郁金提取物亞慢性毒性實驗研究

易傳祝 吳媛妮 肖佩 崔魯煒 周月嬋 胡余明

郁金(CurcumaaromaticaSalisb) 為姜科植物的根莖，主要分布于廣西、四川等省區(qū)，郁金含有揮發(fā)油和類姜黃素[1-2]，具有抗腫瘤、抗氧化和抗炎鎮(zhèn)痛等藥理活性[2-4]。郁金具有良好的藥用開發(fā)前景，但目前對其食用安全性的資料并不多。于2016年，以郁金提取物為受試物，SD大鼠為研究對象，通過觀察大鼠的主要器官、血常規(guī)、血生化以及病理等指標(biāo)，探討郁金提取物的亞慢性毒性，為郁金的進一步開發(fā)和利用提供一定的實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1受試物： 郁金提取物由某公司提供。為郁金飲片醇提濃縮液，折算成生藥約為5.33 g/mL。因郁金飲片人口服推薦劑量為每日2 g，換算成郁金飲片醇提濃縮液為每日0.375 mL。

1.1.2實驗動物及環(huán)境： SPF級KM小鼠、SD大鼠和飼料由長沙市天勤生物技術(shù)有限公司提供，實驗動物生產(chǎn)許可證號SCXK(湘)2014-0011。實驗環(huán)境為屏障環(huán)境。實驗期間實驗環(huán)境溫度22～26 ℃，濕度50%～58%。實驗動物使用許可證號為SYXK(湘)2015-0012號。

1.1.3主要儀器與試劑： SYSMEX XT-2000i全自動血球計數(shù)儀，Beckman Coulter AU680全自動生化分析儀等。

1.2方法[5]

1.2.1急性毒性試驗： 選用SPF級KM小鼠20只，體重18.0～22.0 g，雌雄各半。實驗采用最大耐受劑量法。首次灌胃前禁食16 h，自由飲水，取郁金提取物經(jīng)口給小鼠灌胃1次，灌胃體積為0.2 mL/10 g·bw，測比重為1.093 g/mL，折合劑量為21.86 g/kg·bw。連續(xù)觀察14 d，記錄動物中毒癥狀及死亡情況。

1.2.2大鼠90 d喂養(yǎng)實驗 取SD大鼠80只，雌雄各半。將實驗動物隨機分為4組，即對照組及低、中、高3個受試物組，每組20只，雌雄各半。設(shè)低、中、高劑量分別為0.625、1.250和1.875 mL/kg·bw(相當(dāng)于人體推薦劑量的100、200、300倍)。對照組給予等體積蒸餾水，每日灌胃一次，灌胃體積為1.0 mL/100 g·bw，連續(xù)90 d。實驗期間動物單籠飼養(yǎng)，每周加食2～3次，記錄給食量和剩食量，每周稱一次體重，計算食物利用率，采血測定血常規(guī)及血生化指標(biāo)，大體解剖檢查明顯病變，稱肝、腎、脾、睪丸重量，計算臟/體比值，取肝、腎、脾、胃、腸、睪丸、卵巢作病理切片檢查。

2 結(jié)果

2.1郁金提取物小鼠急性毒性結(jié)果 經(jīng)口灌胃給予雌、雄性小鼠21.86 g/kg·bw劑量的郁金提取物，動物未發(fā)現(xiàn)中毒癥狀及死亡情況。觀察14 d后將受試動物處死進行解剖檢查，肝、脾、腎、胃、腸、心、肺等主要臟器未見明顯異常改變。郁金提取物對KM雌、雄小鼠的最大耐受劑量(MTD)>21.86 g/kg·bw。

2.290 d喂養(yǎng)試驗結(jié)果

2.2.1郁金提取物對大鼠體重增長、進食量、食物利用率的影響： 各劑量組雌、雄大鼠體重增長情況良好，其體重、增重、進食量及食物利用率與對照組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，表1)。

表1 郁金提取物對大鼠體重、食物總攝入量及食物利用率的影響±s)

2.2.2郁金提取物對大鼠血常規(guī)的影響： 各劑量組雌、雄大鼠的血紅蛋白、紅細胞總數(shù)、紅細胞壓積、血小板數(shù)、白細胞總數(shù)與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，表2)。

表2 郁金提取物90 d喂養(yǎng)試驗大鼠末期血液學(xué)檢查結(jié)果±s)

2.2.3郁金提取物對大鼠血生化的影響: 各劑量組雌、雄大鼠的各項生化指標(biāo)與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，表3)。

表3 郁金提取物90 d喂養(yǎng)試驗大鼠末期生化檢驗結(jié)果±s)

續(xù)表3 郁金提取物90 d喂養(yǎng)試驗大鼠末期生化檢驗結(jié)果±s)

2.2.4郁金提取物對大鼠臟器/體重比值的影響: 各劑量組雌、雄大鼠的臟器重量、臟器/體重比值與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，表4)。

表4 郁金提取物90 d喂養(yǎng)對大鼠臟體比的影響±s)

2.2.5大體解剖及組織學(xué)檢查結(jié)果： 大體解剖，各臟器色澤、大小及質(zhì)地均未見明顯異常。雌、雄大鼠各劑量組和對照組的肝臟、腎臟、脾臟、胃、小腸、睪丸、卵巢等均未見有意義的病理學(xué)改變。

3 討論

該研究中，郁金提取物對雌、雄性小鼠經(jīng)口急性毒性的結(jié)果為MTD均>21.86 g/kg·bw。90 d喂養(yǎng)試驗受試物組動物的體重、攝食量及食物利用率與對照組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義；血常規(guī)和血生化檢測結(jié)果均在本實驗室的歷史正常對照檢測范圍內(nèi)，與對照組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義；各受試物劑量組肝臟、腎臟、脾臟和睪丸的重量及各臟器臟體比與對照組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義；且在組織病理學(xué)檢測中均未見有意義的病理學(xué)改變。

綜上所述，該研究中未見郁金提取物對動物產(chǎn)生不良影響，在本實驗條件下，1.875 mL/kg·bw為郁金提取物的未觀察到有害作用水平。由此可見，郁金提取物作用于實驗動物具有一定的安全性，值得進一步研究開發(fā)利用。