張洪軍,王會敏,張秀麗,李秀慧,趙曉光,劉國臣,王佩琪,路廣計(jì)
(1.河北省承德市圍場滿族蒙古族自治縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,承德 068450;2.河北省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,石家莊 068450)
布魯氏菌病是一種世界性的人畜共患病,對經(jīng)濟(jì)和公共健康都有重大影響。牛、羊感染流產(chǎn)布魯氏菌和羊種布魯氏菌,是人類疾病的共同來源,該病主要危害人畜生殖系統(tǒng),人與人之間幾乎不傳播,患病動(dòng)物是主要的傳染源,其中病羊感染人的比例較高。目前疫苗免疫是布魯氏菌病防控的重要手段之一,尤其布魯氏菌病高發(fā)地區(qū)。我國在《國家布魯氏菌病防治計(jì)劃 (2016—2020年)》中明確提出一類地區(qū)對羊采取全面免疫措施。
我國羊使用的布魯氏菌病疫苗主要有Rev.1羊種和S2豬種。羊種Rev.1是應(yīng)用最廣泛的羊種布病活疫苗,可對羊?qū)嵤┯行У拿庖遊1]。豬種的S2株弱毒疫苗具有良好的免疫效果,但目前仍無法判斷區(qū)分野毒及接種疫苗產(chǎn)生的抗體,主要從抗體在體內(nèi)存續(xù)時(shí)間的長短判斷,存續(xù)時(shí)間短的是疫苗免疫,時(shí)間長的為野毒感染[2]。M5菌株是一株由我國從羊種布魯氏菌中分離并自行培育致弱的菌株,對牛、羊均可產(chǎn)生較好的免疫力[3]。由于該菌株毒力較強(qiáng)且存在毒力返強(qiáng)的風(fēng)險(xiǎn),同時(shí)因其對妊娠動(dòng)物有毒力增強(qiáng)的現(xiàn)象,更不能用于懷孕羊,目前市場已經(jīng)不進(jìn)行生產(chǎn)銷售[4]。
琥紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)結(jié)果均為:陰性的健康羊血清樣品212份,采自河北省境內(nèi)某地區(qū)規(guī)?;B(yǎng)殖場,均免疫過布病疫苗S2株,但已超過18個(gè)月。
布病陰性羊40只(20只/組),豬種布魯氏菌S2弱毒疫苗(中牧)、Rev.1疫苗(國外小量購進(jìn))。
使用布魯氏菌S2疫苗以口服方式對羊進(jìn)行免疫,使用Rev.1疫苗以滴眼方式對羊進(jìn)行免疫,免疫后分別在特定時(shí)間點(diǎn)使用虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT)和試管凝集試驗(yàn)(SAT)對羊群抗體陽性率進(jìn)行監(jiān)測[5]。
應(yīng)用RBT及SAT試驗(yàn)方法檢測羊免疫后在第14、21、28、58、90、122天的血清40份,免疫后不同天數(shù)布病特異性抗體檢出率見圖1、圖2。
S2口服免疫羊群后,抗體陽性率在免疫后21 d內(nèi)持續(xù)升高,隨后下降,并在122 d后降到10%以下(圖1)。
圖1 S2疫苗口服免疫羊群抗體消長規(guī)律
Rev.1疫苗滴眼免疫羊群后,抗體陽性率在免疫后14 d內(nèi)持續(xù)升至100%,免疫后28 d開始下降,免疫后122 d抗體陽性率降至10%以下(圖2)。
圖2 Rev.1疫苗滴眼免疫羊群抗體消長規(guī)律
從檢測方法上分析,RBT同時(shí)期檢測S2免疫羊與Rev.1免疫羊,14 d時(shí)Rev.1抗體陽性率達(dá)到最高(Rev.1為100%,S2為65%)。S2免疫抗體陽性率繼續(xù)小幅上升,直到21 d時(shí)達(dá)到最高值70%,此時(shí)Rev.1免疫抗體陽性率依然保持100%。隨著時(shí)間的推移,S2免疫抗體陽性率開始急速下降,約58 d時(shí)免疫抗體陽性率減半(35%),而Rev.1免疫抗體陽性率一直到28 d時(shí)才出現(xiàn)下降趨勢,并在90 d時(shí)減半(50%),此時(shí)Rev.1免疫抗體陽性率仍然大于S2的免疫抗體陽性率。而兩者均在122 d時(shí)免疫抗體陽性率達(dá)到20%。
SAT同時(shí)檢測S2免疫羊與Rev.1免疫羊,S2與Rev.1同在14 d檢測到最高的抗體陽性率(Rev.1為100%,S2為70%)。S2最高的抗體陽性率一直持續(xù)到21 d,而Rev.1最高的抗體陽性率一直持續(xù)到28 d。S2仍在58 d免疫抗體陽性率減半(35%),Rev.1在90 d時(shí)減半(50%)。122 d時(shí)免疫抗體陽性率降至10%以下。
通過對兩種檢測方法比較發(fā)現(xiàn),SAT檢測S2與Rev.1時(shí),14 d均能檢測到最高陽性率,之后抗體陽性率均下降,RBT檢測和SAT檢測比較無太大差別,結(jié)合操作方法分析,RBT檢測方法更簡單、快速。
通過對S2株免疫與Rev.1免疫后的免疫效果比較發(fā)現(xiàn),Rev.1的免疫效果高于S2,14 d時(shí)抗體陽性率100%,S2僅為70%。Rev.1抗體陽性率100%持續(xù)到28 d,而S2僅持續(xù)到21 d。122 d時(shí),兩者抗體陽性率均降至10%以下。因此Rev.1可作為綿羊布病免疫的首選疫苗。
大規(guī)模進(jìn)行羊布魯氏菌病的免疫宜采用Rev.1滴眼方式進(jìn)行,而篩選宜采用RBT檢測的方式。