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    谷類秸稈接種瘤胃液的厭氧消化性能和三維熒光光譜特征

    2018-11-28 08:50:24蘇良湖陳玉東張龍江
    關(guān)鍵詞:谷類丙酸高粱

    蘇良湖,陳 梅,孫 旭,陳玉東,張龍江

    (環(huán)境保護(hù)部南京環(huán)境科學(xué)研究所,江蘇 南京 210042)

    全球氣候變化和能源安全等原因,近年來促使可再生能源(尤其是生物質(zhì)能)迅速發(fā)展[1]。在眾多生物質(zhì)種類中,規(guī)模龐大的木質(zhì)纖維素材料,特別是作物秸稈,是一個富有吸引力的來源[2]。通過物理化學(xué)方法或生物過程,木質(zhì)纖維素生物質(zhì)可轉(zhuǎn)化為甲烷、乙醇、丁醇、異丁醇、氫或其他能源產(chǎn)品[3]。在我國農(nóng)村地區(qū),作物秸稈的禁燒政策面臨巨大壓力,禁而不止現(xiàn)象突出,也迫切需要尋求潛在的技術(shù)解決方案。厭氧消化被廣泛認(rèn)為是生物質(zhì)能源轉(zhuǎn)化的重要途徑,是一種有前景、發(fā)展中的作物秸稈綜合利用技術(shù)[4]。

    作物秸稈的細(xì)胞壁由纖維素(w為9%~80%)、半纖維素(w為10%~50%)和木質(zhì)素(w為5%~35%)組成[5]。在分子水平上,纖維素(C6H10O5)n是由D-葡萄糖以β(1→4)共價鍵鏈接而成。而纖維素的β(1→4)共價鍵使得多糖幾乎不可以被動物所消化(除反芻動物外)[6]。半纖維素是無定形物質(zhì),由各種糖單元相互連接形成,容易被消化[6]。木質(zhì)素可阻礙微生物(細(xì)菌、真菌等)滲透,是細(xì)胞壁中最難以降解的部分[6]。此外,木質(zhì)素和半纖維素以共價鍵形式結(jié)合,將纖維素分子包埋在其中,形成一種天然屏障,使微生物和酶不易與纖維素分子接觸,更增加了降解難度[7]。

    水解是秸稈等纖維素基質(zhì)厭氧消化的限制步驟。一種有效提升秸稈厭氧消化性能的方法是預(yù)處理,包括增加可接觸表面積、纖維素去結(jié)晶化、去除半纖維素和去除/改變木質(zhì)素[8]。目前已開發(fā)了各種秸稈預(yù)處理技術(shù)[8-10],如物理預(yù)處理(粉碎、蒸汽爆炸、水熱、微波和照射)、化學(xué)預(yù)處理(酸、堿、氨化、氧化和離子液體)和生物預(yù)處理(真菌和酶)等。

    反芻動物瘤胃系統(tǒng)的瘤胃液含有厭氧細(xì)菌、真菌、原生動物和產(chǎn)甲烷菌等[11],可為作物秸稈的高效厭氧消化提供潛在策略。在反芻動物體內(nèi),瘤胃是高負(fù)荷纖維素高效分解的原位微生物生態(tài)系統(tǒng),對頑固的木質(zhì)纖維素生物質(zhì)表現(xiàn)出很高的降解潛能[12],特別是具有更高的水解和酸化效率。由于具有較高的纖維素降解活性,相較于傳統(tǒng)接種物(如厭氧活性污泥),瘤胃微生物可顯著提高木質(zhì)纖維素的降解率。HU等[12]研究顯示,在玉米秸稈液相厭氧消化中,相較于傳統(tǒng)的污水污泥,以瘤胃微生物作接種物可多產(chǎn)生28%的揮發(fā)性脂肪酸(volatile fatty acids,VFAs)。YUE等[3]發(fā)現(xiàn),相對于其他來源的接種物,瘤胃微生物對木質(zhì)纖維素表現(xiàn)出更快的攻擊性。

