鋸緣閉殼龜指名亞種的人工飼養(yǎng)與繁殖

曹鑫盛， 劉興， 蔡鋒隆， 陳秋陽， 張奇杰， 陳成勛*

(1. 天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)學(xué)院，天津300384； 2. 天津農(nóng)學(xué)院，水產(chǎn)生態(tài)與養(yǎng)殖國家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心，天津300384； 3.天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)科學(xué)系，天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津300384； 4. 廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，南寧530004；5. 天津農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)與動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，天津300384； 6. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，南京210095；7. 天津市隆錦水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司，天津300384)

鋸緣閉殼龜Cuoramouhotii(Gray，1862)，舊稱鋸緣攝龜Pyxideamouhotii(Gray，1862)(Yasukawaetal.，2001；Hondaetal.，2002；Stuart & Parham，2004)，屬雜食性半水棲龜類，主要棲息在潮濕森林地表的淺水區(qū)附近，以各類小型無脊椎動(dòng)物、軟質(zhì)果實(shí)、蘑菇等為食，偶爾進(jìn)食小型動(dòng)物尸體(Fischeretal.，2010)。鋸緣閉殼龜有2個(gè)亞種，即指名亞種C.mouhotiimouhotii(Gray，1862)和奧氏亞種(越南亞種)C.mouhotiiobsti(周婷，李丕鵬，2013)，分布于中國(廣東、廣西、海南、湖南、云南)，印度(阿扎爾邦、阿薩姆邦、梅加拉亞、米佐拉姆)，老撾，緬甸，泰國和越南(van Dijketal.，2012)。由于棲息地不斷縮小、天敵和過度獵捕，野生鋸緣閉殼龜已日漸減少，被列入瀕危野生動(dòng)植物種國際貿(mào)易公約(CITES)附錄Ⅱ(UNEP-WCMC，2017)，世界自然保護(hù)聯(lián)盟(IUCN)瀕危物種紅色名錄瀕危(EN)物種(Asian Turtle Trade Working Group，2000)，中國脊椎動(dòng)物紅色名錄極危(CR)物種(蔣志剛等，2016)。

在龜類資源遭到嚴(yán)重破壞的狀況下，人工養(yǎng)殖可以減輕野生種群的壓力、保存物種資源、避免滅絕的風(fēng)險(xiǎn)，被認(rèn)為是挽救龜類的有效方法之一。鋸緣閉殼龜具有繁殖率低下、繁殖周期長、生長緩慢(Wangetal.，2011)及在實(shí)驗(yàn)中觀察到的雄性個(gè)體間相互攻擊嚴(yán)重(領(lǐng)地意識(shí)強(qiáng))等不利于人工飼養(yǎng)的因素。目前有記錄的人工孵化個(gè)體僅為野生待產(chǎn)種龜在人工暫養(yǎng)時(shí)繁殖并人工孵化而來，并不能認(rèn)為人工繁殖已成功。因此，研究人工飼養(yǎng)和繁殖鋸緣閉殼龜對(duì)該物種種群的保護(hù)有較大意義。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)安排

實(shí)驗(yàn)組自2013年接收治療2只鋸緣閉殼龜指名亞種起，確定其痊愈后，擬定探尋該龜種飼養(yǎng)與繁殖方法。通過對(duì)養(yǎng)殖戶的走訪、交流，查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料，儲(chǔ)備飼養(yǎng)相關(guān)工具、材料，設(shè)計(jì)并建設(shè)實(shí)驗(yàn)場所(2014年場地建設(shè)完畢)。同年從專業(yè)養(yǎng)殖戶劉洪高處引種鋸緣閉殼龜指名亞種親龜3只，經(jīng)過2014—2015年的預(yù)飼養(yǎng)，并改進(jìn)、添加相關(guān)物資，2016—2017年開展正式實(shí)驗(yàn)。

