• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于線粒體基因分析黑頸鶴和灰鶴的遺傳差異

    2018-12-12 09:39:06王野影白志周張明明粟海軍
    生物學(xué)雜志 2018年6期
    關(guān)鍵詞:灰鶴黑頸鶴線粒體

    王野影, 白志周, 熊 勇, 張明明, 粟海軍

    (1. 貴州師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院 植物生理與發(fā)育調(diào)控重點實驗室, 貴陽 550025; 2. 貴州大學(xué)生物多樣性與自然保護(hù)研究中心, 貴陽 550001)

    黑頸鶴(Grusnigricollis)和灰鶴(Grusgrus)隸屬于鶴科(Gruidae),冠鶴亞科(Balearicinae),鶴屬(Grus)。黑頸鶴作為大型飛行涉禽,活動范圍極其廣泛。在中國,黑頸鶴主要在新疆東昆侖-阿爾金山地區(qū)[1]、四川若爾蓋濕地國家級自然保護(hù)區(qū)[2]、貴州草海國家級自然保護(hù)區(qū)[3]、西藏日喀則地區(qū)[4]、云南大山包黑頸鶴自然保護(hù)區(qū)[5]等地繁殖或越冬。灰鶴是大型涉禽,在我國大部分地區(qū)均可看到。黑頸鶴和灰鶴的食性、鳴叫行為、取食范圍[6]、生理指標(biāo)均相近[7],而且經(jīng)筆者觀察,草海黑頸鶴和灰鶴存在混群生活的現(xiàn)象,然而它們的遺傳差異目前不得而知。

    線粒體DNA是細(xì)胞核外的遺傳物質(zhì),是可以在基因組水平上研究的分子標(biāo)記,具有母系遺傳的特點,其分子量小、結(jié)構(gòu)簡單、無內(nèi)含子、種內(nèi)幾乎無重排、進(jìn)化速度快、無組內(nèi)特異性等特點,是研究動物遺傳分化的有力工具[8]。本研究測定了黑頸鶴和灰鶴部分個體的線粒體COI基因,結(jié)合GenBank數(shù)據(jù)庫中的黑頸鶴和灰鶴的線粒體COI基因及基因組序列,對黑頸鶴和灰鶴分別從多個體的COI基因及單個體的線粒體基因組進(jìn)行比較分析,探討其遺傳差異。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    于2016年1月從貴州草海國家級自然保護(hù)區(qū)獲得了8份黑頸鶴糞便和4份灰鶴糞便。糞便樣品均來自于黑頸鶴和灰鶴的覓食地。利用遠(yuǎn)距離觀察法,待黑頸鶴或灰鶴取食離開后,采用無菌手套進(jìn)行糞便收集,收集時為避免樣品重復(fù),收集的糞便間距均大于2 m,全部實驗樣品都浸泡在含無水乙醇的EP管中,冰袋冷藏,立即運回實驗室,并于-20°C冰箱冷凍保存。

    1.2 方法

    1.2.1 DNA提取

    實驗采用糞便基因組DNA 提取試劑盒(Stool Genomic DNA Kit,康為世紀(jì))進(jìn)行糞便的DNA提取,提取方法參閱試劑盒所帶說明書,由于此試劑盒提取的DNA濃度很低,為了提高濃度,在初始時糞便盡量稱取0.3 g,結(jié)束時,加30 μL水溶解DNA,于4℃冰箱保存待用。

    1.2.2 PCR擴(kuò)增及測序

    參考GenBank中鶴屬鳥類的COI序列,使用Primer primier 5.0軟件設(shè)計簡并引物,用于從提取的糞便DNA中擴(kuò)增黑頸鶴和灰鶴的COI基因。引物序列如表1,引物由上海生工生物工程技術(shù)有限公司合成。采用普通PCR進(jìn)行擴(kuò)增,反應(yīng)程序:95℃預(yù)變性3 min;95℃變性30 s,50℃復(fù)性30 s,72℃延伸1 min,重復(fù)30個循環(huán);72℃再延伸8 min。反應(yīng)體系為25 μL,包括:TaqPCR Master Mix (2×,blue dye)12.5 μL,上下游引物各1 μL(10 μmol/L),模板1 μL (10~100 ng/μL),加ddH2O補(bǔ)足。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物直接送此公司進(jìn)行單向測序,測序引物選擇5348F或6085R均可。