    筆者以水稻、小麥和高粱等谷類秸稈為研究對象,以奶牛瘤胃液為接種物,研究其厭氧消化產(chǎn)酸和產(chǎn)甲烷規(guī)律,并探討消化液溶解性有機物(DOM)的三維熒光光譜變化特征,以期為谷類秸稈的資源化利用提供技術(shù)支撐。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料與裝置

    水稻、小麥和高粱秸稈采集自江蘇省淮安市某農(nóng)場,經(jīng)晾曬后用破碎機粉碎并過0.42 mm孔徑篩。谷類秸稈的基本性質(zhì)見表1。高粱秸稈揮發(fā)性固體(volatile solid,VS)質(zhì)量含量為93.98%,而水稻秸稈僅為87.30%。秸稈由纖維素、半纖維素和木質(zhì)素組成,采用全自動纖維分析儀(ANKOM 2000i,ANKOM Technology, USA)測定。水稻、小麥和高粱秸稈的纖維素和半纖維素質(zhì)量含量之和分別為64.19%、66.19%和65.58%,小麥秸稈具有更高的木質(zhì)素質(zhì)量含量(9.01%)。瘤胃液取自屠宰場,奶牛屠宰后,迅速取出其瘤胃內(nèi)容物,經(jīng)3層紗布過濾后,快速將過濾后的瘤胃液轉(zhuǎn)運至保溫桶,將保溫桶置于39 ℃恒溫箱(DNP-9052,上海精宏實驗設(shè)備有限公司,中國)中培養(yǎng),瘤胃液pH值為6.87。

    厭氧消化采用全自動甲烷潛力測試系統(tǒng)(BMP-RTK,湖北洛克泰克儀器有限公司,中國)。厭氧消化瓶容積為500 mL,置于恒溫水浴(±0.1 ℃)中,并配有0~160 r·min-1電動攪拌單元、CO2吸收單元(4 mol·L-1NaOH溶液)和氣體測量單元(精度1 mL)。

    表1谷類秸稈的基本性質(zhì)

    Table1Thefundamentalcharacteristicsofcerealstraw

    秸稈種類質(zhì)量含水率/%w/%揮發(fā)性固體纖維素半纖維素木質(zhì)素水稻8.73±0.0087.30±0.2243.7920.407.21小麥10.26±0.0289.13±0.1142.5923.609.01高粱9.21±0.0193.98±0.0543.3822.207.72

    1.2 試驗流程

    谷類秸稈進(jìn)一步粉碎后過0.15 mm孔徑篩,用于厭氧消化試驗。緩沖液成分[13]:NaHCO3,8 g·L-1;CaCl2·2H2O,0.03 g·L-1;KH2PO4,1 g·L-1;K2HPO4,3 g·L-1;MgCl2·6H2O,0.08 g·L-1;NH4Cl,0.18 g·L-1;緩沖液pH值為8.94。厭氧消化的底物(以VS計)質(zhì)量濃度為10 g·L-1,發(fā)酵溫度為39 ℃。每個厭氧消化瓶中瘤胃液接種量為80 mL,緩沖液體積為320 mL,混合液pH值為8.33。為了防止厭氧消化過程發(fā)酵液pH<6.0,在緩沖液中加入過量的CaCO3作為固相緩沖劑。定期采集少量消化液,用于測定pH和產(chǎn)酸性能,以及用于分析三維熒光光譜特征,并實時監(jiān)測厭氧消化過程的產(chǎn)甲烷規(guī)律。