1.2 養(yǎng)殖環(huán)境

實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)位于廣西壯族自治區(qū)桂林市永福縣(109°36′50″～110°14′19″E，24°37′48″～25°36′39″N)，該地區(qū)為亞熱帶季風(fēng)氣候，平均海拔148 m，森林覆蓋率74.8%，年平均降水量2 000 mm以上，年平均氣溫18.8 ℃(永?？h政府公開數(shù)據(jù))。在民房內(nèi)搭建養(yǎng)殖區(qū)(圖1)，選取1.5 m×4 m的室內(nèi)陽臺(tái)，設(shè)長3.5 m、高2 m的通風(fēng)窗(圖1：1)，朝向西南，地面采用糙面瓷磚反鋪以防止鋸緣閉殼龜指名亞種在求偶、交配、攝食等活動(dòng)時(shí)滑倒。養(yǎng)殖區(qū)通風(fēng)良好，日常光照強(qiáng)度可達(dá)10 000 Lx。設(shè)水槽4個(gè)(圖1：2)，水槽長35 cm×寬25 cm×高10 cm，以滿足鋸緣閉殼龜指名亞種飲水及涉水需求。于每年6—8月在養(yǎng)殖區(qū)加入長45 cm×寬40 cm×高10 cm的產(chǎn)卵盆2個(gè)(圖1：3)，底部鉆小孔透水防積，內(nèi)置8 cm厚的消毒腐殖土，供產(chǎn)卵使用。搭設(shè)1 m×1 m及1 m×2 m的2個(gè)木質(zhì)種植架(圖1：4)，架高50 cm，起遮陽等作用。在養(yǎng)殖區(qū)內(nèi)陽光直射區(qū)域及非陽光直射區(qū)域各設(shè)1個(gè)測量點(diǎn)(圖1：5)，于每日02∶00、08∶00、14∶00、20∶00測量溫度和相對(duì)濕度，并每日清潔水槽及養(yǎng)殖區(qū)地面。

圖1 鋸緣閉殼龜指名亞種養(yǎng)殖區(qū)示意圖Fig. 1 The layout for the aquaculture area of Cuora mouhotii mouhotii

1. 通風(fēng)窗， 2. 水槽， 3. 產(chǎn)卵盆， 4. 種植架， 5. 溫濕計(jì)

1. ventilation window， 2. water trough， 3. spawning ground， 4. arbour， 5. hygrothermograph

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1實(shí)驗(yàn)對(duì)象實(shí)驗(yàn)親龜均為人工隔離飼養(yǎng)2年以上非待產(chǎn)鋸緣閉殼龜指名亞種，共5只(3雄2雌)(表1)。長度數(shù)據(jù)用150T型電子數(shù)顯卡尺(Meinaite公司)測量，質(zhì)量數(shù)據(jù)用DT2000型電子天平(美國雙杰公司)稱量。

表1 實(shí)驗(yàn)鋸緣閉殼龜個(gè)體性狀Table 1 Individual character of Cuora mouhotii mouhotii

1.3.2餌料及飼喂方式餌料盡可能符合鋸緣閉殼龜指名亞種的天然食性，借鑒相關(guān)研究(董超等，2016)，根據(jù)野生鋸緣閉殼龜指名亞種胃中尚未消化的食糜確定食物種類。2015年在廣西壯族自治區(qū)東興市調(diào)查鋸緣閉殼龜市場銷售狀況時(shí)，收集到12只已被宰殺的野生個(gè)體。

將龜體腹甲移除后打開膜，翻動(dòng)左肝葉找到其下的胃；掰開龜?shù)南骂M，使用注射器從口腔注入10 mL水，把食道中的食物殘余物沖入胃中；擠壓胃部使食物殘余物下行入腸道，在賁門處和直腸末端將消化道切斷；將消化道轉(zhuǎn)至有水的燒杯中，繼續(xù)用注射器從胃的賁門處充水沖洗消化道，得到食物殘余物；在SMZ-168雙筒實(shí)體解剖鏡下鏡檢，對(duì)照?qǐng)D譜、書籍(彌璽，1964；廣西植物研究所革委會(huì)，1971；范滋德，1997；張秀實(shí)， 吳征鎰，1998；中國科學(xué)院植物研究所，2002；覃海寧，2010；張巍巍，2011，2014；孫超，2014；中國科學(xué)院中國動(dòng)物志委員會(huì)，2016)確定鋸緣閉殼龜指名亞種攝食的種類(表2)。

