采集量、保存時(shí)間、溶血及離心時(shí)間與速度對(duì)凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的影響

葉琳　蔡賢惠

【摘要】 目的：探討采集量、保存時(shí)間、溶血及離心時(shí)間與速度對(duì)凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的影響。方法：選取2016年3月-2017年12月在筆者所在醫(yī)院門(mén)診及住院患者100例，均行凝血四項(xiàng)檢測(cè)，分析不同采集量、保存時(shí)間、溶血及離心時(shí)間及速度對(duì)凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的影響。結(jié)果：采集量<2 ml標(biāo)本的凝血酶時(shí)間（TT）、活化部分凝血酶時(shí)間（APTT）及凝血酶原時(shí)間（PT）均長(zhǎng)于采集量合格標(biāo)本，纖維蛋白原（FIB）水平低于采集量合格標(biāo)本，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；采集量>2 ml標(biāo)本的TT、APTT、PT均短于重新采集合格標(biāo)本，F(xiàn)IB水平低于采集量合格標(biāo)本，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；室溫內(nèi)（20 ℃～25 ℃）保存4 h標(biāo)本APTT明顯長(zhǎng)于2 h標(biāo)本，TT短于2 h標(biāo)本，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；溶血標(biāo)本的TT長(zhǎng)于未溶血標(biāo)本，APTT、PT短于未溶血標(biāo)本，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；3 000 r/min離心15 min與4 000 r/min離心5 min后，標(biāo)本的FIB、TT、APTT、PT水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：采集量不合理、室溫保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)及標(biāo)本溶血將影響凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果，為較快獲得臨床檢測(cè)結(jié)果可采用4 000 r/min離心5 min替代3 000 r/min離心15 min。

【關(guān)鍵詞】 采集量； 保存時(shí)間； 溶血及離心時(shí)間； 速度； 凝血四項(xiàng)； 檢測(cè)結(jié)果

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2018.22.019 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2018）22-00-02

凝血四項(xiàng)檢查是診斷血栓性或出血性疾病、療效評(píng)估和術(shù)前預(yù)測(cè)凝血功能及抗凝血藥物用量監(jiān)測(cè)的重要指標(biāo)，主要包括凝血酶時(shí)間（TT）、活化部分凝血酶時(shí)間（APTT）、凝血酶原時(shí)間（PT）、纖維蛋白原（FIB），其診斷的準(zhǔn)確性及可靠性將對(duì)臨床疾病診斷和治療造成直接影響[1]。血凝的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)不是分析某一中特定物質(zhì)，而是監(jiān)測(cè)一系列酶促反應(yīng)終點(diǎn)，故其診斷結(jié)果易受凝血標(biāo)本存儲(chǔ)時(shí)間、采集量、離心時(shí)間、溶血等多種因素影響[2-3]。因此，對(duì)凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果異常因素進(jìn)行分析，有助于促進(jìn)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性及治療準(zhǔn)確性的提高?；诖耍狙芯繉?duì)筆者所在醫(yī)院門(mén)診及住院患者的100份血液標(biāo)本展開(kāi)研究，旨在探討采集量、保存時(shí)間、溶血及離心時(shí)間與速度對(duì)凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的影響，為實(shí)驗(yàn)室檢查凝血四項(xiàng)的質(zhì)量控制提供指導(dǎo)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年3月-2017年12月筆者所在醫(yī)院門(mén)診及住院患者100例為研究對(duì)象，所有患者凝血功能均正常，排除有出血傾向者；所有患者自愿參與本研究并簽署知情同意書(shū)。100例研究對(duì)象中，男43例，女57例；年齡26～49歲，平均（37.84±6.32）歲。本研究已獲得筆者所在醫(yī)院倫理委員會(huì)審核通過(guò)。

1.2 方法

（1）采集量不同：100例標(biāo)本中采集量異常40例，其中20例采血量<2ml，20例采血量>2 ml，重新采集血量異常者靜脈外周血2 ml。及時(shí)采用離心機(jī)進(jìn)行離心處理，離心速度為3 000 r/min，

10 min后血漿顏色為淡黃色液體，使用美國(guó)沃芬公司全自動(dòng)血凝儀（型號(hào)ALC TOP-700）實(shí)施凝血四項(xiàng)檢查。（2）保存時(shí)間不同：隨機(jī)選取20例采集量正常的凝血標(biāo)本進(jìn)行即刻凝血四項(xiàng)檢測(cè)，并在室溫內(nèi)（20 ℃～25 ℃）保存標(biāo)本，分別將這20例標(biāo)本保存1、2、4 h，在各自到達(dá)時(shí)間后進(jìn)行凝血四項(xiàng)檢測(cè)。