    1.3 分析方法

    三維熒光光譜(three-dimensional excitation emission matrix,3D-EEM)采用三維熒光掃描光譜儀(Aqualog,HORIBA Instruments Inc., USA)分析,配以1 cm×1 cm石英熒光樣品池。熒光掃描光譜儀以氙氣燈為激發(fā)光源,信噪比>20 000∶1。激發(fā)波長(Ex)范圍為211~618 nm,掃描間隔為3 nm。發(fā)射波長(Em)范圍為240~600 nm,采用電制冷CCD檢測器,掃描間隔為3.54 nm。對測得的三維熒光光譜,采用Origin 8.0軟件(Origin Lab Inc., USA)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,包括利用超純水去除拉曼散射,消除一、二級瑞麗散射,并同時測量UV-Vis吸光光譜校正內(nèi)濾效應(yīng)(inner-filter effect,IFE)。內(nèi)濾效應(yīng)的校正公式為Fideal=Fobs×10(AEx+AEm)/2,其中,F(xiàn)obs和Fideal分別為測量和校正后的熒光強度,以拉曼單位(R. U.)表示;AEx和AEm分別為激發(fā)波長和發(fā)射波長的吸光度。對處理后的三維熒光光譜,采用SOLO+MIA 8.6.1軟件(Eigenvector Research, Inc., USA)進(jìn)行平行因子分析,并通過核一致性診斷和半劈裂分析(split-half analysis)驗證模型。

    VFAs檢測主要針對乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、戊酸和異戊酸。采用島津GC-2014氣相色譜儀(FID,Stabilwax-DA毛細(xì)管色譜柱,30 m×φ0.53 mm×δ0.25 μm)測定。樣品預(yù)處理方法:厭氧消化液先用硫酸稀釋液酸化,再用高速離心機(轉(zhuǎn)速為10 000 r·min-1,相對離心力為10 278)離心10 min,然后取上清液用0.45 μm孔徑親水性濾膜過濾后裝入2 mL樣品瓶。

    pH值測定采用便攜式pH計(LAQN twin, Horiba Scientific, Japan)。VS測定方法:將樣品在105 ℃條件下恒重干燥后,在600 ℃馬弗爐(MXX1200-30,上海微行爐業(yè)有限公司,中國)中灼燒3 h后,計算VS含量。VS含量用于分析秸稈有機物的比例。

    2 結(jié)果分析與討論

    2.1 消化液pH變化規(guī)律

    瘤胃液和緩沖液pH值分別為6.87和8.94,接種量φ為20%,混合后初始pH值為8.33。經(jīng)過5 d厭氧消化后,水稻、小麥和高粱秸稈的消化液pH值分別迅速下降至6.40、6.25和6.05(圖1)。

    圖1 谷類秸稈厭氧消化過程中pH變化規(guī)律

    消化液pH和總揮發(fā)性脂肪酸(total volatile fatty acids,TVFAs)濃度的變化趨勢相反(圖2),這表明pH下降主要是由VFAs產(chǎn)生引起的。因此,pH可直接反映產(chǎn)酸性能,并間接反映瘤胃微生物對秸稈的降解能力。有機酸被不斷消耗以及消化系統(tǒng)中NH4+的存在,使消化液pH值迅速升高(7.8~8.0)。試驗25~30 d時,厭氧消化體系pH再次下降(約為7.5~7.6)。這可能源于部分較難水解酸化的組分(如木質(zhì)素或被包埋的纖維素)進(jìn)一步被瘤胃微生物降解。

    2.2 VFAs的變化規(guī)律

    谷類秸稈厭氧消化過程的VFAs變化規(guī)律見圖2。初始狀態(tài)下,ρ(TVFAs)為840~1 150 mg·L-1,經(jīng)過5 d厭氧消化后,水稻、小麥和高粱秸稈的ρ(TVFAs)急劇增加至5 140、5 340和5 751 mg·L-1。這顯示出瘤胃微生物可將秸稈有效轉(zhuǎn)化為VFAs,其中,高粱秸稈具有更好的產(chǎn)酸性能。高VFAs濃度并不利于后續(xù)的甲烷產(chǎn)生,當(dāng)ρ(VFAs)超過2 000 mg·L-1時纖維素降解就可能被抑制[14]??瞻捉MTVFAs濃度隨厭氧消化的進(jìn)行,15 d時達(dá)到峰值(1 777 mg·L-1),這主要是由于瘤胃中殘余物被瘤胃微生物進(jìn)一步降解導(dǎo)致。隨后,產(chǎn)生的TVFAs被產(chǎn)甲烷菌或其他瘤胃微生物迅速降解,30 d后水稻、小麥和高粱秸稈的ρ(TVFAs)分別為325.7、980.7和235.0 mg·L-1。試驗結(jié)束時,水稻、小麥和高粱秸稈的ρ(TVFAs)分別僅為24.63、26.83和13.88 mg·L-1。

