精液與附睪結(jié)節(jié)穿刺標(biāo)本結(jié)核桿菌DNA檢測在附睪結(jié)核診斷中的價(jià)值

左建強(qiáng),包建成,王惠泉,楊躍軍,郭子臣,徐偉民,馮長梅

1.包頭醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院泌尿外科,包頭 014030; 2.包頭醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科,包頭 014030

附睪結(jié)核也被稱為結(jié)核性附睪炎,為男性生殖系統(tǒng)結(jié)核中最常見疾病。晚期附睪結(jié)核的診斷一般相對(duì)容易,常伴有典型的附睪硬結(jié)、皮膚粘連、竇道及串珠樣輸精管病變。但早期和急性發(fā)作的附睪結(jié)核非常容易誤診。早期附睪結(jié)核在臨床應(yīng)主要與慢性附睪炎、淋菌性附睪炎、陰囊絲蟲病相鑒別,然而臨床工作中鑒別診斷常存在一定難度,導(dǎo)致大量患者治療延誤。包頭醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院泌尿外科自2010年1月—2018年2月對(duì)就診的42例附睪結(jié)節(jié)患者,采取精液和附睪穿刺標(biāo)本分別進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)熒光定量方法檢測結(jié)核桿菌DNA(TB-DNA),探討其對(duì)于提高附睪結(jié)核診斷率的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析包頭醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院泌尿外科2010年1月—2018年2月診治的42例附睪結(jié)節(jié)患者(單側(cè)53例,雙側(cè)3例),年齡18～65歲,平均(32±8.79)歲。陰囊皮膚與附睪結(jié)節(jié)粘連者11例,輸精管呈現(xiàn)串珠樣改變3例,同時(shí)查出肺結(jié)核7例。合并腎結(jié)核2例,32例患者臨床表現(xiàn)為無痛性非特異性結(jié)節(jié);其中16例患者有附睪隱痛或陰囊墜脹不適感。

1.2 測定方法

1.2.1 精液標(biāo)本獲取

42例患者精液提取方法:患者5～7 d禁止同房,使用一次性無菌尿杯,通過手淫的方式將精液標(biāo)本留取于容器內(nèi),嚴(yán)禁使用避孕套內(nèi)精液,留取后立即(<15 min)送檢。獲取的精液一部分行結(jié)核桿菌DNA檢測,另一部分涂片查抗酸桿菌。

1.2.2 附睪穿刺標(biāo)本獲取

42例患者附睪結(jié)節(jié)穿刺方法嚴(yán)格執(zhí)行外科無菌穿刺術(shù),采用針吸細(xì)胞學(xué)檢查,穿刺標(biāo)本立即送實(shí)驗(yàn)室,一部分行結(jié)核桿菌DNA檢測,另一部分涂片查抗酸桿菌。陰囊穿刺部位消毒包扎按壓10 min。

1.2.3 結(jié)核桿菌DNA檢測

采用中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司出品的結(jié)核分枝桿菌核酸檢測試劑盒(熒光法)。嚴(yán)格按說明書操作,提取樣本后在實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀DA7600上進(jìn)行擴(kuò)增,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)在相應(yīng)軟件上分析,同時(shí)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的檢測,保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可靠。

1.2.4 涂片檢測

精液標(biāo)本與穿刺標(biāo)本均勻涂片,行結(jié)核桿菌抗酸染色。采用珠海貝索結(jié)核菌染色液,產(chǎn)品批號(hào)416032,嚴(yán)格按說明書操作,顯微鏡下可見紅色分枝桿菌為陽性涂片。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 15.0軟件。兩組標(biāo)本間陽性率比較采用t檢驗(yàn),以a=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

2 結(jié)果

精液標(biāo)本行PCR熒光定量檢測,結(jié)核桿菌DNA陽性率為28.57%(12例)。附睪標(biāo)本行PCR熒光定量檢測,結(jié)核桿菌DNA陽性率為42.86%(18例),兩組比較差異顯著(t=6.482,<0.001);精液標(biāo)本涂片TB鏡檢陽性率為7.14%(3例),附睪穿刺標(biāo)本涂片TB鏡檢陽性率為11.90%(5例),兩組比較無差異(t=-2.684,P>0.05)。附睪穿刺組織查TB見圖1、精液涂片查TB見圖2。

