逍遙散對(duì)慢性應(yīng)激肝郁脾虛證大鼠行為學(xué)及學(xué)習(xí)記憶能力的影響

連利軍 李曉紅 馮雯倩 李熠毅 蔣筱 肖華業(yè) 楊力強(qiáng)

摘要 目的：觀察慢性束縛應(yīng)激肝郁脾虛證大鼠行為學(xué)與學(xué)習(xí)記憶能力的變化及逍遙散的調(diào)節(jié)作用。方法：采用慢性束縛應(yīng)激方法（每天束縛3h，連續(xù)21d）制作大鼠模型并用逍遙散進(jìn)行干預(yù)。將45只雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、逍遙散組，15只/組。觀察各組大鼠一般狀態(tài)，測量大鼠體重、攝食量、曠場實(shí)驗(yàn)行為學(xué)指標(biāo)，并用Y迷宮測試各組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力。結(jié)果：1）模型組大鼠在慢性束縛應(yīng)激初期表現(xiàn)為強(qiáng)烈的反抗、嘶叫，后期表現(xiàn)為神態(tài)倦怠、情志抑郁及不再抵抗的行為絕望狀態(tài)；2）與正常組比較：模型組大鼠體重、攝食量顯著下降（P<0.01）；曠場實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M大鼠5min運(yùn)動(dòng)總距離減少（P<0.05），5min平均移動(dòng)速度減慢（P<0.05），中央?yún)^(qū)停留時(shí)間增加（P<0.05）；Y迷宮測試，模型組大鼠正確反應(yīng)率降低（P<0.01），全天總反應(yīng)時(shí)間增加（P<0.01）；3）逍遙散對(duì)模型組大鼠上述改變均有一定的調(diào)節(jié)作用。結(jié)論：逍遙散對(duì)肝郁脾虛證大鼠體重、攝食量及行為學(xué)的異常變化具有改善作用，并能提高其學(xué)習(xí)記憶能力，表現(xiàn)出抗抑郁、焦慮作用。

關(guān)鍵詞 逍遙散；慢性束縛應(yīng)激；肝郁脾虛證；行為學(xué)；學(xué)習(xí)記憶

AbstractObjective：Toobservethechangesofbehaviorandlearningmemoryabilityofchronicimmobilizationstressliver-stagnationandspleen-deficiencysyndromeratsandtheregulatoryeffectofXiaoyaoPowder.Methods：Atotalof45maleSDratswererandomlydividedinto3groups：normalcontrolgroup，modelgroupandXiaoyaopowdergroup.Theratmodelwasestablishedbychronicimmobilizationstress（dailybindingfor3h，for21days）andintervenedwithXiaoyaopowder.Thegeneralstateofratsineachgroupwasobserved，andthebodymass，foodintake，open-fieldexperimentbehavioralindicatorsweremeasured.Y-mazewasusedtotestthelearningandmemoryability.Results：Theratsinthemodelgroupshowedstrongresistanceandscreamingattheearlystageofchronicimmobilizationstress，andlaterappearedasburnout，emotionaldepressionanddesperatestateofbehaviorofnolongerresistance.Comparedwithnormalgroup：thebodymassandfoodintakeofmodelgroupratsdecreasedsignificantly（P<0.01）；Intheopen-fieldexperiment，thetotallengthof5minutesmotiondecreased（P<0.05），andtheaveragemovingspeedof5minutessloweddown（P<0.05），andthestayperiodincenterzoneincreased（P<0.05）；InY-mazetest，theratsinmodelgroupshowedthatthecorrectreactionratedecreased（P<0.01），andthetotalreactiontimeincreasedthroughouttheday（P<0.01）.XiaoyaoPowdercanregulatetheabovechangesinthemodelgrouprats.Conclusion：XiaoyaoPowdercanregulatetheweight，foodintakeandabnormalbehaviorsofliver-qiandspleendeficiencyrats.Itcanalsoimprovethelearningandmemoryabilityandthestateofdepressionoranxiety.