    表1 黑頸鶴和灰鶴COI基因引物設(shè)計序列

    1.2.3 序列分析

    首先使用BioEdit v7.0.5(http://www.mbio.ncsu.edu/bioedit/page2.html)對測序所得峰圖文件進(jìn)行檢驗,保證使用的序列均為單峰。結(jié)合從GenBank數(shù)據(jù)庫中下載的黑頸鶴和灰鶴的COI序列,整理成一個Fasta文件。后使用MEGA7.0[9]軟件對此文件進(jìn)行堿基組成(Base composition)及遺傳距離分析:采用p-距離法重復(fù)1000次,分析黑頸鶴和灰鶴的種間遺傳距離;采用Kimura 2-參數(shù)模型重復(fù)1000次,分別分析黑頸鶴和灰鶴的種內(nèi)遺傳距離;對黑頸鶴和灰鶴的線粒體基因組進(jìn)行核苷酸組成,蛋白編碼基因核苷酸組成的比較分析。使用DnaSPv6[10]軟件進(jìn)行黑頸鶴和灰鶴的COI的變異位點 (Variable sites)、簡約信息位點 (Parsimony informative sites)、單倍型及單倍型多樣性的分析,對線粒體基因組各段基因進(jìn)行變異位點分析及比例計算。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 序列組成分析

    本實驗共獲得黑頸鶴COI基因8條,灰鶴COI基因4條,從GenBank數(shù)據(jù)庫下載黑頸鶴COI基因3條、線粒體基因組序列1條(FJ769851.1),灰鶴COI基因5條、線粒體基因組序列1條(FJ769849.1),序列詳細(xì)信息參見表2。從表2中的采集地可以看出,黑頸鶴和灰鶴的COI基因序列可能來自不同種群(遷徙鳥類,無法確定)。手動將參差不齊的序列取齊,共獲得COI基因序列片段長度637 bp,其中,黑頸鶴序列中 A+T 含量為 51.20%,G+C 含量為 48.80%;而灰鶴序列中 A+T 含量為 51.80%,G+C 含量為 48.20%;說明二者的COI序列轉(zhuǎn)換與顛換的發(fā)生率近似,而這種存在AT偏好性的現(xiàn)象也同樣發(fā)生在其他脊椎動物中[14]。利用DnaSPv6軟件分析發(fā)現(xiàn),黑頸鶴的變異位點和簡約信息位點均為0,單倍型為1,單倍型多樣性為0,核苷酸多樣性為0,說明COI基因并不適用于黑頸鶴種群間的差異分析;灰鶴的變異位點為1,簡約信息位點為0,單倍型為2,單倍型多樣性為0.032 47,核苷酸多樣性為0.000 39,說明灰鶴種群間的COI基因有輕微變異,但此基因仍不適用于灰鶴種群內(nèi)的遺傳差異分析。然而,黑頸鶴和灰鶴COI序列間的變異位點為11個,簡約信息位點為10,所以COI適用于作為黑頸鶴和灰鶴種間分析的分子標(biāo)記。基于11只黑頸鶴和9只灰鶴的COI基因,共計20條序列,計算的種間遺傳距離為0.016;黑頸鶴和灰鶴的種內(nèi)遺傳距離均為0,說明黑頸鶴和灰鶴的種內(nèi)交流頻繁且變異小。

    表2黑頸鶴和灰鶴的COI基因和線粒體基因組的GenBank檢索號及序列來源

    2.2 比較線粒體基因組分析

    黑頸鶴的線粒體基因組序列長度為16 646 bp,灰鶴的為16 649 bp,包含13個蛋白編碼基因,22個tRNA基因,2個rRNA基因和一個控制區(qū)。通過對兩種鶴的線粒體基因組基因組成和各基因的變異位點及其所占比例(表3)發(fā)現(xiàn):兩種鶴的線粒體基因排列順序均與鳥類典型的線粒體基因排列順序一致[15];除16SrRNA基因片段長度有2 bp的差異外,其余基因均等長。各基因中變異位點所占比例高于線粒體基因組變異位點比例(0.020 31)的基因有控制區(qū)ND1(0.020 70)、ND2 (0.024 98)、tRNATyr(0.028 17)、ATP8(0.028 74)、ATP6(0.026 32)、ND3(0.025 57)、ND4(0.021 93)、tRNASer(0.030 30)、ND5(0.030 85)、Cytb(0.028 00)、CR(0.046 28)和ND6(0.024 90)。其中,CR、tRNASer、tRNATyr、Cytb的變異位點比例較高,但tRNASer和tRNATyr片段較短,所含信息量較少,不足以提供足夠的信息位點,因此,本研究認(rèn)為CR和Cytb可作為區(qū)分黑頸鶴和灰鶴的分子標(biāo)記。