圖1 附睪組織涂片(HE×100)Fig.1 Epididymal smear(HE×100)

圖2 精液涂片(HE×400)

3 討論

在臨床工作中,最常見的男性生殖系統(tǒng)結(jié)核是附睪結(jié)核,也有人將附睪結(jié)核歸為泌尿系結(jié)核的一部分。附睪結(jié)核常伴有前列腺結(jié)核、精囊結(jié)核、腎結(jié)核或者肺結(jié)核。附睪結(jié)核患者主要通過血行感染途徑患病[1-2]。結(jié)核菌也可以由腎、輸尿管、膀胱、尿道,播散到前列腺、精囊,最后逆行感染到附睪,病變常出現(xiàn)在附睪尾部。附睪結(jié)核在臨床中導(dǎo)致的后遺癥不容忽視,主要是導(dǎo)致附睪組織內(nèi)附睪管和附睪外近段輸精管的不全或完全梗阻,進(jìn)而出現(xiàn)少精或無精,最后導(dǎo)致精液質(zhì)量下降,引起男性不育,嚴(yán)重病例可以導(dǎo)致整個(gè)附睪的干酪樣壞死[3]。所以附睪結(jié)核的診斷顯得尤為重要,對(duì)于一些輸精管串珠樣改變,或者合并附睪化膿感染、竇道形成等特異性表現(xiàn)者,診斷并不困難,但對(duì)于一些懷疑附睪結(jié)核,并伴有非特異性附睪結(jié)節(jié)患者,早期診斷在治療中顯得具有非常重要的價(jià)值[4-5]。診斷附睪結(jié)核的時(shí)候,如果有比較典型的臨床特征,如附睪硬結(jié)、皮膚形成粘連、有竇道形成、發(fā)現(xiàn)串珠樣的輸精管病變特征,診斷完全可以確定。但早期和急性發(fā)作的附睪結(jié)核比較容易誤診。早期的附睪結(jié)核在臨床上應(yīng)與慢性附睪炎進(jìn)行鑒別,慢性附睪炎疼痛一般相對(duì)比較明顯,病史中常常有急性發(fā)作及反復(fù)發(fā)作史,慢性附睪炎的附睪腫塊一般沒有附睪結(jié)核的附睪腫物硬、也沒有附睪結(jié)核的腫物大,在臨床上很少形成局限性硬結(jié),一般不會(huì)形成如結(jié)核特有的竇道,亦不會(huì)發(fā)生皮膚粘連,輸精管的串珠樣改變?cè)诟讲G炎中一般也不會(huì)出現(xiàn)[6]。在臨床上,淋菌性附睪炎患者,絕大多數(shù)既往有淋球菌的感染病史,臨床發(fā)病比較急,在尿道分泌物中可查到細(xì)胞內(nèi)革蘭陰性雙球菌,多聚酶鏈反應(yīng)可查到尿道分泌物中淋球菌特有的氨基酸序列[7]。目前對(duì)于泌尿系結(jié)核的實(shí)驗(yàn)室診斷可以通過尿檢查結(jié)核桿菌、尿液結(jié)核桿菌PCR檢測等,檢查手段比較多,但對(duì)于附睪結(jié)核,臨床中尚無定型的實(shí)驗(yàn)室檢查手段[8]。在泌尿系統(tǒng)結(jié)核診斷中,涂片檢查并無特異性,抗酸染色結(jié)果并不可靠,尿結(jié)核菌DNA檢測對(duì)結(jié)核菌具有較高的特異性及敏感性,但存在敏感性較低,特異性不高等特點(diǎn),容易出現(xiàn)假陽性或者假陰性[9-10]。

本研究結(jié)果顯示,結(jié)核桿菌DNA檢測精液標(biāo)本陽性率28.57%、附睪穿刺標(biāo)本陽性率42.86%,兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。精液標(biāo)本與附睪穿刺標(biāo)本結(jié)核桿菌涂片檢測陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)意義。

綜上所述,在臨床診療工作中,對(duì)可疑附睪結(jié)核的附睪結(jié)節(jié)患者行精液和附睪穿刺標(biāo)本結(jié)核桿菌DNA檢測,對(duì)于提高早期診斷率具有重要意義;為避免延誤治療,盡早明確診斷,兩種方法可同時(shí)進(jìn)行。