KeyWordsXiaoyaopowder；Chronicimmobilizationstress；Syndromeofliverdepressionandspleendeficiency；Behavior；Learningandmemory

中圖分類號(hào)：R289.3；R277.7文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2018.06.048

逍遙散最早記載于《太平惠民和劑局方》，由柴胡、白芍、白術(shù)、茯苓、當(dāng)歸、甘草、生姜、薄荷8味藥物組成，具有疏肝解郁、養(yǎng)血健脾的功效，是治療肝郁脾虛證的經(jīng)典名方，也是抗應(yīng)激損傷的經(jīng)典方劑之一，對(duì)肝郁脾虛證及慢性應(yīng)激有很好療效[1-2]。課題組前期在全基因組水平上系統(tǒng)探索了逍遙散治療慢性應(yīng)激肝郁脾虛證大鼠的作用機(jī)理[3-4]，本實(shí)驗(yàn)觀察逍遙散對(duì)慢性應(yīng)激肝郁脾虛證大鼠行為學(xué)及學(xué)習(xí)記憶的影響。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1動(dòng)物雄性SD大鼠45只，體重180～220g，合格證號(hào)：SCXK（桂）2009-0002（廣西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供）。飼養(yǎng)于普通級(jí)動(dòng)物房，室內(nèi)溫度（22±2）℃，相對(duì)濕度50%～60%，喂常規(guī)飼料及飲用水。實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性喂養(yǎng)1周。

1.1.2藥物逍遙散藥物組成：柴胡30g、當(dāng)歸30g、白芍30g、白術(shù)30g、茯苓30g、炙甘草15g、生姜10g、薄荷10g（后下）。中藥飲片由廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院提供，用水煎成湯劑，將藥物濃縮至含生藥量1.67g/mL，放入4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.3試劑與儀器1）大鼠曠場行為測試箱：長×寬×高為100cm×100cm×40cm的木制箱。底面用黑線劃分成面積相等的25個(gè)正方形方格，每行和每列各5個(gè)方格，中心9格為中央?yún)^(qū)。曠場箱中央正上方安置攝像頭，觀察記錄大鼠活動(dòng)情況。2）Y迷宮刺激器：Y迷宮也稱3等分輻射式迷路箱，由等長的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ臂（每臂長45cm）和3者的交界區(qū)組成。箱底鋪設(shè)直徑0.2cm、長14cm、間距1cm的電柵，臂的內(nèi)壁均貼有與相應(yīng)電柵相通可導(dǎo)電的薄層銅片，每條臂頂端裝有一盞15W的刺激信號(hào)燈?？刂泼姘逵须妷嚎刂瓢粹o、延時(shí)控制按鈕和0、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ4個(gè)按鍵，當(dāng)按下0鍵時(shí)，3臂均不通電，交界區(qū)通電，當(dāng)分別按下Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ鍵時(shí)，相應(yīng)臂的信號(hào)燈亮，此時(shí)該臂不通電為安全區(qū)，另外無燈光的兩臂及交界區(qū)均通電而成為非安全區(qū)（電擊區(qū)）[5]。Y迷宮3條臂交界區(qū)的正上方安置攝像頭。3）行為學(xué)記錄分析軟件：美國StoeltingAnymaze視頻分析系統(tǒng)（60000）。

1.2方法

1.2.1分組與模型制備45只雄性SD大鼠按體重隨機(jī)分為3組，每組15只，分別為正常組、模型組、逍遙散組。采用束縛方法制作肝郁脾虛證大鼠模型，正常組大鼠不予束縛，自由進(jìn)食、飲水及自主活動(dòng)，模型組和逍遙散組大鼠均束縛于特制的大鼠束縛架上，束縛時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)，每日3h，連續(xù)21d。

1.2.2干預(yù)方法每天在束縛前1h給逍遙散組大鼠灌服1mL/100g逍遙散中藥煎液，正常組和模型組大鼠灌服1mL/100g生理鹽水，造模期間根據(jù)大鼠體重調(diào)整給藥量。