選擇特制半水龜糧(表3)，參考相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)方法(國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)，1994，2006，2007，2014)測定其營養(yǎng)組成。參考其胃內(nèi)容物，每周添加1次鮮活餌料(新鮮水果、蘑菇及鮮活昆蟲等)進(jìn)行混合投喂(鮮活餌料與龜糧的濕重比為4∶1)，并在活動(dòng)區(qū)掛設(shè)墨魚骨(海螵蛸)，供其補(bǔ)充鈣質(zhì)。養(yǎng)殖親龜每周投喂2次，繁殖期前后(6—8月)增至每周3次，投喂量以所有龜15 min內(nèi)的攝食量而定，并在其攝食后及時(shí)清理，以防止餌料變質(zhì)、腐敗。每次均在06∶00—07∶00定點(diǎn)投喂(龍?jiān)僦业龋?016)。

鋸緣閉殼龜指名亞種通常在4月下旬結(jié)束冬眠，開始正常攝食，4—5月鮮活餌料投喂每周增加至2次，補(bǔ)充親龜營養(yǎng)、恢復(fù)親龜體能，為接下來的交配與繁殖活動(dòng)做準(zhǔn)備。每年6月下旬至8月上旬、10月下旬至次年5月上旬將雄性和雌性親龜分開飼養(yǎng)，雌性可群居而雄性單獨(dú)飼養(yǎng)，既避免雄性之間的相互爭斗造成損傷，亦可避免過度交配對(duì)雌性親龜正?；顒?dòng)的影響。全文以李敏(2014)中的記錄為依據(jù)對(duì)鋸緣閉殼龜指名亞種交配行為及求偶行為進(jìn)行判斷并記錄。

表2 鋸緣閉殼龜指名亞種消化道內(nèi)容物Table 2 Food habits of Cuora mouhotii mouhotii after anatomical analysis of digestive tract

注： “+”表示在某只鋸緣閉殼龜指名亞種胃中僅出現(xiàn)1次， “++”表示在1只龜胃中出現(xiàn)2次或在2只龜胃中各出現(xiàn)1次， “+++”表示在龜胃中出現(xiàn)2次及以上

Notes： “+” indicates the species appear only once in one turtle’s stomach， “++” indicates some species appear twice or appear in 2 turtles only once， “+++” indicates some species appear in 2 turtles for twice or more

1.3.3孵化方法正式實(shí)驗(yàn)開始前，親龜曾產(chǎn)出受精卵3枚，龜卵受精與否參考黃斌等(2004)進(jìn)行判別。由于尚未準(zhǔn)備孵化設(shè)備，因此只能在打孔的PVC盒內(nèi)放入含水量5%～10%的消毒細(xì)河沙進(jìn)行孵化(朱新平等，2001)。結(jié)果在孵化45 d內(nèi)，全部胚胎因脫水死亡，原因?yàn)榉趸^程中濕度過低，由于其為實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備階段所產(chǎn)出，缺乏各項(xiàng)有效統(tǒng)計(jì)，故不計(jì)入正式實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

表3 鋸緣閉殼龜指名亞種親龜餌料配方及營養(yǎng)成分Table 3 Feed formula composition and nutrient ingredient for Cuora mouhotii mouhotii

注： 以上原料比例均按常溫下(25 ℃)干制品質(zhì)量進(jìn)行配制

Notes： All the ingredients are prepared according to their mass at room temperature (25 ℃)

總結(jié)前期失敗的教訓(xùn)，根據(jù)鋸緣閉殼龜龜卵受精率、孵化率(4.35%；Wangetal.，2011)均極其低下的特點(diǎn)，參考同屬于半水棲的美洲箱龜Terrapenecarolinacarolina的孵化經(jīng)驗(yàn)(de Vosjoli & Klingenberg，2003)進(jìn)行孵化。

自然孵化組：2016年的正式實(shí)驗(yàn)共收獲3枚受精卵，編號(hào)為A、B、C，均采用粒徑3～6 mm的蛭石孵化(郭撿紅等，2009)，在蛭石內(nèi)放置DS1923型紐扣式自動(dòng)溫濕度記錄儀(Maxim公司)測定孵化時(shí)的溫濕度，每6 h記錄1次，自然常溫孵化。

恒溫孵化組：2017年收獲的4枚受精卵，編號(hào)為D、E、F、G，在2016年的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上添加了JCM-33A-A/M BK型溫控器(日本神港SHINKO公司)，使龜卵在28 ℃±0.2 ℃恒溫條件下孵化，且全程空氣相對(duì)濕度均維持在85%±5%(容銀燕等，2014)。

