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    對比分析菌落總數(shù)檢測片與國標法用于生鮮乳中菌落總數(shù)的檢測

    2018-11-02 03:52:16,
    畜禽業(yè) 2018年10期
    關鍵詞:培養(yǎng)皿國標總數(shù)

    ,

    (河北省獸藥監(jiān)察所, 河北 石家莊 050000)

    0 引言

    食品安全國家標準中規(guī)定:生鮮乳中菌落總數(shù)應小于或等于 200 萬 cfu/mL。目前,生鮮乳菌落總數(shù)的測定方法主要為國標法,關于菌落總數(shù)檢測片檢測生鮮乳中菌落總數(shù)的報道較少,本試驗主要通過將菌落總數(shù)檢測片法和國標法的檢測結果作為對比,以討論菌落總數(shù)檢測片方法的可行性。

    1 材料與方法

    1.1 儀器與設備

    生化培養(yǎng)箱;自動壓力蒸汽滅菌器;玻璃試管;移液槍。

    1.2 材料與試劑

    營養(yǎng)瓊脂;生理鹽水;細菌總數(shù)檢測片(Charm);一次性滅菌槍頭;一次性使用培養(yǎng)皿。

    1.3 試驗內(nèi)容及方法

    將隨機抽取的50批生鮮乳樣品分別進行檢測片法和國標法檢測,國標法檢測作為對照組,檢測片法檢測作為試驗組。對照組檢測依據(jù)國標法GB 4789.2-2010。用無菌槍頭吸取生鮮乳樣品 25 mL置 225 mL裝有無菌生理鹽水的無菌均質袋中,拍打 1~2 min,選擇三個適宜稀釋度(10-3、10-4、10-5)進行稀釋,分別將三個稀釋度樣品于無菌培養(yǎng)皿內(nèi),同時作空白對照。將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿內(nèi),使其混合均勻。瓊脂凝固后置于(36±1)℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)倒置培養(yǎng) (48±2) h,記錄稀釋倍數(shù)和相應的菌落數(shù)量,菌落計數(shù)以菌落形成單位(CFU)表示。

    試驗組應用菌落總數(shù)檢測片進行檢測。分別取上述對照組中三個稀釋度(10-3、10-4、10-5)的樣品1 mL加入檢測片內(nèi),同時作空白對照。標記檢測片,提起粘合片,豎直加入樣品,重新蓋上粘合片,保持表面平整。培養(yǎng)方法與菌落計數(shù)同對照組。

    1.4 結果計算

    選取菌落數(shù)為30~300CFU,無蔓延菌落生長的培養(yǎng)皿計數(shù)菌落總數(shù)。若只有1個稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi),計算2個平板菌落數(shù)的平均值;若2個連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)時,按計算公式:N=ΣC/(n1+0.1n2)d。(注:N—樣品中菌落數(shù);∑C—平板菌落數(shù)之和;n1—第1稀釋度平板個數(shù);n2—第2稀釋度平板個數(shù);d—稀釋因子。)

    1.5 統(tǒng)計學方法

    2 檢測結果

    從表1可知,兩組空白對照均無菌落生長;在相同條件下,計算2組菌落總數(shù)結果顯示,試驗組的菌落總數(shù)與對照組相比較低,但差異不顯著(P>0.05)。

    表1 兩種不同檢測方法對生鮮乳菌落總數(shù)檢測的結果比較

    注:與對照組比較,*P<0.05

    3 討論

    生鮮乳的質量檢測包括理化檢驗以及菌落總數(shù)等,菌落總數(shù)是反應生鮮乳質量的一個重要指標。其檢測方法包括國標法和快速檢測方法。傳統(tǒng)的國標法檢測生鮮乳中的菌落總數(shù)較為準確,但是操作相對復雜,使用的材料也相對較多。隨著檢測技術的快速發(fā)展,不斷研發(fā)出先進的檢測方法。菌落總數(shù)檢測片是用來檢測食品中菌落總數(shù)的一種新方法,它以標準瓊脂方法為基礎,其培養(yǎng)基中含有酶的底物2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC),此種底物可以被活菌還原成紅色。所以,在經(jīng)過加樣和培養(yǎng)后,細菌菌落在檢測片上顯出紅色的菌斑,方便觀察和計數(shù)。菌落總數(shù)檢測片是一種可以代替普通培養(yǎng)皿的新型檢測產(chǎn)品,優(yōu)點包括無需配制培養(yǎng)基,方便攜帶和使用,培養(yǎng)時可疊加,節(jié)省空間。其操作和結果觀察都較為簡便可靠。綜上所述,應用菌落總數(shù)檢測片檢測生鮮乳中菌落總數(shù)具有一定的應用價值,且操作方便,易于攜帶,值得推廣。

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