1.2.3檢測指標(biāo)與方法1）一般狀態(tài)觀察：每天觀察大鼠對(duì)束縛的反應(yīng)、精神狀態(tài)、活動(dòng)情況、身體姿勢、毛發(fā)、爪甲和耳廓的色澤以及糞便的變化等全身和局部情況。2）體重：實(shí)驗(yàn)開始前1d稱量大鼠體重，作為第0天體重。實(shí)驗(yàn)開始后每天上午7：00稱量大鼠體重，計(jì)算第1周、第2周、第3周各組大鼠體重增長量并進(jìn)行比較。3）攝食量：實(shí)驗(yàn)開始后每籠大鼠給一定量飼料，第2天上午7：00稱量每籠大鼠所剩飼料量，計(jì)算第1周、第2周、第3周各組大鼠每天平均進(jìn)食量并進(jìn)行比較。4）曠場實(shí)驗(yàn)：21d造模結(jié)束后，各組大鼠于第22天進(jìn)行曠場實(shí)驗(yàn)，利用同步錄像、計(jì)時(shí)，觀察5min大鼠在曠場行為測試箱內(nèi)的活動(dòng)情況。測量指標(biāo)包括運(yùn)動(dòng)總距離、平均移動(dòng)速度、中央?yún)^(qū)停留時(shí)間。5）Y-迷宮實(shí)驗(yàn)：Y-迷宮測試方法參照文獻(xiàn)方法[5-6]，實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，將大鼠放入迷宮中適應(yīng)3～5min，然后按改良的“不固定次數(shù)隨機(jī)不休息法”[7]轉(zhuǎn)換按鍵開關(guān)以變換安全區(qū)與電擊區(qū)的位置，觀察大鼠學(xué)會(huì)逃離電擊區(qū)而進(jìn)入安全區(qū)的反應(yīng)能力。a.不固定次數(shù)：安全區(qū)以無規(guī)則次序變換，但實(shí)驗(yàn)在同一天內(nèi)完成，采取分段連續(xù)法，即每測試10次，休息1min，以連續(xù)10次中有9次或以上正確反應(yīng)為達(dá)到學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)，如果動(dòng)物迅速達(dá)標(biāo)，則停止實(shí)驗(yàn)，最大測試次數(shù)為30次。b.隨機(jī)：指隨意更換安全區(qū)方位。c.不休息：兩次測試之間不熄燈，也不給大鼠休息時(shí)間。d.正誤判定的標(biāo)準(zhǔn)：以大鼠在足底通電后10s內(nèi)1次性跑向安全區(qū)為正確反應(yīng)，否則為錯(cuò)誤反應(yīng)。觀察指標(biāo)如下：a.正確反應(yīng)率（%）：正確反應(yīng)數(shù)占總測試數(shù)的百分比；b.主動(dòng)回避率（%）：大鼠在燈亮后但未通電的5s內(nèi)完成逃避反應(yīng)的次數(shù)占總反應(yīng)次數(shù)的百分率。c.全天總反應(yīng)時(shí)間（TotalReactionTime，TRT）：即一個(gè)實(shí)驗(yàn)日（全天）完成所有訓(xùn)練（包括正確反應(yīng)和錯(cuò)誤反應(yīng)）所需時(shí)間。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS21統(tǒng)計(jì)軟件，用單因素方差分析及t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1逍遙散對(duì)模型組大鼠一般狀態(tài)的影響造模前，各組大鼠精神狀態(tài)、皮毛色澤、糞便以及自主活動(dòng)等方面均無明顯差異。造模第1天初次束縛大鼠時(shí)，大鼠表現(xiàn)出強(qiáng)烈的反抗、嘶叫、拼命撕咬束縛架，尾巴掙扎很厲害，大便小便明顯增多。造模7d后，模型組大鼠束縛時(shí)反抗降低，嘶叫和掙脫束縛減少，靈敏度降低，耳廓與爪部顏色逐漸變淡，皮毛逐漸泛