    進(jìn)一步對包括乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、戊酸和異戊酸的VFAs種類進(jìn)行分析。經(jīng)過5 d厭氧消化后,乙酸和丙酸在VFAs中占據(jù)主導(dǎo)作用,水稻、小麥和高粱的ρ(乙酸)分別從621.9、563.0和462.3 mg·L-1上升到2 800、2 868和3 158 mg·L-1,ρ(丙酸)從176.3、131.2和121.3 mg·L-1上升到1 789、1 904和2 081 mg·L-1。異丁酸濃度顯著增加,丁酸、戊酸和異戊酸濃度變化很小。不同秸稈的VFAs濃度變化趨勢相一致,0~5 d時產(chǎn)生大量乙酸和丙酸,乙酸和丙酸濃度分別在5~25 d和20~30 d內(nèi)迅速下降。異丁酸主要在0~5 d內(nèi)產(chǎn)生,而后在15~20 d后被迅速利用。厭氧消化過程的丁酸、戊酸和異戊酸濃度變化規(guī)律類似,在20或30 d內(nèi)小幅波動,而后因上述物質(zhì)被瘤胃微生物降解而致其濃度逐漸降低。

    扣除空白組,水稻、小麥和高粱秸稈(以VS計)在5 d后的TVFAs產(chǎn)率分別達(dá)410.9、430.9和472.0 mg·g-1。筆者研究中VFAs產(chǎn)率顯著高于水稻秸稈(以VS計)傳統(tǒng)厭氧發(fā)酵(接種污泥)的0.13~0.29 g·g-1[15],也明顯高于ZHANG等[14]在水稻秸稈(以VS計)接種瘤胃液時測得的0.36 g·g-1。由此可見,筆者采集的奶牛瘤胃微生物對谷類秸稈具有很好的降解性能。這種產(chǎn)酸性能的差異可能源于秸稈組分、礦物元素、顆粒粒度和瘤胃微生物群落結(jié)構(gòu)的差異。其中,水稻秸稈較低的VFAs產(chǎn)率可能在于其具有更低的纖維素和半纖維素組分含量。瘤胃微生物對谷類秸稈的強水解酸化能力,可為秸稈制備工業(yè)原料(如有機酸)等資源化利用途徑提供潛在方案。

    圖2 谷類秸稈厭氧消化過程的總揮發(fā)性脂肪酸(TVFAs)和不同揮發(fā)性脂肪酸(VFAs)種類變化規(guī)律

    經(jīng)過5 d厭氧消化后,不同秸稈TVFAs(扣除空白組)的各組分比例見圖3。

    圖3 谷類秸稈厭氧消化5 d后總揮發(fā)性脂肪酸(TVFAs)的組分分布

    谷類秸稈被瘤胃微生物降解后產(chǎn)生的有機酸質(zhì)量含量由大到小依次為乙酸(53.1%~54.6%)、丙酸(40.5%~41.4%)和異丁酸(3.3%~4.2%),而丁酸(<1.0%)、戊酸(<1.0%)和異戊酸(<0.5%)所占比例很低。在瘤胃系統(tǒng)中,VFA是反芻動物賴以生存、保持正常代謝和繁殖的主要能量來源,可提供反芻動物70%~80%的總能量,乙酸、丙酸和丁酸質(zhì)量含量占比可達(dá)95%[16]。雖然筆者研究屬于體外發(fā)酵,環(huán)境條件與反芻動物的瘤胃系統(tǒng)存在差異,但乙酸、丙酸和丁酸質(zhì)量含量與自然瘤胃系統(tǒng)(95.1%~96.5%)一致。而丙酸較難被微生物利用,這是因為利用丙酸的微生物一般具有更慢的生長速度[17]。WANG等[18]發(fā)現(xiàn),當(dāng)ρ(丙酸)高于900 mg·L-1時將會對產(chǎn)甲烷菌和產(chǎn)酸菌的活性造成不利影響。筆者研究中,厭氧消化初期的ρ(丙酸)高達(dá)1 000 ~2 000 mg·L-1,這將嚴(yán)重影響產(chǎn)甲烷菌的正常代謝,與甲烷產(chǎn)量監(jiān)測結(jié)果(圖4)相一致。

