99热这里只有精品一区| 亚洲最大成人中文| 国产精品综合久久久久久久免费| 久久精品影院6| 99在线视频只有这里精品首页| 日韩大尺度精品在线看网址| 全区人妻精品视频| 国产精品久久久久久久电影| 在线观看一区二区三区| 亚洲av第一区精品v没综合| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 性欧美人与动物交配| 少妇的逼水好多| 岛国毛片在线播放| 黄片无遮挡物在线观看| 久久久久久大精品| 人妻系列 视频| 成人午夜精彩视频在线观看| 日韩人妻高清精品专区| 色哟哟·www| 日韩亚洲欧美综合| 黄色欧美视频在线观看| 国产高潮美女av| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产老妇伦熟女老妇高清| 可以在线观看毛片的网站| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 精品久久久久久久久av| 三级毛片av免费| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 神马国产精品三级电影在线观看| or卡值多少钱| 亚洲一区高清亚洲精品| 日本熟妇午夜| 午夜a级毛片| 国产精品久久久久久av不卡| 日本三级黄在线观看| 中文亚洲av片在线观看爽| www.色视频.com| 99久久精品国产国产毛片| 国产日韩欧美在线精品| 国产午夜福利久久久久久| 变态另类丝袜制服| 51国产日韩欧美| 欧美日韩国产亚洲二区| 国产精品无大码| 欧美在线一区亚洲| 国产精品永久免费网站| 日本成人三级电影网站| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产精华一区二区三区| 国产日韩欧美在线精品| 日韩欧美 国产精品| 丰满乱子伦码专区| 日本黄色片子视频| 国内精品一区二区在线观看| 国内揄拍国产精品人妻在线| 久久韩国三级中文字幕| 亚洲人成网站在线播| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 亚洲精品色激情综合| 一本一本综合久久| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 又粗又爽又猛毛片免费看| 舔av片在线| 亚洲av不卡在线观看| 精品不卡国产一区二区三区| 国产成年人精品一区二区| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 欧美潮喷喷水| 欧美又色又爽又黄视频| 欧美日韩乱码在线| 极品教师在线视频| 波野结衣二区三区在线| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲精品国产av成人精品| 成人综合一区亚洲| 欧美+亚洲+日韩+国产| 一夜夜www| 亚洲国产精品久久男人天堂| 成人特级黄色片久久久久久久| 亚洲精品粉嫩美女一区| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 黄色日韩在线| 久久久精品欧美日韩精品| 国产大屁股一区二区在线视频| 欧美日本亚洲视频在线播放| 亚洲欧美清纯卡通| 不卡视频在线观看欧美| 99在线人妻在线中文字幕| 欧美成人精品欧美一级黄| 国内精品美女久久久久久| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 99热精品在线国产| 搡女人真爽免费视频火全软件| 少妇人妻精品综合一区二区 | 一边亲一边摸免费视频| 精品久久久久久成人av| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 一区二区三区免费毛片| 亚洲成av人片在线播放无| 久久中文看片网| 一级av片app| ponron亚洲| 久久午夜福利片| 国产伦一二天堂av在线观看| 成年免费大片在线观看| 插逼视频在线观看| 天美传媒精品一区二区| 国产精品电影一区二区三区| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 免费在线观看成人毛片| 久久精品91蜜桃| 91在线精品国自产拍蜜月| 免费一级毛片在线播放高清视频| 色综合亚洲欧美另类图片| 亚洲成a人片在线一区二区| 天堂中文最新版在线下载 | 国产黄色视频一区二区在线观看 | 中文欧美无线码| 简卡轻食公司| 免费av不卡在线播放| 免费观看人在逋| 国产伦精品一区二区三区四那| 久久久久久久久大av| 一级av片app| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 精品一区二区免费观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 我的老师免费观看完整版| 日韩av在线大香蕉| 欧美日韩国产亚洲二区| 九色成人免费人妻av| 在线播放国产精品三级| 精品人妻视频免费看| 国产美女午夜福利| 熟女电影av网| 亚洲av熟女| 中国美白少妇内射xxxbb| 一边亲一边摸免费视频| 级片在线观看| 日本色播在线视频| 免费在线观看成人毛片| 两个人的视频大全免费| 国模一区二区三区四区视频| 国产成人freesex在线| 成年女人永久免费观看视频| 久久久a久久爽久久v久久| 日韩中字成人| 一级毛片我不卡| 中文字幕av在线有码专区| 国产亚洲91精品色在线| 国产精品永久免费网站| 五月伊人婷婷丁香| 国产日本99.免费观看| 国产精品综合久久久久久久免费| 一本久久中文字幕| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 亚洲国产精品合色在线| 99九九线精品视频在线观看视频| 免费人成在线观看视频色| 亚洲av.av天堂| 欧美极品一区二区三区四区| 欧美日本亚洲视频在线播放| 亚洲成人久久爱视频| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 直男gayav资源| 亚洲欧美日韩无卡精品| 韩国av在线不卡| 22中文网久久字幕| 国产老妇伦熟女老妇高清| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 激情 狠狠 欧美| 日韩视频在线欧美| 美女黄网站色视频| 久久久久久久久久久丰满| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 人妻系列 视频| 1000部很黄的大片| 国产精华一区二区三区| 看十八女毛片水多多多| 最近中文字幕高清免费大全6| 色5月婷婷丁香| or卡值多少钱| 日韩一区二区视频免费看| 久久精品国产清高在天天线| 国产久久久一区二区三区| av国产免费在线观看| 久久精品久久久久久久性| 午夜福利在线在线| 国产麻豆成人av免费视频| 一区二区三区高清视频在线| 久久国内精品自在自线图片| 日本成人三级电影网站| 六月丁香七月| 成年版毛片免费区| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产探花极品一区二区| 99九九线精品视频在线观看视频| 中文字幕av在线有码专区| 国产一区二区激情短视频| 亚洲在线观看片| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产乱人偷精品视频| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产一区二区三区av在线 | 深夜a级毛片| 国产69精品久久久久777片| 国产亚洲5aaaaa淫片| 久久精品国产亚洲网站| 波多野结衣高清无吗| 最近2019中文字幕mv第一页| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 丝袜喷水一区| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 精品国产三级普通话版| 中出人妻视频一区二区| 日本色播在线视频| 亚洲精品456在线播放app| 最好的美女福利视频网| 国产视频内射| 久久99精品国语久久久| 国产视频内射| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产日本99.