布氏菌病活疫苗（S2株）臨床安全及免疫效果試驗(yàn)研究

高志卿 ，朱生榮 ，馬有翔 ，肖世瑾 ，王玉璞 ，張建鵬

（1.山丹縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 山丹734100；2.山丹縣李橋鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站，甘肅 山丹 734100）

布魯氏菌病 是由布魯氏菌侵入機(jī)體引起的人畜共患的傳染變態(tài)反應(yīng)性疾病。在家畜中牛、羊、豬最常發(fā)生,且可由牛、羊、豬傳染給人和其他家畜。我國將其列為二類動(dòng)物疫病,世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE)列為B類動(dòng)物疫病。目前研究認(rèn)為 ,在絕大多數(shù)情況下,使用疫苗是控制牛、羊布病的有效方法。山丹縣牛羊布病流行病學(xué)調(diào)查顯示，該縣牛羊布病發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢，2016年羊布病血清學(xué)陽性率達(dá)到7.4%，開展羊布病免疫勢在必行。目前國內(nèi)用于羊布病免疫的疫苗主要有布氏菌病活疫苗（S2株）和布氏菌病活疫苗（M5株）（以下簡稱S2和M5疫苗）兩種，根據(jù)全省布病免疫試點(diǎn)工作的經(jīng)驗(yàn)，山丹縣擬選用S2疫苗免疫。為進(jìn)一步驗(yàn)證S2疫苗的臨床安全性，為全縣大規(guī)模免疫提供依據(jù)，開展本實(shí)驗(yàn)研究。

1 材料和方法

1.1 疫苗、試劑及試驗(yàn)動(dòng)物 布氏菌病活疫苗（S2株），購自新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司。布魯氏菌病虎紅抗原來源于哈爾濱生物制品有限責(zé)任公司。本地綿山羊（1月齡以上，除種公羊以外，琥紅平板凝集試驗(yàn)(RBPT)檢測陰性），由山丹縣李橋鄉(xiāng)部分養(yǎng)羊場戶提供。

1.2 免疫接種

1.2.1 口服免疫 將布氏菌病活疫苗（S2株）配專用稀釋液用投藥槍進(jìn)行口腔灌服，山羊和綿羊不論大小一律1頭份，含活菌100億。對照組投服1ml生理鹽水。按操作規(guī)程做好人員防護(hù)。

1.2.2 注射免疫 將布氏菌病活疫苗（S2株）配專用稀釋液用投藥槍進(jìn)行肌肉注射，山羊不論大小一律1/4頭份,含活菌25億，綿羊不論大小一律1/2頭份，含活菌50億。對照組肌肉注射1ml生理鹽水。按操作規(guī)程做好人員防護(hù)。

1.2.3 臨床安全性觀察 連續(xù)觀察60d，統(tǒng)計(jì)免疫反應(yīng)情況。

1.2.4 免疫效果及轉(zhuǎn)陰期觀察試驗(yàn) 分別在免疫后 15、30、15、60 天按照國家標(biāo)準(zhǔn) （GB/T 18646-2002）規(guī)定方法【琥紅平板凝集試驗(yàn)(RBPT)】檢測陽性率。

2 結(jié)果

2.1 布氏菌病活疫苗 （S2株）臨床安全性觀察實(shí)驗(yàn)I組，將將布氏菌病活疫苗（S2株）配專用稀釋液用投藥槍進(jìn)行口腔灌服，山羊和綿羊不論大小一律1頭份，含活菌100億。免疫后未出現(xiàn)任何過敏反應(yīng)等異常情況，副反應(yīng)率0；試驗(yàn)II組，將布氏菌病活疫苗（S2株）配專用稀釋液用投藥槍進(jìn)行肌肉注射，山羊不論大小一律1/4頭份,含活菌25億，綿羊不論大小一律1/2頭份，含活菌50億。免疫后即有8只羊出現(xiàn)精神萎靡，行走僵硬，呼吸困難等疫苗反應(yīng)，6只癥狀輕微一天后自愈，2只經(jīng)抗過敏治療后治愈1只，死亡1只，副反應(yīng)率為9.8%，較實(shí)驗(yàn)I組高，臨床癥狀更為嚴(yán)重；對照組副反應(yīng)率均為0，詳見表1。

表1 疫苗副反應(yīng)觀察試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

2.2 布氏菌病活疫苗（S2株）免疫效果觀察 實(shí)驗(yàn) I組， 免疫后 15、30、45、60、90 天血清學(xué)檢測陽性率分別為 26.7%、46.5%、40.7%、9.3%和 0；試驗(yàn) II組分別為 29.3%、46.7%、39.1%、7.6%和0。實(shí)驗(yàn)I組和試驗(yàn)II組轉(zhuǎn)陽率和轉(zhuǎn)陽率消長規(guī)律差別不大，詳見表2.

表2 免疫效果觀察試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

3 討論

3.1 用布氏菌病活疫苗（S2株）口服免疫，只有極個(gè)別的羊出現(xiàn)一過性輕微疫苗反應(yīng)，不用治療即可自行恢復(fù)；采用肌肉注射的方法進(jìn)行免疫則疫苗反應(yīng)相對較為嚴(yán)重，可能出現(xiàn)流產(chǎn)和死亡。因此，在大規(guī)模免疫時(shí)多推薦口服免疫的方法。

3.2 口服免疫，山羊和綿羊不論大小一律灌服布氏菌病活疫苗（S2株）1頭份，含活菌100億。注射免疫，山羊不論大小一律注射1/4頭份,含活菌25億，綿羊不論大小一律注射1/2頭份，含活菌50億。二者之間的免疫效果和免疫抗體消長規(guī)律差別不大。

3.3 本研究免疫抗體水平消長變化表明，采用S2疫苗免疫后90天，所有羊只的免疫抗體全部消失。這為今后布病監(jiān)測中區(qū)分免疫抗體還是感染抗體提高了一定的理論依據(jù)。根據(jù)這一結(jié)論制定“免疫+檢測凈化”的布病防控策略，在免疫90天后，檢測到血清學(xué)陽性家畜即可確定為感染陽性畜予以撲殺，達(dá)到凈化控制的目的。