（3）溶血：采集量正常的標(biāo)本中溶血（離心后血漿顏色為淺紅色液體）20例，重新采取溶血患者靜脈外周血2 ml（離心后血漿顏色為淡黃色液體），均行凝血四項(xiàng)檢測(cè)。（4）離心時(shí)間和速度不同：選取采集量正常的凝血標(biāo)本20例，使用一次性塑料吸管將1 ml吸到干凈的塑料試管中，獲得兩份相同的血液樣本，一份離心速度為3 000 r/min，離心時(shí)間為15 min，另一份離心速度為4 000 r/min，離心時(shí)間為5 min，即刻對(duì)血漿標(biāo)本進(jìn)行凝血四項(xiàng)檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo)

記錄不同采集量、不同保存時(shí)間、溶血和未溶血及不同離心時(shí)間與速度的凝血四項(xiàng)（FIB、TT、APTT、PT）檢測(cè)結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本研究數(shù)據(jù)采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析和處理，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 采集量不同標(biāo)本凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果

與重新采集量合格標(biāo)本比較，采集量<2 ml標(biāo)本的TT、APTT及PT均明顯較高，F(xiàn)IB水平較低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；采集量>2 ml標(biāo)本的TT、APTT、PT均短于重新采集合格標(biāo)本，F(xiàn)IB水平較低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1、表2。

2.2 不同保存時(shí)間標(biāo)本凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果

即刻及1、2、4 h標(biāo)本的FIB、PT比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；4 h標(biāo)本的APTT明顯長(zhǎng)于2 h標(biāo)本，TT短于2 h標(biāo)本，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表3。

2.3 溶血和未溶血標(biāo)本凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果

與未溶血標(biāo)本比較，溶血標(biāo)本的TT明顯較長(zhǎng)，APTT、PT較短，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；溶血與未溶血標(biāo)本的FIB水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表4。

2.4 不同離心時(shí)間與速度標(biāo)本凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果

3 000 r/min離心15 min與4 000 r/min離心5 min處理后，標(biāo)本的FIB、TT、APTT、PT水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

（P>0.05），見(jiàn)表5。

3 討論

在凝血四項(xiàng)檢測(cè)中確保檢測(cè)結(jié)果質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)為血標(biāo)本采集，抗凝劑和標(biāo)本比例將對(duì)被檢標(biāo)本的結(jié)果造成直接的影響。有關(guān)研究表明，抗凝劑濃度減少或增加均將直接影響凝血因子，且血量減少0.5 ml將延長(zhǎng)凝固時(shí)間，增加0.5 ml將縮短凝固時(shí)間[4]。本研究中，采集量<2 ml標(biāo)本的TT、APTT及PT均明顯長(zhǎng)于重新采集合格標(biāo)本，F(xiàn)IB水平較低，而采集量>2 ml標(biāo)本的TT、APTT及PT均短于重新采集合格標(biāo)本，F(xiàn)IB水平較低，與上述報(bào)道相似，分析其主要原因?yàn)闃?biāo)本注入血太多將造成抗凝劑相對(duì)過(guò)少，造成血液凝固或血中出現(xiàn)微小凝塊，進(jìn)而縮短凝固時(shí)間；而注血太少將造成抗凝劑相對(duì)過(guò)多，延長(zhǎng)凝固時(shí)間[5-6]。

本研究中，4 h標(biāo)本APTT明顯長(zhǎng)于2 h標(biāo)本，TT短于2 h標(biāo)本，而即刻及1、2、4 h標(biāo)本的FIB、PT比較未見(jiàn)明顯差異，表明在室溫下保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)將影響凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。分析其主要原因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間保存在室溫（20 ℃～25 ℃）條件下，將造成易變凝血因子Ⅷ及Ⅴ因子對(duì)熱不穩(wěn)定，逐漸喪失凝血因子活性，影響凝固時(shí)間[7-8]。在臨床生化檢驗(yàn)工作中標(biāo)本發(fā)生溶血是一種常見(jiàn)影響因素，本研究中溶血標(biāo)本的TT明顯長(zhǎng)于未溶血標(biāo)本，APTT、PT較短，而FIB水平比較未見(jiàn)明顯差異，證實(shí)溶血將造成凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果異常。抽血過(guò)程不當(dāng)或不順利等機(jī)械因素而破壞紅細(xì)胞是標(biāo)本溶血的主要原因，溶血標(biāo)本將造成成熟紅細(xì)胞膜破裂，釋放出磷脂，加之溶血標(biāo)本的凝血活性與血小板第Ⅲ因子相似，進(jìn)而對(duì)凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果造成影響[9-10]。本研究中，3 000 r/min，15 min與4 000 r/min，5 min離心處理后，標(biāo)本的FIB、TT、APTT、PT水平比較未見(jiàn)明顯差異。提示4 000 r/min離心5 min可替代3 000 r/min離心15 min對(duì)血小板血漿進(jìn)行制備，縮短標(biāo)本處理時(shí)間，較快地獲得準(zhǔn)確的凝血檢驗(yàn)報(bào)告[11-12]。

綜上所述，采集量不合格、室溫保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)及溶血將影響凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的可靠性及準(zhǔn)確性，應(yīng)控制凝血標(biāo)本采集量、離心及保存到送檢過(guò)程等環(huán)節(jié)，規(guī)范操作流程。

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（收稿日期：2018-03-14）