2 結(jié)果

2.1 求偶及交配行為的季節(jié)性變化

實(shí)驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn)，雄性4月下旬便出現(xiàn)食欲減退，焦躁不安，并隨之出現(xiàn)鼻尖發(fā)紅，在水流噴濺刺激下外陰莖會(huì)伸出，此時(shí)雄性遇到雄性常出現(xiàn)相互撕咬爭斗，遇到雌性則會(huì)出現(xiàn)爬背交配的行為。雌性在交配期會(huì)出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)減少，遇刺激甚至未遇刺激的情況下出現(xiàn)泄殖孔擴(kuò)張的行為，并會(huì)配合雄性的求偶行為進(jìn)行交配。產(chǎn)卵期在每年的6—7月，但在走訪中也有養(yǎng)殖戶觀察到野生待產(chǎn)親龜9—10月繁殖的現(xiàn)象。

2.2 溫度和天氣對(duì)交配行為的影響

實(shí)驗(yàn)表明，5—6月為交配高峰期(表4)，交配次數(shù)占全年交配次數(shù)的35.16%，并出現(xiàn)雄性瘋狂追逐雌性，以及雄性之間激烈爭斗的現(xiàn)象，此時(shí)間內(nèi)的日平均溫度為23.2～25.3 ℃(圖2)，但在8—10月也均觀察到種龜出現(xiàn)較頻繁的交配行為(表4)。在天氣晴朗且溫度較高(日平均溫度30 ℃以上)的條件下，表現(xiàn)較為怠惰，活動(dòng)欲望較低，僅在黃昏發(fā)現(xiàn)有交配行為。而在降雨且溫度較低(日平均溫度25～30 ℃)的條件下，龜較為興奮，在正午亦發(fā)現(xiàn)有交配行為，配合人為的灑水刺激，交配行為更為頻繁。

表4 鋸緣閉殼龜指名亞種交配及雄性爭斗行為Table 4 Mating behaviors and male fight behaviors of Cuora mouhotii mouhotii

圖2 鋸緣閉殼龜指名亞種養(yǎng)殖區(qū)日平均溫度
Fig. 2 Mean daily temperature of the aquaculture area ofCuoramouhotiimouhotii

2.3 繁殖習(xí)性及體質(zhì)量變化

實(shí)驗(yàn)記錄表明，雌龜2次產(chǎn)卵之間的積溫為188 397～189 710 ℃·h。將2016年和2017年各月的親龜體質(zhì)量進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)雌龜在每年5—6月體質(zhì)量明顯上升，而在每年6—7月產(chǎn)卵行為出現(xiàn)時(shí)，體質(zhì)量明顯降低(表5)。

在實(shí)驗(yàn)過程中，雌龜產(chǎn)卵前15～30 d攝食量明顯增大，產(chǎn)卵前5～10 d食欲廢絕，產(chǎn)卵后1～3 d重新開始攝食。

因缺乏與鋸緣閉殼龜指名亞種人工繁殖有關(guān)的各項(xiàng)指標(biāo)，對(duì)于其繁殖生態(tài)學(xué)的統(tǒng)計(jì)尤為困難。對(duì)多名養(yǎng)殖戶進(jìn)行走訪了解后，統(tǒng)計(jì)得到鋸緣閉殼龜指名亞種人工飼養(yǎng)性成熟年限未知(缺乏人工繁殖個(gè)體)，記錄得到的生物學(xué)最小體型為443 g。

表5 2016—2017年鋸緣閉殼龜指名亞種非冬眠期體質(zhì)量Table 5 The mass of Cuora mouhotii mouhotii in the non-hibernating during 2016-2017

注： 年平均增長率=(冬眠前體質(zhì)量-冬眠后體質(zhì)量)/冬眠后體質(zhì)量×100%

Notes： Annual growth rate=(pre-hibernation mass-post-hibernation mass)/post-hibernation mass×100%

2.4 卵形態(tài)及孵化

正式實(shí)驗(yàn)共收獲龜卵12枚，其中受精卵7枚，受精率58.33%(表6)，硬殼卵，長徑37.34～44.13 mm，短徑22.21～24.15 mm，卵質(zhì)量14.63～15.10 g，殼厚度4.24～5.21 mm，龜卵及稚龜外觀形態(tài)等見圖3。

表6 正式實(shí)驗(yàn)獲得的鋸緣閉殼龜指名亞種龜卵與孵化Table 6 The eggs and incubation of Cuora mouhotii mouhotii in formal experiment