    表3 黑頸鶴和灰鶴線粒體基因組比較

    3 討論

    3.1 遺傳差異分析

    遺傳多樣性是物種保持進(jìn)化潛能的基礎(chǔ)[16],研究物種的遺傳多樣性對瀕危物種的保護(hù)、保護(hù)等級及優(yōu)先保護(hù)單元的確定具有極為重要的意義。其中,遺傳變異作為保護(hù)遺傳學(xué)研究的重要內(nèi)容,從一定程度上可反映遺傳多樣性。本研究中,黑頸鶴COI基因的核苷酸多樣性和單倍型多樣性均為0,灰鶴COI基因的核苷酸多樣性和單倍型多樣性比黑頸鶴偏高,兩種鶴的遺傳多樣性都處于極低水平,各種群均未出現(xiàn)遺傳分化,說明需要對這兩種鶴加大保護(hù)力度,以降低滅絕風(fēng)險。

    3.2 分子標(biāo)記選擇

    合適的分子標(biāo)記在物種鑒定、種群遺傳學(xué)和系統(tǒng)進(jìn)化研究中至關(guān)重要[17]。在黑頸鶴和灰鶴的線粒體全基因組的37個基因中有12個基因的變異位點所占比例高于全線粒體基因組,說明除線粒體基因組外,還有其他基因可作為黑頸鶴和灰鶴系統(tǒng)發(fā)育位置的分子標(biāo)記。COI作為分子標(biāo)記常用于昆蟲的分子系統(tǒng)學(xué)中,鳥類分類學(xué)研究中應(yīng)用較少,被認(rèn)為適用于分析科內(nèi)屬間的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系[18],在本研究中COI基因的變異位點所占比例僅為0.009 66,僅高于12SrRNA(0.008 26)、COII(0.007 31)和幾個變異位點所占比例為0的tRNA基因,但仍可以區(qū)分黑頸鶴和灰鶴??刂茀^(qū)CR又稱D-loop區(qū),由于所受選擇壓力較小,進(jìn)化速率相對較快,被認(rèn)為是線粒體基因組中堿基替換和長度變異最大的區(qū)域[19],黑頸鶴和灰鶴的CR基因均符合這一規(guī)律。Cytb基因被廣泛應(yīng)用于鳥類系統(tǒng)學(xué)研究中,在黑頸鶴和灰鶴的蛋白編碼基因中,Cytb的變異位點所占比例僅次于CR。在今后的研究中可考慮將這兩個基因作為潛在的分子標(biāo)記用于有效區(qū)分黑頸鶴和灰鶴,而且研究已證實CR可用于區(qū)分灰鶴、丹頂鶴和白頭鶴的不同種群[20],Cytb是否可用于區(qū)分其它鶴屬鳥類、鶴類種群還需進(jìn)行深入分析。