黃。造模第14天到第21天，模型組大鼠逐步出現(xiàn)神態(tài)倦怠、反應(yīng)遲緩、扎堆或蟄伏在角落、耳廓與爪部顏色變淺淡、光澤減少、皮毛泛黃干枯極易掉落、大便多稀溏，束縛捉拿時(shí)身體較軟，反抗減少，甚至停止掙扎。逍遙散組大鼠初期表現(xiàn)與模型組大鼠無明顯差別，從第2周開始各種表現(xiàn)較模型組好轉(zhuǎn)，到第3周末，精神狀態(tài)良好，動(dòng)作靈活，耳廓與爪部顏色淡粉，毛發(fā)整潔，光澤較好，麥粒形糞便。正常對(duì)照組大鼠一般狀態(tài)沒有明顯改變。

2.2逍遙散對(duì)模型組大鼠體重的影響與正常對(duì)照組比較，模型組與逍遙散組大鼠在造模第1周和第2周體重增長緩慢（P<0.01）；造模第3周，模型組大鼠體重增長較正常對(duì)照組、逍遙散組明顯減少（P<0.01），逍遙散組大鼠體重增長幅度比正常小，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.3逍遙散對(duì)模型組大鼠攝食量的影響與正常對(duì)照組比較，模型組與逍遙散組大鼠在造模第1周和第2周進(jìn)食量均減少（P<0.01或P<0.05）；造模第3周，模型組大鼠攝食量較正常對(duì)照組、逍遙散組明顯減少（P<0.01），逍遙散組大鼠進(jìn)食量增加，與正常組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表2。

2.4逍遙散對(duì)模型組大鼠曠場實(shí)驗(yàn)的影響見表3。造模21d后，模型組大鼠與正常組、逍遙散組比較，5min運(yùn)動(dòng)總距離減少（P<0.05），5min平均移動(dòng)速度減慢（P<0.05），中央?yún)^(qū)停留時(shí)間增加（P<0.05），提示逍遙散能改善模型大鼠曠場實(shí)驗(yàn)行為學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)的變化，逍遙散組大鼠各項(xiàng)指標(biāo)與正常組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.5逍遙散對(duì)Y迷宮實(shí)驗(yàn)的影響見表4。造模21d后，模型組大鼠正確反應(yīng)率低于正常組（P<0.01），全天總反應(yīng)時(shí)間高于正常組（P<0.01），逍遙散能顯著提高模型大鼠正確反應(yīng)率、減少全天總反應(yīng)時(shí)間（P<0.05），各組大鼠主動(dòng)回避率組間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

3討論

應(yīng)激是指機(jī)體受到各種應(yīng)激原刺激時(shí)，出現(xiàn)以交感興奮和下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)（HPA）軸分泌增多為主的一系列神經(jīng)內(nèi)分泌反應(yīng)，以及由此引起機(jī)體各種功能和代謝的改變。適宜的應(yīng)激反應(yīng)能夠提高個(gè)體對(duì)壞境的適應(yīng)和生存能力，而過度的尤其是慢性應(yīng)激反應(yīng)導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)不同程度的生理、心理障礙，嚴(yán)重影響人類的生活健康。如慢性應(yīng)激可以導(dǎo)致抑郁、焦慮已成為公認(rèn)的事實(shí)，諸多的實(shí)驗(yàn)研究報(bào)道在曠場實(shí)驗(yàn)、Y迷宮實(shí)驗(yàn)、高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)等行為學(xué)測試中慢性應(yīng)激大鼠表現(xiàn)出學(xué)習(xí)記憶能力下降和行為學(xué)的異常變化，而逍遙散作為抗應(yīng)激損傷的經(jīng)典名方，可改善應(yīng)激大鼠抑郁、焦慮癥狀、行為學(xué)的異常改變及學(xué)習(xí)記憶功能的減退[8-11]。

