生川烏與半夏配伍降低小鼠肝臟毒性的實(shí)驗(yàn)探究

王漪

（上海市普陀區(qū)利群醫(yī)院中藥房藥劑科 上海 200333）

中藥配伍禁忌中烏頭與半夏不能配伍最早記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，因其會產(chǎn)生劇烈的毒副作用[1]。但是眾多醫(yī)書收載了兩者配伍使用之方，如《金匱要略》中赤丸方以川烏逐寒通陽，半夏燥濕化痰治療寒氣厥逆，《太平惠民和劑局方》中小青龍湯，以附子（烏頭的子根）溫通陽氣，半夏降肺溫肺治咽中阻噎，而《中醫(yī)方劑大辭典》共收載兩者配伍使用方劑405首[2,3]。因此，臨床上對于兩者能否配伍使用一直存有爭議，本研究探討不同劑量生川烏與半夏配伍對小鼠肝臟毒性的影響，旨在為其臨床配伍使用提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1.材料與方法

1.1 試劑及儀器

羅氏2010電化學(xué)發(fā)光儀及其配套試劑；日立7600全自動生化分析儀；生川烏提取液、半夏提取液。

表1 不同劑量生川烏與半夏配伍組肝臟系數(shù)及肝功能指標(biāo)比較（±s）

表1 不同劑量生川烏與半夏配伍組肝臟系數(shù)及肝功能指標(biāo)比較（±s）

注：與正常對照組比較，△P＜0.05；與A組比較，aP＜0.05；與B組比較，bP＜0.05；與C組比較，cP＜0.05；與D組比較，dP＜0.05。

肝功能指標(biāo)谷丙轉(zhuǎn)氨酶（U/g prot） 谷草轉(zhuǎn)氨酶（U/g prot） 堿性磷酸酶（U/g prot）正常對照組 101.96±0.1717.43±2.6550.2±4.8779.6±7.82 A組 104.98±0.32△ 39.18±4.15△ 120.3±10.6△ 158.4±15.3△B 組 101.98±0.14a 18.36±2.39a 51.8±4.90a 80.4±8.03a C組 103.67±0.20△ab 32.45±3.98△ab 101.9±8.74△ab 140.2±14.6△ab D組 102.35±0.19△abc 21.67±2.78△abc 61.3±5.57△abc 92.3±10.4△abc E組 102.91±0.72△abcd 26.53±4.01△abcd 80.4±6.29△abcd 115.9±11.7△abcd分組 例數(shù) 肝臟系數(shù)（%）

表2 不同劑量生川烏與半夏配伍組氧化應(yīng)激指標(biāo)比較（±s）

表2 不同劑量生川烏與半夏配伍組氧化應(yīng)激指標(biāo)比較（±s）

注：與正常對照組比較，△P＜0.05；與A組比較，aP＜0.05；與B組比較，bP＜0.05；與C組比較，cP＜0.05；與D組比較，dP＜0.05。

分組 例數(shù) 血漿總抗氧化能力（U/ml） 活性氧（U/ml） 超氧化物歧化酶（nmol/L） 丙二醛（U/ml）正常對照組 1011.78±1.1490.48±11.2772.7±52.14.33±1.15 A組 106.20±1.25△ 123.7±14.5△ 558.9±43.6△ 6.98±1.12△B 組 1010.42±1.47a 92.36±10.7a 771.2±43.8a 4.51±0.98a C組 105.78±1.12△ab 117.4±14.8△ab 601.2±34.4△ab 6.07±1.16△ab D組 108.96±0.98△abc 96.45±10.4△abc 713.8±39.6△abc 4.98±1.04△abc E組 107.12±0.97△abcd 104.5±12.3△abcd 650.3±40.2△abcd 5.56±1.02△abcd

1.2 動物分組及給藥

SPF級昆明種小鼠60只，雌雄各半，體重（20±2）g，由實(shí)驗(yàn)中心提供。實(shí)驗(yàn)前至少飼養(yǎng)一周以適應(yīng)環(huán)境。隨機(jī)分為 6組，每組10只，雌雄各半，6組小鼠一般資料無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，可進(jìn)行分組比對。

A組灌胃給予生川烏提取液，1.6g/kg，B組給予半夏提取液1.0g/kg，C組給予生川烏-半夏（1:0.5）提取液，D組給予生川烏-半夏（1:1）提取液，E組給予生川烏-半夏（0.5:1）提取液，正常對照組給予等體積生理鹽水。2次/天，連續(xù)4周。

1.3 觀察指標(biāo)

于給藥前及給藥4周后，由小鼠眼從靜脈取血，3000r·min-1離心15min后采集血漿樣品，-80℃冷凍保存，待用。剖腹切除肝臟，生理鹽水清洗，將其置于吸水紙上，稱重，計(jì)算肝臟系數(shù)。采用羅氏2010電化學(xué)發(fā)光儀及其配套試劑及日立7600全自動生化分析儀測定肝功能指標(biāo)。氧化應(yīng)激指標(biāo)，包括血漿總抗氧化能力、活性氧、超氧化物歧化酶、丙二醛，分別采用Fe3+還原法、Fenton反應(yīng)及Gress顯色法、黃嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法（thiobarbituric acid，TBA）予以測定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本次研究中所有數(shù)據(jù)均采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，以F檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 不同劑量生川烏與半夏配伍對肝臟系數(shù)及肝功能指標(biāo)影響

不同劑量生川烏與半夏配伍組肝臟系數(shù)及肝功能指標(biāo)比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其中給予不同劑量的生川烏與半夏配伍組均顯著低于B組（P＜0.05），D組顯著低于C組與E組（P＜0.05），結(jié)果見表1。

2.2 不同劑量生川烏與半夏配伍對氧化應(yīng)激指標(biāo)影響

不同劑量生川烏與半夏配伍組氧化應(yīng)激指標(biāo)比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其中給予不同劑量的生川烏組血漿總抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性顯著低于正常對照組（P＜0.05），D組顯著低于C組與E組（P＜0.05）；活性氧、丙二醛水平顯著高于正常對照組（P＜0.05），D組顯著高于C組與E組（P＜0.05），結(jié)果見表2。

3.討論

烏頭（Aconitum carmichaeli Debx.）為毛茛科植物烏頭的塊根，為散寒止痛要藥，半夏（Pinellia ternata（Thunb.）Breit.）為天南星科多年生草本植物，具有燥濕化痰，降逆止嘔，為治療痰濕之要藥。烏頭與半夏均為有毒中藥，其中烏頭有大毒，現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)證實(shí)[4]，烏頭主要有效成分為生物堿，對肝腎功能毒性較大，中藥配伍“十八反”認(rèn)為兩者不能配伍使用，但是部分醫(yī)家認(rèn)為兩者配伍使用在寒氣厥逆、寒痰喘嗽等病癥具有良好效果，且兩者合煎未檢測到新的毒性成分產(chǎn)生[5-7]。

本研究對不同劑量生川烏與半夏配伍對小鼠肝臟毒性的影響進(jìn)行分析，結(jié)果顯示不同劑量的生川烏與半夏配伍組肝功能指標(biāo)及氧化應(yīng)激指標(biāo)均顯著優(yōu)于單純給予生川烏組，提示生川烏與半夏臨床用量范圍內(nèi)配伍通過提高小鼠肝臟抗氧化能力，拮抗生川烏肝臟毒性。但是，本實(shí)驗(yàn)樣本量較少，只能為其配伍使用提供初步依據(jù)，且長期結(jié)果以及不同配伍劑量對肝臟的影響等諸多問題有待進(jìn)一步探討。