518100南方醫(yī)科大學(xué)深圳醫(yī)院輸血科
在以往的臨床研究中,已經(jīng)得知在正常A、B型人的血清之中,ABO血型系統(tǒng)中的抗體主要以IgM類為主,但對(duì)于O型正常人ABO血型系統(tǒng)中的抗體類型卻并不明確。對(duì)此,提出了紛紜眾多的說(shuō)法,這給醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的初學(xué)者以及工作者都帶來(lái)了一定的困惑[1]。在這種情況下,為了進(jìn)一步研究O型人血清ABO血型抗體的主要類別,特選擇了鹽水介質(zhì)法、間接抗人球蛋白法,對(duì)O型、A型、B型正常人血清中的IgM/IgG類抗A、抗B的效價(jià)進(jìn)行測(cè)定,現(xiàn)報(bào)告如下。
從我院獻(xiàn)血者中抽取A、B、O型血清標(biāo)準(zhǔn),每種各60例,年齡19~42歲,均為男性。
研究材料:試劑為5%A、B、O型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液、廣譜抗人球蛋白,2-巰基乙醇;KA-2200低速離心機(jī);37℃水浴箱。
研究方法:①對(duì)A、B、O型血清中的IgM類抗A、抗B的效價(jià)進(jìn)行測(cè)定和研究。具體的檢測(cè)方法:先用PBS對(duì)血清進(jìn)行倍比稀釋,之后分別加入5%A型、B型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液。并以O(shè)型紅細(xì)胞懸液作為對(duì)比的標(biāo)準(zhǔn),對(duì)兩種檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)照,對(duì)血清總抗體的特效進(jìn)行確定。確定的方法為:以與相應(yīng)的抗原紅細(xì)胞出現(xiàn)1個(gè)凝集的最高稀釋倍數(shù)之倒數(shù)。②對(duì)A、B、O型血清中的IgG類抗A、抗B的效價(jià)進(jìn)行測(cè)定和研究。將收集到的血清經(jīng)0.2 mol/L 2-巰基乙醇對(duì)IgM類抗體進(jìn)行破壞,之后利用鹽水凝集的實(shí)驗(yàn)方法,并將結(jié)果與已知效價(jià)人源的IgG抗D進(jìn)行平行對(duì)照,并經(jīng)過(guò)2-Me處理之后,所研究血清中的抗D效果不會(huì)出現(xiàn)降低的現(xiàn)象,然后對(duì)其進(jìn)行倍比稀釋。并采取間接抗人球蛋白法對(duì)血清中的IgG類抗A、抗B的效價(jià)進(jìn)行檢測(cè),并將其與IgM類抗體效價(jià)進(jìn)行對(duì)照、測(cè)定。
統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:采用SPSS 20.0分析,計(jì)數(shù)資料采用(%)表示,采用χ2檢驗(yàn),P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
O、A、B型血清中IgM/IgG類抗體效價(jià)對(duì)比:分析O、A、B型血清中IgM/IgG類抗體效價(jià),分別對(duì)正常O型人IgM/IgG類抗A、抗B的效價(jià)與A、B型相對(duì)比分析,結(jié)果顯示:正常O型人IgM類中的抗A、抗B的效價(jià)與A、B型正常人無(wú)明顯差異,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);IgG類抗A、抗B的效價(jià)則優(yōu)于A、B型正常人,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表1。
O、A、B型血清中IgM/IgG類抗體效價(jià)比值分析:分析對(duì)O、A、B型血清中IgM/IgG類抗體效價(jià)比值,結(jié)果顯示:正常O型人血清中的IgM類中的抗A、抗B的效價(jià)優(yōu)于IgG類抗A、抗B的效價(jià),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);正常O型人血清中的IgM/IgG類抗A、抗B的效價(jià)比值,優(yōu)于A、B型正常人,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表2。
表1 IgM/IgG類抗體效價(jià)分布情況
在臨床醫(yī)學(xué)的相關(guān)工作中,加強(qiáng)對(duì)不同血型抗體的鑒定和研究具有十分重要的意義,尤其是在臨床醫(yī)學(xué)的輸血工作中,必須要明確不同血型的抗體。結(jié)合以往研究的結(jié)果,發(fā)現(xiàn)O型正常人血清中的IgG類抗A、抗B要遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于IgM抗A、抗B。對(duì)此醫(yī)學(xué)研究者得出:在正常O型人血清中的ABO血型抗體主要以IgM為主。但是在具體的醫(yī)學(xué)血型鑒定工作中,發(fā)現(xiàn)O型人血清中與標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液的凝集程度與非O型人十分相似,因此必須要進(jìn)一步加強(qiáng)對(duì)O型人血清ABO血型的抗體進(jìn)行研究,并明確其主要類別[2-3]。
在本次研究的過(guò)程中,特意選取了青年男性的標(biāo)本,標(biāo)本并無(wú)受血史,也不存在妊娠等情況,沒(méi)有免疫性IgG的可能性。另外,在具體的研究過(guò)程中,由于正常情況下IgG抗體的效價(jià)較低,且當(dāng)對(duì)其進(jìn)行倍比稀釋之后,對(duì)于較高效價(jià)的抗A、抗B體測(cè)定的影響不大,因此在具體的試驗(yàn)測(cè)定過(guò)程中,可以對(duì)其影響忽略不計(jì)[4]。
綜上所述,在正常O型人中,其ABO血型抗體主要為IgM類抗體,但其IgG類在血清中所占的比例以及抗體效價(jià)要明顯高于A型、B型正常人。
表2 O、A、B型血清中IgM/IgG類抗體效價(jià)比值分析