慢性束縛大鼠模型被廣泛應(yīng)用于應(yīng)激模型的研究，束縛應(yīng)激作為一種非損傷性刺激剝奪了動(dòng)物的活動(dòng)自由，與人類身心性疾病的致病過程有形似性，慢性束縛應(yīng)激方法所造成的慢性心理應(yīng)激反應(yīng)，其主要病位在肝[12]。肝主疏泄，性喜條達(dá)而惡抑郁。從中醫(yī)理論分析，若本能需求適度并得以滿足，為肝主疏泄正常，條達(dá)舒暢。實(shí)驗(yàn)中，初次束縛大鼠時(shí)，大鼠表現(xiàn)出強(qiáng)烈的反抗、嘶叫、拼命撕咬束縛架、掙扎欲脫等行為，這是由于大鼠的本能活動(dòng)突然受到遏制，情志受到強(qiáng)烈的刺激，肝疏泄太過出現(xiàn)的癥狀表現(xiàn)。隨著束縛時(shí)間延長，大鼠逐漸表現(xiàn)出情志抑郁，活動(dòng)減少，束縛時(shí)反抗減少，甚至停止掙扎等表現(xiàn)，這是由于大鼠的本能需求長期受到遏制，肝疏泄不及而為氣郁，這些癥狀表現(xiàn)符合中醫(yī)的肝氣郁結(jié)證。肝郁日久，肝氣橫逆犯脾，損傷脾胃之氣，導(dǎo)致脾失健運(yùn)?！捌⑽笧楹筇熘荆瑲庋础?，脾失健運(yùn)，攝食減少，氣血生化不足，導(dǎo)致模型大鼠出現(xiàn)體重增長緩慢，毛發(fā)干枯發(fā)黃，四肢和耳廓顏色變淺。從慢性束縛應(yīng)激大鼠在21d束縛過程中，由最初的易怒、抗?fàn)幹饾u轉(zhuǎn)變?yōu)榻箲]、抑郁、乏力、食欲減少、體重增長緩慢、便溏等癥狀表現(xiàn)來看，符合中醫(yī)肝郁致脾虛的發(fā)展過程。給予中藥復(fù)方逍遙散干預(yù)后，逍遙散組大鼠一般狀況明顯好轉(zhuǎn)，逍遙散能夠有效緩解慢性束縛應(yīng)激所產(chǎn)生的對(duì)攝食量和機(jī)體生長的影響。

曠場實(shí)驗(yàn)（OFT）是目前最常用的一種檢測動(dòng)物心理的經(jīng)典行為學(xué)監(jiān)測方法，能夠用量化的指標(biāo)客觀反映動(dòng)物類似人的復(fù)雜情緒如抑郁、焦慮程度及對(duì)未知的探究欲望等。OFT反映動(dòng)物心理行為的觀察指標(biāo)有直立、攀壁、修飾等垂直運(yùn)動(dòng)參數(shù)和走動(dòng)的距離、速度、進(jìn)入中央?yún)^(qū)次數(shù)和中央?yún)^(qū)停留時(shí)間等水平運(yùn)動(dòng)參數(shù)。本實(shí)驗(yàn)選取大鼠在中央?yún)^(qū)停留時(shí)間和5min運(yùn)動(dòng)的總距離及平均速度作為觀察指標(biāo)。中央?yún)^(qū)停留時(shí)間表示動(dòng)物啟動(dòng)活動(dòng)的潛伏期，反映動(dòng)物的空間認(rèn)知能力和對(duì)新環(huán)境的好奇程度[13]，如果空間認(rèn)知能力差，對(duì)新環(huán)境淡漠，處于焦慮或抑郁狀態(tài)，則動(dòng)物進(jìn)入開闊的中央?yún)^(qū)域時(shí)向四周移動(dòng)產(chǎn)生遲疑，在中央?yún)^(qū)的停留時(shí)間就會(huì)延長[14]。運(yùn)動(dòng)總長度和運(yùn)動(dòng)平均速度主要反映動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)情況，當(dāng)動(dòng)物處于精神抑郁狀態(tài)時(shí)運(yùn)動(dòng)能力和自主活動(dòng)的欲望會(huì)隨之下降。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示模型組大鼠中央?yún)^(qū)停留時(shí)間顯著高于正常組、逍遙散組，5min運(yùn)動(dòng)的總距離及平均速度顯著低于正常組和逍遙散組，而逍遙散組大鼠接近于正常組大鼠水平，兩者比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明21d束縛應(yīng)激造成了大鼠身心疲勞、情志抑郁、自主活動(dòng)能力以及對(duì)新環(huán)境的探究能力、空間認(rèn)知能力下降，而逍遙散能夠有效緩解大鼠的應(yīng)激狀態(tài)。再結(jié)合課題組前期的研究結(jié)果模型組大鼠出現(xiàn)HPA軸紊亂[15]，CRHR2在海馬組織的表達(dá)降低[16]，支持模型組大鼠出現(xiàn)焦慮抑郁的癥狀表現(xiàn)，該大鼠模型為肝郁脾虛證抑郁模型。