    猜你喜歡
    灰鶴黑頸鶴線粒體
    黑頸鶴大戰(zhàn)惡狼
    棘皮動物線粒體基因組研究進(jìn)展
    海洋通報(2021年1期)2021-07-23 01:55:14
    線粒體自噬與帕金森病的研究進(jìn)展
    歸來吧!精靈(連載六)
    神奇的黑頸鶴
    主 意
    主意
    主意
    主意
    NF-κB介導(dǎo)線粒體依賴的神經(jīng)細(xì)胞凋亡途徑
    久久久久久久久久久丰满| 亚洲精品456在线播放app| 最新中文字幕久久久久| 久久久久久久久中文| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 1000部很黄的大片| 国产探花极品一区二区| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 又爽又黄无遮挡网站| 能在线免费观看的黄片| 成人性生交大片免费视频hd| av国产久精品久网站免费入址| www.色视频.com| 日韩精品青青久久久久久| 精品国产露脸久久av麻豆 | 男女边摸边吃奶| 波野结衣二区三区在线| 国产精品.久久久| 免费av观看视频| 特级一级黄色大片| 黄色欧美视频在线观看| 国产 一区 欧美 日韩| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 国产中年淑女户外野战色| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 成人午夜高清在线视频| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国国产精品蜜臀av免费| 一边亲一边摸免费视频| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 婷婷色综合大香蕉| 免费观看a级毛片全部| freevideosex欧美| 国产老妇女一区| 麻豆久久精品国产亚洲av| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 成人毛片60女人毛片免费| 特级一级黄色大片| 欧美高清成人免费视频www| 免费人成在线观看视频色| 成人亚洲精品av一区二区| 色视频www国产| 亚洲国产最新在线播放| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 嫩草影院入口| 免费观看无遮挡的男女| xxx大片免费视频| 久久这里只有精品中国| 精品人妻视频免费看| 久久这里有精品视频免费| 成人鲁丝片一二三区免费| 日本一二三区视频观看| 免费看美女性在线毛片视频| 淫秽高清视频在线观看| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲成人中文字幕在线播放| 在线天堂最新版资源| 免费av不卡在线播放| 色综合色国产| 国产午夜精品论理片| 日韩电影二区| 免费黄频网站在线观看国产| 亚洲av在线观看美女高潮| 久热久热在线精品观看| 一级黄片播放器| 少妇熟女欧美另类| 51国产日韩欧美| 毛片女人毛片| 在现免费观看毛片| 日韩欧美精品免费久久| 青春草亚洲视频在线观看| 草草在线视频免费看| 日韩精品有码人妻一区| 深夜a级毛片| 最新中文字幕久久久久| 亚洲伊人久久精品综合| 国产精品一区二区三区四区久久| 又大又黄又爽视频免费| 亚洲精品,欧美精品| 国产三级在线视频| 在线观看一区二区三区| 亚洲精品,欧美精品| 欧美bdsm另类| 在线免费观看的www视频| 有码 亚洲区| 色哟哟·www| 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲高清免费不卡视频| 日韩欧美精品免费久久| 99久久精品国产国产毛片| 男人爽女人下面视频在线观看| 国产淫片久久久久久久久| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 亚洲在线观看片| 一级爰片在线观看| 青春草视频在线免费观看| kizo精华| 亚洲电影在线观看av| 日韩一本色道免费dvd| 日韩伦理黄色片| 五月伊人婷婷丁香| 久久久成人免费电影| 国产精品久久久久久精品电影| 久久99热这里只有精品18| 我的女老师完整版在线观看| 成人特级av手机在线观看| 亚洲最大成人av| av一本久久久久| 淫秽高清视频在线观看| 一二三四中文在线观看免费高清| av国产久精品久网站免费入址| 六月丁香七月| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲高清免费不卡视频| 在线 av 中文字幕| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 特大巨黑吊av在线直播| 午夜精品国产一区二区电影 | 听说在线观看完整版免费高清| 两个人视频免费观看高清| 国产黄色小视频在线观看| 91精品伊人久久大香线蕉| 春色校园在线视频观看| 天堂俺去俺来也www色官网 | 免费看光身美女| 少妇高潮的动态图| 亚洲欧美精品自产自拍| 午夜福利在线观看免费完整高清在| av网站免费在线观看视频 | 久久久国产一区二区| 欧美精品国产亚洲| 九色成人免费人妻av| 91久久精品国产一区二区三区| 国产视频首页在线观看| 国产黄a三级三级三级人| 搡老妇女老女人老熟妇| 欧美性感艳星| 亚洲国产精品成人综合色| 国产片特级美女逼逼视频| 成年免费大片在线观看| 国产久久久一区二区三区| 国产色爽女视频免费观看| 波多野结衣巨乳人妻| 国产91av在线免费观看| 精品一区在线观看国产| 亚洲自拍偷在线| av网站免费在线观看视频 | 亚洲成人av在线免费| 观看免费一级毛片| 午夜爱爱视频在线播放| 日本一二三区视频观看| 高清av免费在线| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 日本色播在线视频| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 国产国拍精品亚洲av在线观看| 免费少妇av软件| 尾随美女入室| 亚洲国产高清在线一区二区三| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| eeuss影院久久| 亚洲国产欧美在线一区| 免费大片18禁| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 午夜激情福利司机影院| 成人av在线播放网站| 欧美成人精品欧美一级黄| 别揉我奶头 嗯啊视频| 秋霞伦理黄片| 久久久久免费精品人妻一区二区| 成人亚洲欧美一区二区av| 久久精品人妻少妇| 免费av毛片视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲va在线va天堂va国产| 午夜激情欧美在线| 极品少妇高潮喷水抽搐| 久久亚洲国产成人精品v| 人妻夜夜爽99麻豆av| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产成年人精品一区二区| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产精品熟女久久久久浪| 在线免费观看不下载黄p国产| 天堂网av新在线| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 一级毛片 在线播放| 深爱激情五月婷婷| 美女cb高潮喷水在线观看| 国产单亲对白刺激| 精品久久久噜噜| 伊人久久精品亚洲午夜| 在线观看av片永久免费下载| 婷婷色综合大香蕉| av一本久久久久| 午夜精品在线福利| 亚洲美女搞黄在线观看| 久久久久久久久中文| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 男人舔奶头视频| 亚洲国产精品sss在线观看| 亚洲自偷自拍三级| 日本av手机在线免费观看| 亚洲va在线va天堂va国产| 国产探花在线观看一区二区| 高清视频免费观看一区二区 | 一区二区三区乱码不卡18| 成年免费大片在线观看| 欧美高清成人免费视频www| 身体一侧抽搐| 精品久久久久久电影网| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 男人狂女人下面高潮的视频| 日韩在线高清观看一区二区三区| 肉色欧美久久久久久久蜜桃 | 亚洲av免费在线观看| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产69精品久久久久777片| 国产日韩欧美在线精品| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 色综合亚洲欧美另类图片| 卡戴珊不雅视频在线播放| 国产亚洲一区二区精品| 久久亚洲国产成人精品v| 免费高清在线观看视频在线观看| 亚洲av成人av| 男人爽女人下面视频在线观看| 国产日韩欧美在线精品| 熟女电影av网| 在线免费观看的www视频| 午夜福利视频1000在线观看| 在线观看人妻少妇| 精品不卡国产一区二区三区| 美女大奶头视频| 综合色丁香网| 99久国产av精品| 久久亚洲国产成人精品v| 日韩人妻高清精品专区| 国产视频首页在线观看| 一区二区三区乱码不卡18| 99久国产av精品| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 精华霜和精华液先用哪个| 一级二级三级毛片免费看| 能在线免费观看的黄片| 美女被艹到高潮喷水动态| 高清视频免费观看一区二区 | 精品国产露脸久久av麻豆 | 免费观看av网站的网址| 全区人妻精品视频| 边亲边吃奶的免费视频| 男女边摸边吃奶| 亚洲国产精品专区欧美| 久久人人爽人人爽人人片va| 五月玫瑰六月丁香| 免费观看性生交大片5| 国模一区二区三区四区视频| 国模一区二区三区四区视频| 最近手机中文字幕大全| 2021少妇久久久久久久久久久| 美女高潮的动态| 久久久久久久午夜电影| 国产伦精品一区二区三区视频9| 日本色播在线视频| 色综合亚洲欧美另类图片| 久久久久久国产a免费观看| 日本爱情动作片www.在线观看| 久久6这里有精品| 精品久久久久久久末码| 在线免费观看不下载黄p国产| 亚洲av电影不卡..在线观看| 丝袜喷水一区| 99久久精品一区二区三区| 成人亚洲精品一区在线观看 | 国产精品人妻久久久久久| a级一级毛片免费在线观看| 久久久久久久久中文| 人人妻人人澡欧美一区二区| 国产一区二区三区av在线| av国产免费在线观看| 99热网站在线观看| 色播亚洲综合网| 久99久视频精品免费| 国产中年淑女户外野战色| 亚洲精品一区蜜桃| 国产成人a区在线观看| 成人一区二区视频在线观看| 久久久午夜欧美精品| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产精品久久久久久精品电影| 91久久精品国产一区二区三区| 嫩草影院入口| 丝袜喷水一区| 伦理电影大哥的女人| 成年版毛片免费区| 亚洲欧美日韩东京热| 欧美精品一区二区大全| 黄片无遮挡物在线观看| 亚洲av.av天堂| 久久综合国产亚洲精品| 国产亚洲av嫩草精品影院| 简卡轻食公司| 国产色爽女视频免费观看| 欧美日本视频| 在线天堂最新版资源| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 