2017年山東省肉鴨大腸桿菌分離及敏感藥物篩選

孫法良

（齊魯動(dòng)物保健品有限公司，山東 濟(jì)南 250100）

鴨大腸桿菌病是由某些致病性大腸桿菌引起的局部或全身性感染的疾病，臨床上常表現(xiàn)心包炎、肝周炎、氣囊炎、輸卵管炎、腹膜炎、腦膜炎等多種病變。肉鴨由于生長(zhǎng)速度快、棚舍簡(jiǎn)陋、環(huán)境衛(wèi)生差、飼養(yǎng)密度大、通風(fēng)不良等不良因素導(dǎo)致后期發(fā)病率和死亡率較高，用藥物控制越來(lái)越難，究其原因是缺乏科學(xué)用藥，前期頻繁藥物導(dǎo)致耐藥嚴(yán)重，后期用藥療效不佳，損失慘重。筆者把2017年送檢的114份疑似肉鴨大腸桿菌病料進(jìn)行細(xì)菌分離，分離出96株大腸桿菌，并作藥敏試驗(yàn)，找出敏感藥物，給大家科學(xué)用藥提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病料 2017年采自濰坊、臨沂、濟(jì)寧、聊城、菏澤、德州、泰安7個(gè)地市114個(gè)肉鴨場(chǎng)疑似包心包肝的病死鴨。無(wú)菌采集病死鴨的心臟、肝臟、脾臟等病料，用于細(xì)菌分離。

1.1.2 培養(yǎng)基與試劑 鮮血瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基、普通瓊脂培養(yǎng)基，購(gòu)自青島海博生物科技有限公司；抗菌藥物藥敏片，購(gòu)自杭州微生物試劑有限公司。

1.2 方法

1.2.1 大腸桿菌分離培養(yǎng) 無(wú)菌采集有明顯包心包肝的病死鴨的肝臟和脾臟，接種于鮮血普通瓊脂平板，置37℃恒溫箱內(nèi)，培養(yǎng)24h，觀察菌落形態(tài)；再?gòu)孽r血瓊脂平板上挑取單個(gè)光滑、圓潤(rùn)、隆起、乳白色、邊緣整齊的中等偏大菌落，接種于麥康凱瓊脂平板上，置 37℃恒溫箱內(nèi)，培養(yǎng) 24h，觀察菌落形態(tài)；若在麥康凱瓊脂平板上長(zhǎng)出紅色菌落，即可確定為大腸桿菌。

1.2.2 藥敏試驗(yàn) 無(wú)菌條件下挑取麥康凱瓊脂平板上的紅色菌落，接種于普通瓊脂培養(yǎng)基中，37℃震蕩培養(yǎng)16h。取細(xì)菌培養(yǎng)液100μl均勻涂布于普通瓊脂平板上，將慶大霉素、鏈霉素、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、丁胺卡那、壯觀霉素、新霉素、強(qiáng)力霉素、紅霉素、林可霉素、阿莫西林、氟苯尼考、磺胺間甲氧嘧啶、多粘菌素、頭孢氨芐等15種藥敏片貼到涂好菌液的平板上，做好標(biāo)記，置37℃恒溫箱內(nèi)，培養(yǎng)12h，測(cè)量抑菌圈直徑大小，判斷藥物敏感度。

2 結(jié)果

2.1 大腸桿菌分離培養(yǎng)結(jié)果 從114份包心包肝病死鴨病料中分離到96株大腸桿菌，分離率高達(dá)84.2%。分離到的菌株在麥康凱瓊脂平板上形成光滑、圓潤(rùn)、凸起、邊緣整齊的中等大小紅色菌落，確定為大腸桿菌。

2.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果 對(duì)分離到96株大腸桿菌作藥敏試驗(yàn)，測(cè)量得到抑菌圈直徑與藥敏試驗(yàn)判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比對(duì)。試驗(yàn)結(jié)果見表1。所測(cè)得15種抗菌藥中，敏感藥物有丁胺卡那（53.1%）、慶大霉素（50.0%）、新霉素（50.0%）、壯觀霉素（34.4%）、頭孢氨芐 （31.3%）、環(huán)丙沙星 （28.1%）、鏈霉素（28.1%）、阿莫西林（25.0%）；耐藥率較高藥物有磺胺間甲氧嘧啶（96.9%）、林可霉素（93.8%）、氟苯尼考（68.8%）、阿莫西林（50.0%）、強(qiáng)力霉素（46.9%）、紅霉素（46.9%）、恩諾沙星（40.6%）。

表1 抗菌藥物藥敏試驗(yàn)結(jié)果

3 分析

從114份疑似病料中分離到96株大腸桿菌，分離率高達(dá)84.2%，說(shuō)明大腸桿菌在肉鴨上感染比較普遍。自然界中，大腸桿菌分布廣泛，各日齡的肉鴨都能夠感染，但多在25日齡之后發(fā)病率和死亡率較高，主要是飼養(yǎng)后期鴨舍環(huán)境衛(wèi)生更差、舍內(nèi)更潮濕、通風(fēng)更差、有害氣體刺激更嚴(yán)重等各種不良因素的影響致使機(jī)體抵抗力下降而發(fā)病。另外其它病原微生物感染，如流感病毒、呼腸孤病毒，導(dǎo)致機(jī)體免疫抑制，機(jī)體抵抗力下降，繼發(fā)大腸桿菌。

在肉鴨養(yǎng)殖中預(yù)防大腸桿菌的發(fā)生，關(guān)鍵還是要把養(yǎng)殖最基本的東西做好，就是加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和搞好環(huán)境衛(wèi)生。臨床上養(yǎng)殖環(huán)境好，飼養(yǎng)管理水平高的肉鴨場(chǎng)發(fā)病率就很少，為了養(yǎng)殖效益，要確保肉鴨吃好、喝好、住好、呼吸好，最大限度減少各種不良應(yīng)激。

鴨大腸桿菌極易產(chǎn)生耐藥性，肉鴨養(yǎng)殖前幾年濫用藥物比較普遍，產(chǎn)生耐藥嚴(yán)重，很難篩選出敏感藥物，最近兩年由于食品安全問題，限制抗菌藥物的使用，敏感藥物開始增多，這與早期報(bào)道不一致。目前可選擇敏感藥物有丁胺卡那、慶大霉素、新霉素、壯觀霉素、頭孢氨芐，臨床上可選擇2～3種敏感藥物進(jìn)行聯(lián)合、輪換、交替使用進(jìn)行早期預(yù)防和后期發(fā)病的治療，避免同一種藥物長(zhǎng)期使用。