圖3 鋸緣閉殼龜指名亞種卵及稚龜形態(tài)特點(diǎn)(曹鑫盛 攝)
Fig. 3 The morphological characteristics ofCuoramouhotiimouhotii’s eggs and juvenile turtle (photo by CAO Xinsheng)

a、b. 龜卵， c、d. 破殼中的稚龜， e. 1日齡稚龜， f. 交配姿勢(shì)， g. 產(chǎn)卵行為

a， b. egg， c， d. hatchling， e. one-day old， f. copulation posture， g. laying eggs

自然孵化組：2016年的孵化溫濕度見圖4、圖5，共收獲3枚受精卵。孵化至64 d，其中1枚龜卵正上方出現(xiàn)1條長12 mm的裂紋，并伴有少量血液滲出。根據(jù)相關(guān)研究結(jié)果(趙偉華等，2009a；郭撿紅等，2010)進(jìn)行分析，原因?yàn)樵谂咛グl(fā)育過程中，濕度過高，胚胎增大但卵白體積未減小，導(dǎo)致卵殼破裂。發(fā)現(xiàn)該現(xiàn)象后立刻使用聚維酮碘對(duì)裂口進(jìn)行消毒，后用紅霉素軟膏封住裂口，并將孵化箱濕度緩慢下降，最終該龜卵成功孵化。2016年共孵化稚龜2只(1只右側(cè)肋盾畸形)，孵化率66.67%，孵化天數(shù)分別為92 d、102 d，孵化積溫62 724 ℃·h、68 052 ℃·h(表7)。

恒溫孵化組：由于在2016年孵化過程中出現(xiàn)了龜卵開裂的現(xiàn)象，因此，2017年參考其遠(yuǎn)源種中華條頸龜Ocadiasinensis的孵化方法(中華條頸龜與鋸緣閉殼龜野外分布有所重疊)(容銀燕等，2014)，成功孵化出3只，孵化率75.00%，孵化時(shí)間86～96 d，孵化積溫57 792～64 512 ℃·h(表7)。

圖4 自然孵化組孵化箱內(nèi)日平均溫度Fig. 4 Mean daily temperature of incubator for the natural incubation group

圖5 自然孵化組孵化箱內(nèi)日平均濕度Fig.5 Mean daily humidity of incubator for the natural incubation group

受精卵孵化參數(shù)自然孵化組恒溫孵化組ABCDEFG平均值變異系數(shù)/%孵化時(shí)間/d—92102—968986939.50孵化積溫/(℃·h)—62 72468 052—64 51259 80857 79262 4965.74受精卵質(zhì)量/g14.7514.7714.6314.7014.9015.0015.1014.841.121日齡稚龜體質(zhì)量/g—7.907.50—8.108.908.708.226.271日齡稚龜體質(zhì)量與受精卵質(zhì)量比/%—53.4951.26—54.3659.3357.6255.215.25

1日齡稚龜體質(zhì)量為7.50～8.90 g，受精卵質(zhì)量與1日齡稚龜體質(zhì)量之間的關(guān)系見表7。1日齡稚龜背甲長度46.9～49.2 cm，背甲寬度34.9～36.6 cm。

3 討論

3.1 餌料選擇

人工飼養(yǎng)鋸緣閉殼龜指名亞種的食物包括各種肉類、蠕蟲、昆蟲、水果等(周婷，李丕鵬，2013)。而分布于越南的野生鋸緣閉殼龜指名亞種的主要食物為蝸牛和一些真菌類的子實(shí)體，并會(huì)在8—9月攝食成熟掉落的嶺南酸棗Allospondiaslakonensis(Fischeretal.，2010)。該研究點(diǎn)雖與本實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)氣候存在差異，不可能完全模擬，但可以參考圖2溫度變化數(shù)據(jù)，對(duì)鋸緣閉殼龜指名亞種的餌料和喂食節(jié)律或可根據(jù)實(shí)際氣候狀況和溫度變化進(jìn)行調(diào)整。

從表2及崇左地區(qū)山區(qū)居民的描述了解到，鋸緣閉殼龜指名亞種在野外可能會(huì)掘食植物根莖和進(jìn)食小型哺乳動(dòng)物的尸體，但是目前缺乏對(duì)其攝食特性的持續(xù)性研究。因此，鋸緣閉殼龜指名亞種的具體食物種類及食物選擇是否存在地區(qū)性、季節(jié)性差異，尚有待進(jìn)一步的研究探索。