男女国产视频网站| 性色avwww在线观看| 麻豆乱淫一区二区| 国产淫语在线视频| 看免费成人av毛片| 在线观看av片永久免费下载| 精品久久久久久电影网| 亚洲精品国产成人久久av| 嫩草影院入口| 女人被狂操c到高潮| 国产又色又爽无遮挡免| 久久久久久久久久久免费av| 国产高清不卡午夜福利| 只有这里有精品99| 久久久成人免费电影| 久久99热这里只频精品6学生| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 精品人妻一区二区三区麻豆| 不卡视频在线观看欧美| 搡女人真爽免费视频火全软件| 激情 狠狠 欧美| 超碰97精品在线观看| 午夜免费观看性视频| 久久久久久九九精品二区国产| 最近最新中文字幕免费大全7| 99热网站在线观看| 老司机影院成人| 最近最新中文字幕大全电影3| 亚洲av日韩在线播放| av国产免费在线观看| 国产黄片视频在线免费观看| 三级毛片av免费| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲精品视频女| 最近最新中文字幕免费大全7| 午夜爱爱视频在线播放| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 国产真实伦视频高清在线观看| 久久久精品欧美日韩精品| 欧美丝袜亚洲另类| 亚洲av在线观看美女高潮| 伦精品一区二区三区| 亚洲怡红院男人天堂| 久久精品久久精品一区二区三区| 熟妇人妻不卡中文字幕| 色5月婷婷丁香| 免费看光身美女| 深夜a级毛片| 一区二区三区免费毛片| 韩国av在线不卡| 中文字幕久久专区| 亚洲av中文av极速乱| 男女下面进入的视频免费午夜| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 国产精品国产三级国产专区5o| 日韩欧美一区视频在线观看 | 最近最新中文字幕免费大全7| 美女黄网站色视频| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 国产午夜福利久久久久久| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 成人av在线播放网站| 国产成人一区二区在线| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 欧美不卡视频在线免费观看| 边亲边吃奶的免费视频| 久久久精品94久久精品| 午夜福利视频精品| 99热这里只有精品一区| 国产一区二区三区综合在线观看 | 日韩成人伦理影院| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 国产视频首页在线观看| av线在线观看网站| 一区二区三区高清视频在线| 国产亚洲91精品色在线| 国产v大片淫在线免费观看| 国产精品人妻久久久久久| 在线天堂最新版资源| 偷拍熟女少妇极品色| 久久久久性生活片| 久久久久久久久久久丰满| 在线天堂最新版资源| 国产精品爽爽va在线观看网站| 天堂影院成人在线观看| 亚洲av国产av综合av卡| 男插女下体视频免费在线播放| 水蜜桃什么品种好| 亚洲av不卡在线观看| 亚洲成人av在线免费| 免费电影在线观看免费观看| 乱系列少妇在线播放| 久久久久久久久中文| 亚洲伊人久久精品综合| 欧美成人一区二区免费高清观看| 欧美潮喷喷水| 婷婷色麻豆天堂久久| 一区二区三区免费毛片| 中文资源天堂在线| av又黄又爽大尺度在线免费看| 晚上一个人看的免费电影| 国产黄色免费在线视频| 好男人视频免费观看在线| 内射极品少妇av片p| 久久人人爽人人爽人人片va| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲丝袜综合中文字幕| 日本wwww免费看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 中文字幕av在线有码专区| 久久99蜜桃精品久久| 一本一本综合久久| 99热这里只有是精品50| 国产有黄有色有爽视频| 久久综合国产亚洲精品| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 黄片无遮挡物在线观看| 性色avwww在线观看| 内射极品少妇av片p| www.色视频.com| 久久久久性生活片| 国内精品一区二区在线观看| 一级a做视频免费观看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 三级国产精品欧美在线观看| 亚洲美女视频黄频| 国产黄片视频在线免费观看| 欧美97在线视频| 日日啪夜夜撸| 午夜免费激情av| 少妇熟女欧美另类| 国产精品久久久久久久久免| 直男gayav资源| 欧美极品一区二区三区四区| 国产成人一区二区在线| 91久久精品电影网| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 直男gayav资源| 免费观看av网站的网址| 日韩av免费高清视频| 伊人久久国产一区二区| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 97人妻精品一区二区三区麻豆| 日韩三级伦理在线观看| av卡一久久| 国产成人a区在线观看| 亚洲美女视频黄频| 丰满少妇做爰视频| 亚洲av成人精品一区久久| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 免费观看的影片在线观看| 天天一区二区日本电影三级| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 中文字幕亚洲精品专区| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 蜜臀久久99精品久久宅男| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产高清三级在线| .