    2.3 產(chǎn)甲烷規(guī)律

    各類秸稈(以VS計)厭氧消化過程的甲烷累積產(chǎn)量見圖4。水稻、小麥和高粱秸稈的甲烷產(chǎn)量分別為130.3、167.8和140.9 mL·g-1??鄢瞻捉M,水稻、小麥和高粱的凈甲烷產(chǎn)量分別為66.29、103.79和76.89 mL·g-1。水稻秸稈具有更低的甲烷產(chǎn)量,這可能源于更低的TVFAs產(chǎn)率。不同秸稈的甲烷產(chǎn)量差異與纖維物質(zhì)含量、可發(fā)酵的碳水化合物類型和沼氣的二氧化碳含量等密切相關(guān)。進(jìn)一步參考LI等[19]的方法,采用改進(jìn)型Gompertz模型擬合監(jiān)測到的甲烷產(chǎn)量,如式(1)所示:

    (1)

    式(1)中,B(t)為某時刻谷類秸稈(以VS計)厭氧消化過程的累積甲烷產(chǎn)量,mL·g-1;A0為溶解性有機物甲烷累積產(chǎn)量,B0為非溶解性有機物甲烷累積產(chǎn)量,A0和B0之和為總累積甲烷產(chǎn)量,mL·g-1;μm為最大甲烷產(chǎn)率,mL·g-1·d-1;λ為遲緩期,d;e為2.72;t為厭氧消化時間,d。

    結(jié)果顯示,改進(jìn)型Gompertz模型可較好地描述甲烷的產(chǎn)生規(guī)律(表2),R2為0.989~0.995。

    秸稈粉末(粒徑<0.15 mm)的可溶解性有機物(如溶解性糖等),可迅速被產(chǎn)甲烷菌利用而消耗,在短時間(2 d)內(nèi)快速產(chǎn)生大量甲烷,該數(shù)值可用A0表示。不同谷類秸稈(以VS計)的A0值相近,為35.36~42.14 mL·g-1。根據(jù)改進(jìn)型Gompertz模型

    的擬合結(jié)果,水稻和高粱的遲緩期λ分別為11.64和11.07 d,而小麥秸稈的λ為15.30 d。小麥秸稈具有更長的遲緩期,這與其更低的乙酸降解速率相一致,可能受高濃度丙酸抑制所致。25 d時,水稻、高粱和小麥ρ(丙酸)分別為121.87、369.24和1 353.2 mg·L-1。水稻、小麥和高粱秸稈的最大甲烷產(chǎn)率μm分別為1.66、2.48和1.79 mL·g-1·d-1。由于小麥秸稈具有更長的遲緩期和更高的甲烷產(chǎn)量,使得其最大甲烷產(chǎn)率μm高于水稻和高粱秸稈。

    底物質(zhì)量以VS計。

    表2谷類秸稈厭氧消化的產(chǎn)甲烷動力學(xué)參數(shù)

    Table2Kineticsparametersofmethaneproductionforanaerobicdigestionofcerealstraw

    秸稈種類A0/(mL·g-1)B0/(mL·g-1)λ/dμm/(mL·g-1·d-1)R2Adj R2水稻35.36±1.4192.78±2.1611.64±0.671.660.9890.988小麥42.14±1.00118.44±1.5515.30±0.362.480.9950.995高粱34.86±1.26103.64±1.7911.07±0.491.790.9930.993