3.2 龜卵大小與稚龜質(zhì)量

本實(shí)驗(yàn)記錄鋸緣閉殼龜指名亞種卵質(zhì)量為14.63～15.10 g，與原記錄的龜卵質(zhì)量(15～18 g)(周婷，李丕鵬，2013)基本相符。對(duì)朱新平等(2003)的研究進(jìn)行分析，這種差異與鋸緣閉殼龜指名亞種親龜?shù)漠a(chǎn)地種群及體型有關(guān)(趙偉華等，2009b)。其他影響因素可能還包括溫度、光照、餌料及母體營養(yǎng)狀況等(何松，2016)。

不同孵化方法孵出的1日齡稚龜體質(zhì)量間變異系數(shù)僅為6.27%，較低的離散程度表明孵化方法對(duì)稚龜體質(zhì)量影響較小。但由于數(shù)據(jù)過少，無法進(jìn)行更多的分析，有待進(jìn)一步的研究。

3.3 龜卵孵化

根據(jù)對(duì)Wang等(2011)研究結(jié)果的分析，本次實(shí)驗(yàn)將鋸緣閉殼龜指名亞種卵放置于泡沫保溫箱內(nèi)進(jìn)行孵化，泡沫箱可避免溫度與濕度出現(xiàn)劇烈變化，這與野生個(gè)體選擇在落葉堆或沙土地等掘穴產(chǎn)卵的作用一致。

2016年選擇自然孵化，孵化期龜卵出現(xiàn)的破裂及該卵孵出幼龜右側(cè)肋盾畸形，或與孵化期內(nèi)過高的溫度、濕度存在直接聯(lián)系(郭撿紅等，2010)，因此，2017年以28 ℃±0.2 ℃進(jìn)行恒溫孵化。恒溫孵化時(shí)間較自然孵化短，2種孵化方式的孵化積溫變異系數(shù)為5.74%，孵化積溫為57 792～68 052 ℃·h，相對(duì)可信。通過走訪凌維鑫等養(yǎng)殖戶，其在南寧市曾用蛭石常溫孵化過24枚鋸緣閉殼龜指名亞種受精卵，孵化時(shí)間89～101 d，平均孵化率57.71%，與本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)基本相符。本實(shí)驗(yàn)與調(diào)查其他養(yǎng)殖戶記錄鋸緣閉殼龜指名亞種卵的孵化時(shí)間均長于周婷和李丕鵬(2013)60～75 d的記錄。

2016年實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)卵殼開裂龜卵的孵化時(shí)間比另一枚長10 d，分析與卵殼開裂造成的創(chuàng)傷有關(guān)，后續(xù)實(shí)驗(yàn)龜卵的孵化過程中適當(dāng)降低孵化濕度可避免卵殼破裂的問題。不排除鋸緣閉殼龜指名亞種卵的孵化時(shí)間明顯受到濕度(Wynekenetal.，2007)和孵化基質(zhì)pH值影響(傅麗容等，2013；李燕華等，2014)的可能性，但這些變量的影響程度尚待進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)證明。

4 小結(jié)

本實(shí)驗(yàn)完整記錄了鋸緣閉殼龜指名亞種的人工飼養(yǎng)方法及交配、繁殖等生物學(xué)習(xí)性，并于全人工條件下連續(xù)2年成功繁殖、孵化出子一代個(gè)體，尚屬國內(nèi)首例。隨著對(duì)鋸緣閉殼龜研究的開展，本實(shí)驗(yàn)將對(duì)鋸緣閉殼龜?shù)娜斯し敝澈鸵巴夥N源保護(hù)提供有價(jià)值的參考，也為將來的規(guī)?；B(yǎng)殖提供理論依據(jù)。

致謝：天津農(nóng)學(xué)院祖國浩老師及本科生唐一然對(duì)鋸緣閉殼龜指名亞種胃內(nèi)容物辨認(rèn)的幫助；校外人員盧沛侖、劉宏寶、張海、韋川源、羅升略等給予本研究在實(shí)驗(yàn)場地建設(shè)、繪圖及數(shù)據(jù)測量、統(tǒng)計(jì)方面的幫助；養(yǎng)殖者劉洪高、凌維鑫、潘建洲等提供引種資源及養(yǎng)殖數(shù)據(jù)，在此一并致以誠摯的謝意。