Y迷宮實(shí)驗(yàn)是評(píng)估動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶能力的常用方法之一，Y迷宮可同時(shí)檢測動(dòng)物對(duì)空間位置覺和方向覺的辨別能力和逃避條件反射能力。本次Y迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示模型組大鼠正確反應(yīng)率顯著低于正常組和逍遙散組、全天總反應(yīng)時(shí)間顯著高于正常組和逍遙散組，而逍遙散組大鼠正確反應(yīng)率、全天總反應(yīng)時(shí)間接近于正常組，表明21d慢性束縛應(yīng)激損害了大鼠的學(xué)習(xí)和記憶功能，而逍遙散能夠明顯改善大鼠的抑郁狀態(tài)，提高其學(xué)習(xí)記憶功能。以往也有眾多實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明慢性應(yīng)激大鼠Y迷宮測試成績明顯下降[17-18]。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為“有諸內(nèi)者，必形之于外”，機(jī)體外部的表現(xiàn)在一定程度上反映了機(jī)體內(nèi)部的情況。行為是機(jī)體功能的外在表現(xiàn)，學(xué)習(xí)記憶是腦的重要功能之一，神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)是行為和學(xué)習(xí)記憶的生理學(xué)基礎(chǔ)。以往的研究認(rèn)為慢性應(yīng)激可以使腦內(nèi)邊緣系統(tǒng)、額葉皮層、尤其是海馬的神經(jīng)細(xì)胞可塑性下降、凋亡與再生平衡失調(diào)，從而引起認(rèn)知、情感、行為和學(xué)習(xí)記憶能力等改變[19]。我們前期的慢性應(yīng)激大鼠海馬基因表達(dá)研究也顯示模型組大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞生長抑制，凋亡加速，眾多與抑郁、焦慮、學(xué)習(xí)記憶相關(guān)的神經(jīng)遞質(zhì)、激素出現(xiàn)了變化[16]，表明模型組大鼠出現(xiàn)行為學(xué)異常、學(xué)習(xí)記憶能力下降是有其內(nèi)在的生物學(xué)基礎(chǔ)發(fā)生了變化的。盡管課題組前期對(duì)肝郁脾虛證的生物學(xué)機(jī)制及逍遙散的作用機(jī)理進(jìn)行了大量的研究，之前的研究結(jié)果也能夠解釋肝郁脾虛證大鼠出現(xiàn)食欲減少、體重減輕、情志改變、行為學(xué)異常及學(xué)習(xí)記憶能力的下降等癥狀表現(xiàn)，也部分揭示了逍遙散治療肝郁脾虛證及慢性應(yīng)激的作用機(jī)理，但中醫(yī)的證是一個(gè)復(fù)雜的系統(tǒng)，中藥復(fù)方具有多靶點(diǎn)、多途徑、多環(huán)節(jié)的作用特點(diǎn)。因此，要明確慢性應(yīng)激肝郁脾虛證大鼠更多與行為學(xué)相關(guān)的生物學(xué)機(jī)制及逍遙散的作用機(jī)理，有待今后更深入的研究。

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（2018-04-19收稿責(zé)任編輯：徐穎）