    A0為溶解性有機物甲烷累積產(chǎn)量,B0為非溶解性有機物甲烷累積產(chǎn)量,A0和B0之和為總累積甲烷產(chǎn)量;λ為遲緩期;μm為最大甲烷產(chǎn)率;e為2.72。R2為模型擬合的決定系數(shù),AdjR2為模型擬合的調(diào)整決定系數(shù)。

    水稻、小麥和高粱秸稈產(chǎn)甲烷量低的外在原因包括2個方面。一方面,相當(dāng)部分的碳源被轉(zhuǎn)化為二氧化碳而非甲烷。如水稻、小麥和高粱秸稈在試驗5~10 d時的甲烷產(chǎn)量分別僅為4.74、1.56和0.54 mL,而在該過程TVFAs濃度分別降低22%、7%和10%,在55 d厭氧消化期間絕大部分TVFAs均被消耗。另一方面,在厭氧消化系統(tǒng)中,過高的丙酸含量(1 000~2 000 mg·L-1)和VFAs累積抑制了產(chǎn)甲烷菌的活性。內(nèi)在原因在于以VFAs轉(zhuǎn)化為主要功能的自然瘤胃系統(tǒng)不同于以產(chǎn)甲烷為目的的厭氧消化器。因此,在模擬動物消化機制時,構(gòu)建可高效降解秸稈并提升厭氧消化性能的人工瘤胃反應(yīng)器,尤為重要。

    MENG等[20]和B?SKE等[21]提出的上流式厭氧固相(UASS)-厭氧過濾(AF)系統(tǒng),具有用于構(gòu)建作物秸稈厭氧消化人工瘤胃反應(yīng)器的重要潛力。該系統(tǒng)包括一個上流式的固相厭氧反應(yīng)器(UASS),并耦合一個厭氧過濾器(AF),通過厭氧過濾器的消化液循環(huán),避免VFAs積累[22]。在自然瘤胃的高負(fù)荷系統(tǒng)中,瘤胃系統(tǒng)降解的產(chǎn)物通過隔膜被吸收,不會形成產(chǎn)物的累積及抑制,而UASS-AF系統(tǒng)可仿生該行為。仍需進(jìn)一步探討人工瘤胃反應(yīng)器條件下的谷類秸稈厭氧消化產(chǎn)甲烷性能。

    2.4 溶解性有機物的熒光光譜-平行因子分析(fluorescence excitation emission matrices-parallel factor analysis,EEM-PARAFAC)

    筆者利用PARAFAC方法處理采集的40個厭氧消化液樣品,包括水稻、小麥和高粱秸稈的30個樣品和空白組的10個樣品。構(gòu)建的PARAFAC模型穩(wěn)健,半劈裂分析顯示與整體模型相似度為98.5%,共識別出3個有效組分(圖5)。其中,組分A1為酪氨酸類物質(zhì),屬于溶解性微生物副產(chǎn)物類物質(zhì),激發(fā)波長為275 nm,發(fā)射波長為300 nm,代表氨基酸或者游離態(tài)蛋白質(zhì)[23]。組分A2為色氨酸類物質(zhì),激發(fā)波長為280 nm,發(fā)射波長為340 nm,屬于蛋白類物質(zhì)。組分A3為低分子量紫外線A波段(ultraviolet A,UVA)腐殖酸類物質(zhì)[23],激發(fā)波長為245 nm,發(fā)射波長為430 nm,常見于廢水、農(nóng)田和濕地等環(huán)境[23]。

    圖5 PARAFAC解析出3種組分的代表性熒光光譜(A1、A2和A3)及對應(yīng)的熒光光譜負(fù)載(B1、B2和B3)