免费观看| 欧美又色又爽又黄视频| 国产中年淑女户外野战色| 日韩av不卡免费在线播放| 最近2019中文字幕mv第一页| 人妻夜夜爽99麻豆av| 午夜精品在线福利| 欧美三级亚洲精品| 99久久精品国产国产毛片| 中文亚洲av片在线观看爽| 最近手机中文字幕大全| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 春色校园在线视频观看| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | av在线播放精品| 少妇的逼水好多| 综合色av麻豆| 人人妻人人看人人澡| 亚洲精品国产成人久久av| 欧美变态另类bdsm刘玥| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲三级黄色毛片| 国产成人福利小说| 国产在线男女| 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲欧美成人精品一区二区| 乱人视频在线观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 欧美成人a在线观看| 国产视频内射| 国产一区二区三区av在线 | 97人妻精品一区二区三区麻豆| 久久久国产成人精品二区| 国产一区二区三区av在线 | 成人国产麻豆网| 国产精品永久免费网站| 国产私拍福利视频在线观看| 国产综合懂色| 精品午夜福利在线看| 青春草视频在线免费观看| 长腿黑丝高跟| 欧美最黄视频在线播放免费| 国产一区二区激情短视频| 国产在线男女| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国产伦一二天堂av在线观看| 一夜夜www| 成年版毛片免费区| 97热精品久久久久久| 国产熟女欧美一区二区| 午夜精品在线福利| 1000部很黄的大片| 三级毛片av免费| 亚洲真实伦在线观看| 久久人人爽人人片av| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 成年版毛片免费区| 在线观看午夜福利视频| 成年女人看的毛片在线观看| 麻豆国产av国片精品| 在线观看av片永久免费下载| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 成人三级黄色视频| 成人亚洲精品av一区二区| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 中出人妻视频一区二区| 亚洲欧美精品专区久久| 久久久久网色| 亚洲国产高清在线一区二区三| 午夜精品在线福利| 美女脱内裤让男人舔精品视频 | 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 国产伦精品一区二区三区视频9| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 97超碰精品成人国产| 日韩成人av中文字幕在线观看| 黄色一级大片看看| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 天堂中文最新版在线下载 | 直男gayav资源| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 国产探花在线观看一区二区| 综合色av麻豆| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 91久久精品国产一区二区成人| 女同久久另类99精品国产91| 毛片女人毛片| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲一区高清亚洲精品| 久久亚洲精品不卡| 99久久成人亚洲精品观看| 黑人高潮一二区| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 有码 亚洲区| av在线亚洲专区| 日日摸夜夜添夜夜爱| 中文亚洲av片在线观看爽| 在线免费十八禁| 久久99精品国语久久久| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 免费电影在线观看免费观看| 免费人成在线观看视频色| 综合色av麻豆| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 日韩高清综合在线| 一区二区三区高清视频在线| 国产亚洲欧美98| 精品国产三级普通话版| 成人美女网站在线观看视频| 成人特级av手机在线观看| 亚洲性久久影院| 卡戴珊不雅视频在线播放| 在线天堂最新版资源| 久99久视频精品免费| 中文欧美无线码| 直男gayav资源| 国产av不卡久久| 日韩在线高清观看一区二区三区| 久久6这里有精品| 国产精品久久久久久久电影| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 黑人高潮一二区| 国产午夜精品一二区理论片| av视频在线观看入口| 欧美三级亚洲精品| 中文字幕精品亚洲无线码一区| www日本黄色视频网| 男女那种视频在线观看| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 伊人久久精品亚洲午夜| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 日韩人妻高清精品专区| 国产精品伦人一区二区| 美女国产视频在线观看| 麻豆一二三区av精品| 最近中文字幕高清免费大全6| 欧美日韩综合久久久久久| 精品人妻熟女av久视频| 亚洲成人中文字幕在线播放| 最近最新中文字幕大全电影3| 国产精品日韩av在线免费观看| 国产探花极品一区二区| 国产成人影院久久av| 久久欧美精品欧美久久欧美| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 国产精品人妻久久久影院| 尾随美女入室| 好男人视频免费观看在线| 一区二区三区高清视频在线| 国产一级毛片在线| 日韩三级伦理在线观看| av在线亚洲专区| 能在线免费看毛片的网站| 日韩人妻高清精品专区| 中文字幕制服av| 亚洲精品色激情综合| av在线亚洲专区| 亚洲精品久久国产高清桃花| 亚洲精品亚洲一区二区| 中文字幕免费在线视频6| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 久久久久免费精品人妻一区二区| 午夜福利在线观看吧| 中文字幕av成人在线电影| 欧美另类亚洲清纯唯美| 少妇的逼好多水| 看免费成人av毛片| 99久国产av精品国产电影| 久久99精品国语久久久| 日韩欧美国产在线观看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 少妇高潮的动态图| 午夜爱爱视频在线播放| 婷婷色综合大香蕉| 丝袜喷水一区| 免费观看人在逋| 国产极品精品免费视频能看的| 啦啦啦啦在线视频资源| 美女黄网站色视频|