国产精品久久| 青青草视频在线视频观看| 欧美高清性xxxxhd video| 亚洲av国产av综合av卡| 久久99热这里只频精品6学生| 国产精品人妻久久久久久| 看非洲黑人一级黄片| 国产精品嫩草影院av在线观看| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 精品人妻视频免费看| 一边亲一边摸免费视频| 日本三级黄在线观看| 久久久午夜欧美精品| 日韩亚洲欧美综合| 久久这里有精品视频免费| 国产精品久久久久久精品电影| 亚洲人与动物交配视频| 国产成人精品久久久久久| 丰满乱子伦码专区| 丝瓜视频免费看黄片| 国产极品天堂在线| 国产av国产精品国产| 国产一区二区三区综合在线观看 | 日韩大片免费观看网站| 欧美成人一区二区免费高清观看| 晚上一个人看的免费电影| 免费观看av网站的网址| 日日啪夜夜撸| 亚洲欧美清纯卡通| 黄色欧美视频在线观看| 久久久亚洲精品成人影院| av国产久精品久网站免费入址| 成人一区二区视频在线观看| 久久久久精品久久久久真实原创| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 99热这里只有是精品50| 日韩伦理黄色片| 干丝袜人妻中文字幕| 成年版毛片免费区| 精品午夜福利在线看| 亚洲精品成人av观看孕妇| 久久精品国产亚洲av涩爱| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产老妇伦熟女老妇高清| 内射极品少妇av片p| 国产一区二区在线观看日韩| 午夜精品在线福利| 不卡视频在线观看欧美| av播播在线观看一区| 少妇熟女欧美另类| 欧美日韩综合久久久久久| 日韩av免费高清视频| 亚洲欧美清纯卡通| 国内精品一区二区在线观看| 黑人高潮一二区| 免费观看精品视频网站| 婷婷色综合大香蕉| 丝袜美腿在线中文| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 亚洲精品色激情综合| 伊人久久国产一区二区| 亚洲精品日韩av片在线观看| 女人被狂操c到高潮| 人妻夜夜爽99麻豆av| 午夜福利高清视频| 深夜a级毛片| 性色avwww在线观看| 免费人成在线观看视频色| 美女大奶头视频| 性色avwww在线观看| 国产精品人妻久久久久久| 草草在线视频免费看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| kizo精华| 国产男女超爽视频在线观看| 久久久久久久久大av| 成人av在线播放网站| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 美女黄网站色视频| 欧美成人一区二区免费高清观看| 免费av不卡在线播放| 欧美精品国产亚洲| 成年免费大片在线观看| 欧美高清成人免费视频www| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 最后的刺客免费高清国语| 免费人成在线观看视频色| 九色成人免费人妻av| 国产精品蜜桃在线观看| 久久久久久久久久久免费av| 一二三四中文在线观看免费高清| 国产日韩欧美在线精品| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 少妇人妻精品综合一区二区| 中国美白少妇内射xxxbb| 男女下面进入的视频免费午夜| 国产久久久一区二区三区| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 国产亚洲一区二区精品| www.av在线官网国产| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 干丝袜人妻中文字幕| 国产高清不卡午夜福利| 欧美日韩精品成人综合77777| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 99九九线精品视频在线观看视频| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 男女啪啪激烈高潮av片| 97精品久久久久久久久久精品| 午夜免费观看性视频| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产精品一区www在线观看| 成人亚洲欧美一区二区av| 久久久久久久午夜电影| 亚洲精品一二三| 亚洲国产av新网站| 国产单亲对白刺激| 日韩精品有码人妻一区| 99热全是精品| 99久久九九国产精品国产免费| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 18+在线观看网站| 美女主播在线视频| 在现免费观看毛片| 久久久久久久久久久免费av| 国产精品日韩av在线免费观看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 街头女战士在线观看网站| 五月天丁香电影| 内射极品少妇av片p| 国产高清国产精品国产三级 | 久久久亚洲精品成人影院| 激情 狠狠 欧美| av在线老鸭窝| 国内揄拍国产精品人妻在线| 日韩一区二区三区影片| 亚洲精品成人久久久久久| 大香蕉97超碰在线| 九草在线视频观看| 嫩草影院新地址| 女人久久www免费人成看片| 成人漫画全彩无遮挡|