    厭氧消化過程的3個組分熒光強度變化規(guī)律如圖6所示。對于組分A1酪氨酸類物質(zhì),其熒光強度在0~5 d時隨著秸稈的水解酸化迅速上升,而后呈逐漸下降趨勢,但過程存在波動。組分A2色氨酸類物質(zhì),其熒光強度的變化規(guī)律與組分A1類似,整體上呈現(xiàn)先上升后下降趨勢。同時,發(fā)現(xiàn)色氨酸類物質(zhì)熒光強度和TVFAs濃度可用冪函數(shù)擬合,AdjR2為0.813 9(圖7)。這表明色氨酸類物質(zhì)與谷類秸稈的水解酸化(特別是VFAs的產(chǎn)生和降解)密切相關(guān)。對于組分A3腐殖酸類物質(zhì),在0~30 d時整體上呈現(xiàn)波動下降趨勢,而后進(jìn)一步上升,趨于穩(wěn)定??瞻捉M酪氨酸類、色氨酸類和腐殖酸類物質(zhì)在厭氧消化過程均處于逐漸降低趨勢。

    不同秸稈厭氧消化過程的腐殖化指數(shù)(HIX)如圖6所示。HIX可用于評價消化液DOM的芳烴結(jié)構(gòu)聚合程度或者不飽和脂肪族鏈的共軛程度[24],可表示消化液的腐熟程度[25]。筆者研究中,測得的HIX均小于4,這表明DOM均來源于原生或微生物降解[26]??瞻捉MHIX在0~30 d時隨時間變化由0.70逐漸上升至1.20,30~35 d時大幅上升至2.09,而后趨于穩(wěn)定。在30~35 d時空白組消化液迅速腐殖化,而該階段消化液VFAs濃度很低,這可能是由于DOM的非有機酸組分被迅速轉(zhuǎn)化為芳烴結(jié)構(gòu)聚合度更高的物質(zhì)。水稻、小麥和高粱秸稈在厭氧消化初期HIX下降,這歸因于秸稈被高效水解酸化為VFAs,而后隨著VFAs的逐漸降解,HIX整體上呈現(xiàn)逐漸上升趨勢。不同谷類秸稈HIX變化趨勢相一致。高粱秸稈在30~35 d時以及水稻秸稈在45~55 d時,HIX的下降可能是由于少量木質(zhì)素或包埋纖維素被瘤胃微生物分解所致。

    圖6 谷類秸稈厭氧消化過程的3個組分熒光強度和腐殖化指數(shù)(HIX)的變化規(guī)律

    圖7 色氨酸類物質(zhì)熒光強度和總揮發(fā)性脂肪酸(TVFAs)濃度的關(guān)系

    總體上,消化液的腐殖化進(jìn)程與VFAs的產(chǎn)生和降解利用密切相關(guān),HIX和TVFAs濃度的關(guān)系可用冪函數(shù)擬合(圖8),AdjR2為0.802 1。這顯示在一定程度上可采用腐殖化指數(shù)來監(jiān)控谷類秸稈的厭氧消化進(jìn)程以及VFAs降解規(guī)律。

    3 結(jié)論

    (1)奶牛瘤胃微生物對谷類秸稈具有很強的水解酸化能力。經(jīng)過5 d厭氧消化后,水稻、小麥和高粱秸稈(以VS計)的總揮發(fā)性脂肪酸產(chǎn)率分別達(dá)410.9、430.9和472.0 mg·g-1。谷類秸稈的產(chǎn)甲烷規(guī)律符合改進(jìn)型Gompertz模型。經(jīng)過55 d厭氧消化,水稻、小麥和高粱秸稈(以VS計)的甲烷產(chǎn)量分別為66.29、103.79和76.89 mL·g-1。

    圖8 腐殖化指數(shù)和TVFAs濃度的關(guān)系

    (2)通過三維熒光光譜耦合平行因子分析(PARAFAC)識別溶解性有機物的3個有效熒光組分,這3個組分分別為酪氨酸類、色氨酸類和低分子量腐殖酸類物質(zhì)。其中,色氨酸類物質(zhì)的熒光強度與TVFAs濃度呈冪函數(shù)關(guān)系。經(jīng)過5 d厭氧消化后谷類秸稈溶解性有機物的腐殖化指數(shù)(HIX)降低,而后呈現(xiàn)逐漸上升趨勢。

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